發(fā)布時間：2020-05-20 05:08

【摘要】：目的:本實驗探討miR-16在宮頸癌Hela細胞中表達及順鉑敏感性的關(guān)系。方法:脂質(zhì)體lipofectamine2000介導(dǎo)miR-16成熟體模擬物(mimics)及陰性對照片段(NC)分別轉(zhuǎn)染宮頸癌Hela細胞。實時熒光定量PCR檢測各組細胞中miR-16的表達;四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法檢測細胞的順鉑細胞存活率;蛋白印跡法檢測細胞中Bcl-2蛋白、Bax蛋白、caspase-3蛋白的表達。結(jié)果:1.qRT-PCR結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染miR-16在Hela細胞中高表達。2.MTT結(jié)果表明miR-16表達能明顯增加Hela細胞對順鉑的敏感性。3.Western blot結(jié)果提示,與對照組比較,miR-16的Hela細胞中Bcl-2表達水平下降,Bax、caspases-3表達水平升高。結(jié)論:MiR-16增強宮頸癌Hela細胞對順鉑的敏感性,miR-16可能靶向下調(diào)宮頸癌Hela細胞Bcl-2蛋白表達,并協(xié)同上調(diào)Bax、caspase-3蛋白的表達,從而為宮頸癌的治療提供新靶點。
【圖文】：

第四章 結(jié) 果iR-16在宮頸癌Hela細胞中轉(zhuǎn)染后表達了觀察miR-16在宮頸癌Hela細胞中表達，，本實驗采用實時qRT-組為：空白對照組（Hela細胞組）、溶劑對照組（Lip2000+HelamiR-16 NC+Hela細胞）、miR-16過表達組（miR-16 mimics+Hel、B、C、D四組，觀察其表達差異。結(jié)果顯示：與A組相比，D明顯升高，為A組的2倍，有顯著性差異((p<0．01，n=4)，而與A表達量未見明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0．05，n=4)。實iR-16轉(zhuǎn)染后在Hela細胞中表達明顯高于空白對照組。(如圖4.1.1所

分為空白對照組（Hela細胞組）、溶劑對照組（Lip2000+Hela載組（miR-16 NC+Hela細胞）、miR-16過表達組（miR-16 mimics+Hel經(jīng)不同濃度的順鉑處理，順鉑的濃度為：0、0．5、1、2、4umol/l，分別48h后。結(jié)果顯示：D組分別與A、B、C組比較，細胞活性值明顯降低有統(tǒng)計學(xué)意義（ p<0.05，n =4），與A組相比，B、C組細胞活性無明顯異無統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.05，n =4）。由此可知，miR-16+Hela/DDP細胞活性值明顯降低，提示轉(zhuǎn)染miR-16后的Hela細胞對順鉑敏感性明顯提高度的增高，轉(zhuǎn)染miR-16后的Hela細胞活性下降，隨著時間延長，轉(zhuǎn)染miHela細胞活性也下降。（如圖4.2.1、4.2.2所示）
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R737.33

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本文編號：2672112