目的探討Photolon介導(dǎo)的光動力療法(Photodynamic therapy,PDT)對Balb/c雌性小鼠子宮內(nèi)膜異位細(xì)胞及內(nèi)膜異位病灶的治療效果。方法測量光敏劑的吸光度。將6-7周齡Balb/c雌性小鼠(體重為20g)在水合氯醛麻醉下行自體子宮內(nèi)膜組織移植術(shù),制備內(nèi)膜異位模型。術(shù)后給予激素治療促進(jìn)子宮內(nèi)膜異位模型的生長,當(dāng)模型病灶平均大小為6mm時為構(gòu)建模型成功。模型成功后原代培養(yǎng)Balb/c雌性小鼠在位及異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞,培養(yǎng)成功后分為對照組、單純光照組、光敏劑組及Photolon介導(dǎo)的PDT組,在顯微鏡下觀察各組治療后形態(tài)變化。用MTT實(shí)驗(yàn)分析Photolon介導(dǎo)的PDT治療對小鼠異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞的抑制率及半數(shù)致死量。隨機(jī)抽取14只模型鼠分為對照組和Photolon介導(dǎo)的PDT組。對照組鼠尾注射200ul生理鹽水,3小時后自然光照射lOmin;PDT組:鼠尾注射2mg/ml的Photolon溶液200ul,3 h后行PDT治療,照射劑量為2.5 J/cm2(660 nm波長,1W,距離病灶表面5cm照射7min)。進(jìn)行體內(nèi)治療后每隔7天測量異位病灶大小,各組5周后處死,取小鼠子宮內(nèi)膜異位病灶制備病理切片,HE染色觀察各組異位子宮內(nèi)膜的病理改變。結(jié)果1.體外培養(yǎng)的異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞的間質(zhì)細(xì)胞較在位的間質(zhì)細(xì)胞小,且分散生長,細(xì)胞呈細(xì)長的紡錘形,伸展挺直裝,邊緣清晰,胞漿少,核較大呈橢圓形,生長迅速,生長模式似癌細(xì)胞。2.Photolon介導(dǎo)的PDT治療體外培養(yǎng)的異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞后細(xì)胞大量死亡,細(xì)胞原有細(xì)長紡錘形得到破壞、邊界模糊、胞漿碎裂、細(xì)胞核固縮、變形甚至碎裂消失等變化。3.不同濃度的 Photolon(0.015ug/ml、0.03ug/ml、0.06ug/ml、0.125ug/ml、0.25ug/ml、0.5ug/ml)作用后小鼠異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞的抑制率(3.82%、10.64%、20.07%、40.37%、71.39%、82.02%)均高于對照組,其濃度0.160ug/ml時達(dá)到細(xì)胞半致死量。4.對照組小鼠子宮內(nèi)膜異位灶繼續(xù)增大,而Photolon+PDT組異位病灶停止生長,并逐漸減小。5.HE染色結(jié)果示:與對照相比,photolon+PDT組鏡下細(xì)胞連續(xù)排列被破壞,細(xì)胞形態(tài)亦遭到破壞,胞漿比減少,部分細(xì)胞核固縮,可見泡狀核和核周空暈。結(jié)論P(yáng)hotolon介導(dǎo)的PDT治療能夠有效抑制小鼠子宮內(nèi)膜異位病灶的生長。
【學(xué)位單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R711.71
【部分圖文】：

從測得Ｐｈｏｔｏｌｏｎ的吸光度可以看出，當(dāng)波長為４００ｎｍ時出現(xiàn)最大吸收峰；隨著逡逑波長的增大在５００ｎｍ、６７０ｎｍ時也出現(xiàn)了吸收峰，但這些吸收峰值的相對強(qiáng)度隨著逡逑波長的逐漸增大而減弱，結(jié)果見圖１。逡逑３邋ＭＯ邋－逡逑ｔ邋？逡逑？邐ｉ邐？逡逑）？００邐？？邐？逡逑？邐？邐＊逡逑２Ｍ０－邐ｆ逡逑８邋，邋：邋？邋邐逡逑ｆ邐＊邐｜邐？邐ａｐｓｔａｗｒａｌ逡逑＼邋／邋？逡逑：／邋Ｉ逡逑�。苓姡铃义希茫福�0４．．￣．．？＿邋二邋．．．．．邋ｒ－．＂？？？？？＿■？？？？“邋－？？？？？？？Ｔ—……？？？？？？？？—．．．．．．．．．—．．．…十邋二二二邋，逡逑圖１邋ｐｈｏｔｏｌｏｎ的吸光度逡逑３．２小鼠子宮內(nèi)膜異位造模成功效果逡逑Ｂａｌｂ／ｃ雌性小鼠子宮內(nèi)膜異位造模后，在激素藥物刺激下初期生長較緩慢；中逡逑期開始可見到小鼠下腹部包塊形成；后期逐漸發(fā)展為囊性包塊，表面呈紫藍(lán)色。當(dāng)逡逑子宮內(nèi)膜異位病灶的平均直徑達(dá)到６ｍｍ時，視為達(dá)到實(shí)驗(yàn)條件，造模成功率為９０％，逡逑如圖２。逡逑９逡逑

異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞的間質(zhì)細(xì)胞形態(tài)較在位的間質(zhì)細(xì)胞小，且分散生長，細(xì)逡逑胞呈細(xì)長的紡錘形，伸展挺直狀，邊緣清晰，胞漿少，核較大、呈橢圓形，生長迅逡逑速，生長模式似癌細(xì)胞，如圖３。逡逑在位細(xì)胞邐異位細(xì)胞逡逑圖３體外培養(yǎng)的小鼠子宮內(nèi)膜在位細(xì)胞和異位細(xì)胞的形態(tài)差異（ｘ邋２００）逡逑３．邋４邋Ｐｈｏｔｏ邋Ｉｏｎ介導(dǎo)ＰＤＴ對小鼠ＥＭＳ細(xì)胞的影響逡逑１０逡逑

期開始可見到小鼠下腹部包塊形成；后期逐漸發(fā)展為囊性包塊，表面呈紫藍(lán)色。當(dāng)逡逑子宮內(nèi)膜異位病灶的平均直徑達(dá)到６ｍｍ時，視為達(dá)到實(shí)驗(yàn)條件，造模成功率為９０％，逡逑如圖２。逡逑９逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 王若寧;丁楊;周建平;;基于光動力學(xué)療法的光敏劑抗腫瘤靶向遞送系統(tǒng)研究進(jìn)展[J];中國新藥雜志;2014年16期

2 方起程;;癌癥光動力治療和新抗癌光敏劑華卟啉鈉[J];中國新藥雜志;2014年13期

3 汪凌云;曹德榕;;卟啉類光敏劑在光動力治療中的應(yīng)用研究[J];有機(jī)化學(xué);2012年12期

4 鄧時貴;張嫻;巫志峰;李偉英;;小鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型的建立及其異位內(nèi)膜蛋白質(zhì)的差異表達(dá)譜分析[J];中國新藥雜志;2007年07期

本文編號：2809543