研究背景和目的體外受精-胚胎移植(IVF-ET)過程中,輸卵管炎性病變如積液等可能影響宮腔環(huán)境及子宮內膜容受性,降低胚胎著床率和臨床妊娠率,增加自然流產率和異位妊娠率。研究顯示,IVF-ET前對積液輸卵管進行處理,如手術結扎、切除輸卵管或穿刺抽吸積液等,患者的繼續(xù)妊娠率遠高于未行任何干預的女性。目前,常規(guī)的積液輸卵管處理方式有:開腹或腹腔鏡下輸卵管切除術、輸卵管近端結扎術、輸卵管遠端造口術及陰道超聲引導下輸卵管積液穿刺抽吸術等。這些方法各有利弊,主要弊端有,切除或結扎輸卵管可能因血管神經的損傷而影響卵巢功能,輸卵管造口術和積液抽吸術容易復發(fā);有些患者因各種原因不適合手術治療等。本研究即探討一種非手術處理積液輸卵管、不影響卵巢功能、復發(fā)率低的方法。設定研究方向為采用一種新型配方的醫(yī)用膠,通過栓堵方式阻斷輸卵管與子宮的交通,去除輸卵管積液對胚胎著床的不利影響。關于IVF-ET前積液輸卵管的栓堵,尚不屬于常規(guī)處理方法,多為介入下機械性栓堵物如微彈簧圈的栓堵等。將此醫(yī)用膠用于IVF-ET前積液輸卵管的栓堵未見報道。為驗證其有效性及安全性,本研究為前期動物實驗。選擇與人類輸卵管管腔大小結構相近的新西蘭兔子宮為研究對象,先通過注菌方式建立兔子宮積液模型,再應用α-氰基丙烯酸酯醫(yī)用膠,對兔的積液子宮進行栓堵。術后通過子宮輸卵管造影評價醫(yī)用膠對兔積液子宮的堵塞效果,并觀察栓堵后子宮、輸卵管及卵巢的組織形態(tài)學變化、進行組織的免疫組化檢測、凋亡檢測和電鏡觀察等,評價此醫(yī)用膠的栓堵效果及對兔子宮等器官組織的影響,以期為臨床上IVF-ET前積液輸卵管的處理提供實驗依據(jù)。方法選擇新西蘭成年雌兔作為實驗動物,建立兔子宮積液模型,再對積液子宮進行醫(yī)用膠栓堵。為摒除兔動情周期不同時期激素對所觀察指標的影響,對所有兔進行外陰粘膜觀察和陰道脫落細胞學觀察,判定動情周期,將研究的取材時間設定在兔的動情初-中期階段。1.兔子宮積液模型的建立通過從兔陰門插管至陰道、宮頸及宮腔并開腹觀察輔助的方式,向宮腔內注入菌液,建立兔子宮積液模型。所注菌液分別為1.5 ×108/ml金黃色葡萄球菌菌液、大腸埃希菌菌液及1:1混合的金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌菌液;術后觀察時間分別為1周、2周和3周。通過對不同時間積液子宮的大體形態(tài)學、組織學觀察及肌層厚度比較,確定合適的菌液和觀察時間建立兔子宮積液模型。2.醫(yī)用膠栓堵兔積液子宮選擇35只雙側子宮積液形成良好的兔,隨機分為實驗組(23只)和對照組(12只),另取12只正常兔(無子宮積液)作為空白對照組。通過兔陰門插管至陰道、宮腔并開腹輔助的方法,對兔積液子宮的近端進行醫(yī)用膠栓堵。對照組和空白對照組僅行插管手術,不進行醫(yī)用膠栓堵。每組再分為2個亞組,分別于術后1個月、6個月與術前比較體重變化;術后1個月、6個月實驗組和對照組兔均行子宮輸卵管造影檢查,進行子宮腔栓堵率的比較。術后1個月和6個月,實驗組分別各處死3只兔(均為雙側子宮腔均栓堵成功的兔);對照組和空白對照組各處死2只兔。觀察子宮、輸卵管和卵巢的組織學改變、比較子宮肌層厚度等。術后6個月兔再進行組織的雌孕激素受體測定和比較、凋亡檢測及透射電鏡觀察等,以此綜合評價醫(yī)用膠對子宮腔的栓堵效果及對子宮等器官組織學變化的影響。結果1.兔子宮積液模型的建立造模成功的兔子宮明顯擴張,內膜及肌層變薄,見炎細胞浸潤。子宮肌層厚度,術后1周與術后2周和3周比較,均有統(tǒng)計學差異;術后2周與術后3周比較,無統(tǒng)計學差異。術后2周子宮積液形成程度可以滿足實驗要求。結合注入菌液情況,認為注入1.5×108/ml金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌1:1混合菌液組,于術后2周可建立良好的子宮積液模型。2.積液子宮的醫(yī)用膠栓堵(1)兔存活情況及體重變化:35只子宮積液兔中成功進行醫(yī)用膠栓堵手術且術后正常存活的有31只,實驗組20只,對照組11只。兩組死亡率無統(tǒng)計學差異;術后1個月和6個月,實驗組和對照組兔體重均有增加,兩組比較均無統(tǒng)計學差異。實驗組術后1個月及6個月分別與術前體重比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)子宮輸卵管造影:實驗組術后1個月,子宮堵塞率95.00%;術后6個月,子宮堵塞率85.00%。對照組術后1個月和6個月,堵塞率為0。實驗組和對照組比較,子宮堵塞率有統(tǒng)計學差異(P0.05)。實驗組不同時間點組內比較,子宮堵塞率無統(tǒng)計學差異。(3)大體觀察:對照組積液子宮增粗,擴張;輸卵管及卵巢無明顯改變。實驗組栓堵即時子宮腔略增粗,表面光滑;術后1個月,栓堵部位長度略縮小,皺縮質硬,子宮腔內見膠聚合體;術后6個月,栓堵部位子宮明顯皺縮;輸卵管卵巢無明顯改變;積液部位子宮無明顯改變。(4)組織形態(tài)學:分別觀察空白對照組正常子宮、對照組積液子宮、對照組積液部位近端子宮、實驗組栓堵部位子宮、實驗組栓堵部位近端子宮等。子宮:對照組術后1個月和6個月,積液子宮明顯擴張,內膜變薄,內膜下見炎細胞浸潤。積液部位近端子宮,子宮內膜明顯增厚,內膜固有層內血管擴張、充血,內膜上皮下可見散在的炎細胞浸潤。實驗組栓堵后1個月,栓堵部位子宮腔擴張,腔內可見大量絲網狀物(膠聚合體),粘膜上皮見紊亂的復層上皮細胞、或有局部上皮缺失,見少量炎細胞浸潤及纖維化。栓堵部位近端子宮,子宮內膜呈單層立方狀上皮,固有層散在極少量嗜酸性粒細胞,未見明顯病理學改變。實驗組栓堵后6個月,栓堵部位鏡下結構雜亂模糊,子宮內膜正常結構消失,無明顯上皮組織,見肉芽組織增生及纖維化。栓堵部位近端子宮,術后1個月與術后6個月的組織形態(tài)學類似,均無明顯病理學改變。子宮肌層厚度比較,實驗組術后1個月,子宮肌層變薄,與術后6個月比較有統(tǒng)計學差異(P0.05);術后1個月實驗組與對照組比較有統(tǒng)計學差異(P0.05),術后6個月無統(tǒng)計學差異。余無明顯病理學變化。輸卵管:對照組和實驗組,輸卵管外膜血管擴張、充血,腔內見少量炎細胞浸潤等。余無明顯病理學變化。卵巢:各組均無明顯病理學改變。(5)雌孕激素受體(ER、PR)測定與凋亡檢測:子宮ER、PR測定及凋亡檢測顯示,積液子宮、栓堵部位子宮、積液部位近端子宮ER表達減弱,PR表達增強;凋亡表達增強。正常子宮與積液子宮、正常子宮與栓堵部位子宮、正常子宮與積液部位近端子宮ER、PR測定平均光密度值、凋亡檢測平均光密度值均有統(tǒng)計學差異,栓堵部位近端子宮與積液部位近端子宮ER比較有統(tǒng)計學差異;其余比較均無統(tǒng)計學差異。輸卵管ER、PR測定及凋亡檢測顯示,與空白對照組輸卵管比較,實驗組輸卵管ER表達減弱,平均光密度值測定有統(tǒng)計學差異;對照組和實驗組輸卵管PR表達均增強,與空白對照組比較平均光密度值測定均有統(tǒng)計學差異。其余比較均無統(tǒng)計學差異。凋亡檢測平均光密度值均無統(tǒng)計學差異。卵巢ER、PR測定及凋亡檢測顯示,各組比較均無統(tǒng)計學差異。(6)透射電鏡觀察:積液子宮顯示上皮細胞腫脹、微絨毛缺失,細胞器如線粒體等出現(xiàn)空泡化。栓堵后子宮,結構紊亂,細胞核染色質減少、呈核溶解狀態(tài),可見吞噬細胞等。對照組和實驗組輸卵管細胞器如線粒體、內質網等輕微空泡化。各組卵巢各類細胞和細胞器結構清晰正常,偶見線粒體損傷。結論1.通過陰道插管并開腹手術輔助的方式向兔子宮腔內注入1.5×108/ml的1:1混合的金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌菌液,2周左右時間可建立較為穩(wěn)定的子宮積液模型。2.醫(yī)用膠能有效栓堵兔積液子宮,對兔健康存活無不良影響;栓堵對兔子宮的主要影響即栓堵部位的組織壓迫及粘連改變,對周圍組織及器官無明顯有害影響;栓堵后子宮、輸卵管及卵巢的組織學、免疫組化、凋亡及電鏡觀察結果顯示,栓堵不影響受體表達,可以有效去除積液對宮腔的不良影響,有利于宮腔環(huán)境的改善;栓堵對卵巢無明顯影響。3.兔子宮與人類輸卵管的管腔大小和組織結構相近,故兔子宮可以作為人類輸卵管的研究模型。對醫(yī)用膠栓堵兔子宮可行性、有效性和不良影響的研究顯示,醫(yī)用膠用于人類IVF-ET前積液輸卵管的栓堵具有可行性。
【學位單位】：山東大學
【學位級別】：博士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R714.8
【部分圖文】：

兔子宮輸卵管卵巢Figure1Theutems,fallopiantubeandovaryofrabbit

圖１兔子宮輸卵管卵巢逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１邋Ｔｈｅ邋ｕｔｅｒａｓ，邋ｆａｌｌｏｐｉａｎ邋ｔｕｂｅ邋ａｎｄ邋ｏｖａｒｙ邋ｏｆ邋ｒａｂｂｉｔ逡逑

表層細胞為主，細胞大，核小而致密（２０0ｘ）逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋２－２邋Ｖａｇｉｎａ邋ｅｘｆｏｌｉｏｃｙｔｏｌｏｇｙ邋Ｅｓｔｒｕｓ．逡逑ｈｅ邋ｓｕｒｆａｃｅ邋ｃｅｌｌｓ邋ａｒｅ邋ｄｏｍｉｎａｎｔ，邋ｔｈｅ邋ｃｅｌｌｓ邋ａｒｅ邋ｌａｒｇｅ，邋ｐｏｌｙｇｏｎａｌ，邋ａｎｄ邋ｔｈｅ邋ｎｕｃｌｅｕｓ邋ｉｓ邋ｓｄｅｎｓｅ邋（２０0ｘ）逡逑子宮積液統(tǒng)計圖逡逑邐Ｍ金黃色■邐「｜廠｜邐□大腸ｎ邐１邐□混合邐Ｋｎ邐Ｋ逡逑Ｉ邋媝逡逑

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 葉榮欽;林修素;;犬子宮角脫出引起腹股溝疝并發(fā)難產報告[J];福建畜牧獸醫(yī);2006年02期

2 馬小蓉;貓一側子宮角脫出引起難產的處理[J];中國獸醫(yī)雜志;2003年11期

3 張玉萍,李志源,潘建波,馬小蓉;貓子宮角脫出引起難產[J];中國獸醫(yī)雜志;1999年12期

4 高龍;;母貓子宮截除術[J];上海畜牧獸醫(yī)通訊;1987年05期

5 張宏程;;雌雄同體畸形仔豬一例[J];甘肅畜牧獸醫(yī);1987年04期

6 趙光遠;馬明榮;;豬的子宮角輸精能提高受胎率[J];吉林畜牧獸醫(yī);1988年06期

7 王懷友,王懷忠;子宮捻轉性難產的病因與治療[J];中國獸醫(yī)科技;1989年05期

8 楊登嵩;陳明法;邵靜山;;貓子宮傳入神經的節(jié)段性分布[J];解剖學雜志;1989年04期

9 張周平;;豬胚胎對子宮生長的影響[J];青海畜牧獸醫(yī)雜志;1989年05期

10 張靜;王晶;王鎖銀;陳志榮;呂息芳;;手術治療母豬閹割后腸管或子宮角嵌閉與粘連[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2012年08期

相關會議論文 前2條

1 鄧益鋒;;一例犬子宮角殘端蓄膿病例的診斷與治療[A];中國畜牧獸醫(yī)學會獸醫(yī)影像技術學會分會第十一次學術研討會論文集[C];2008年

2 秦寶占;孟凡正;;淺談羊超數(shù)排卵胚胎移植程序[A];河北省畜牧獸醫(yī)學會2004年學術年會論文集[C];2004年

相關重要報紙文章 前10條

1 薛紅波;羊剖腹探查及單側子宮角摘除術[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2015年

2 薛紅波;羊單側子宮角摘除術[N];河北科技報;2015年

3 辛學;閹割母仔豬有技巧[N];云南科技報;2007年

4 河北省畜牧獸醫(yī)研究所 李英 安永福 劉榮昌 河北農業(yè)大學 曹玉鳳 李建國;利用性控技術定犢牛男女[N];河北科技報;2006年

5 鄭延平;五種情況下豬不能閹割[N];河南科技報;2008年

6 姚春德;閹豬五不行[N];山東科技報;2002年

7 姚春德;閹豬五不宜[N];山西科技報;2002年

8 梁巍;怎樣做好奶牛的懷孕與未孕鑒別[N];中國畜牧報;2004年

9 呂紀增;肉牛繁殖新技術[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2005年

10 云南省家畜改良工作站 趙開典;牛繁殖新技術[N];云南科技報;2007年

相關博士學位論文 前2條

1 徐安然;醫(yī)用膠對兔積液子宮的栓堵效果及組織學研究[D];山東大學;2019年

2 張建紅;Toll樣受體對子宮NK細胞的調控特征及其與母胎耐受的關系[D];中國科學技術大學;2007年

相關碩士學位論文 前7條

1 李敏敏;妊娠小鼠子宮天然淋巴樣細胞的鑒定及功能分析[D];安徽醫(yī)科大學;2017年

2 劉聰;LPS對母兔子宮中不同部位TLR2，TLR4及其免疫相關細胞因子表達的影響[D];四川農業(yè)大學;2013年

3 周慧麗;子宮角部位妊娠與惡性滋養(yǎng)細胞腫瘤超聲聲像圖及血HCG對比研究[D];新疆醫(yī)科大學;2008年

4 陳晨;兔各器官中TLRs表達譜以及脂多糖對母兔子宮中生殖激素受體表達的影響[D];四川農業(yè)大學;2015年

5 王世雷;運用B超觀察母牦牛生殖系統(tǒng)及胎兒發(fā)育[D];甘肅農業(yè)大學;2008年

6 邱玉華;孕酮受體在健康犬與子宮積膿犬子宮角組織分布變化[D];山東農業(yè)大學;2014年

7 賈海明;梅花鹿腹腔鏡子宮角輸精技術研究[D];東北農業(yè)大學;2009年

本文編號：2831731