【摘要】：第一部分納米脂質(zhì)微泡超聲造影劑的制備目的:通過冷凍干燥法、機(jī)械振蕩法和生物素-親和素連接法制備非靶向納米微泡(N-NBs)及卵巢癌靶向的促黃體生成素釋放激素(LHRH)-納米微泡(LHRH-NBs)。方法:將二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)/生物素化二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺(DSPE-PEG(2000)Biotin)、甘油及PBS等按一定比例混合均勻,通過冷凍干燥法及機(jī)械振蕩法制備非靶向納米脂質(zhì)微泡超聲造影劑/生物素化非靶向納米脂質(zhì)微泡超聲造影劑。利用生物素-親和素連接法將生物素化的促黃體生成素釋放激素(luteinzing hormone-releasing hormone,LHRH)抗體連接于生物素化的納米脂質(zhì)超聲造影劑,即制成LHRH-靶向納米超聲造影劑。結(jié)果:成功制備出N-NBs及LHRH-NBs兩種納米超聲造影劑,兩種微泡的外觀圓整,分布均勻,非靶向納米微泡及LHRH-靶向納米微泡粒徑分別集中于360nm、500nm,室溫下可保存7d。結(jié)論:通過冷凍干燥法、機(jī)械振蕩法和生物素-親和素連接法,可成功制備出N-NBs及LHRH-NBs兩種納米微泡且兩種納米微泡粒徑小、穩(wěn)定性高。第二部分納米微泡在裸鼠移植瘤中顯影目的:觀察N-NBs、LHRH-NBs兩種納米微泡造影劑在裸鼠卵巢癌(OVCAR-3)移植瘤模型體內(nèi)顯影情況。方法:將裸鼠卵巢癌移植瘤模型隨機(jī)分成3組(每組10只),經(jīng)尾靜脈分別注入N-NBs、LHRH-NBs及聲諾維,觀察三種造影劑在卵巢癌組織中的顯影情況。結(jié)果:LHRH-NBs與N-NBs相比,其顯影強(qiáng)度及顯影持續(xù)時(shí)間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);LHRH-NBs、N-NBs分別與聲諾維比較,顯影強(qiáng)度均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),但持續(xù)顯影時(shí)間均長(zhǎng)于聲諾維,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。結(jié)論:LHRH-NBs、N-NBs顯影能力與聲諾維相當(dāng),但持續(xù)顯影時(shí)間較長(zhǎng)。第三部分納米微泡通過腫瘤組織內(nèi)皮間隙及與細(xì)胞結(jié)合實(shí)驗(yàn)?zāi)康?熒光顯微鏡觀察N-NBs、LHRH-NBs兩種納米微泡穿過血管內(nèi)皮間隙情況;免疫熒光觀察N-NBs、LHRH-NBs穿過血管內(nèi)皮間隙與腫瘤細(xì)胞的結(jié)合情況。方法:將Di I標(biāo)記N-NBs、LHRH-NBs兩種納米微泡經(jīng)尾靜脈注入顯影后處死荷瘤裸鼠,立即取出腫瘤制成5μm冰凍切片,倒置熒光顯微鏡直接觀察被Di I標(biāo)記納米微泡穿過血管內(nèi)皮情況;實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組分別將LHRH-NBs、N-NBs經(jīng)尾靜脈注入裸鼠體內(nèi),顯影后取出腫瘤組織制成5μm冰凍切片行免疫熒光觀察;空白組直接取腫瘤組織制成5μm冰凍切片,按常規(guī)免疫熒光法步驟進(jìn)行熒光觀察。結(jié)果:LHRH-NBs與N-NBs均能夠通過血管內(nèi)皮間隙;LHRH-NBs通過血管內(nèi)皮間隙后能與腫瘤細(xì)胞靶向結(jié)合。結(jié)論:自制納米造影劑均能夠通過血管內(nèi)皮間隙且LHRH-NBs能與卵巢癌細(xì)胞靶向結(jié)合。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.31;R-332
【圖文】：

第一部分 納米脂質(zhì)微泡超聲造影劑的制備5圖1-1 非靶向納米脂質(zhì)超聲造影劑(400倍)圖1-2 N-NBs粒徑圖1-3 靶向納米脂質(zhì)超聲造影劑(400倍)

N-NBs粒徑

靶向納米脂質(zhì)超聲造影劑(400倍)

【參考文獻(xiàn)】

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1 王婷;邱麗華;高志;李攀;曾崢;歐陽(yáng)紫蘭;;載多西紫杉醇脂質(zhì)微泡聯(lián)合超聲靶向微泡破裂對(duì)兔VX2舌癌頸部淋巴轉(zhuǎn)移瘤作用的初步研究[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2014年05期

2 孫陽(yáng);王志剛;;多功能超聲造影劑分子顯像與治療研究進(jìn)展[J];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)雜志;2012年01期

本文編號(hào)：2804546