【摘要】：目的:研究去乙�；�3(Sirtuin 3,Sirt3)在正常妊娠(Normal control,NC)與子癇前期(Pre-eclampsia,PE)胎盤(pán)組織中的表達(dá)水平,以及它對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡功能的影響,探討其影響是否和子癇前期的發(fā)病相關(guān)。方法:收集重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院產(chǎn)科剖宮產(chǎn)分娩的子癇前期和正常妊娠的胎盤(pán)組織樣本各12列,收集時(shí)間為2016年09月至2017年03月。應(yīng)用免疫熒光(Immunofluorescence,IF)及蛋白質(zhì)印跡(Western blot,WB)檢測(cè)正常妊娠和子癇前期孕婦胎盤(pán)組織中Sirt3蛋白的表達(dá)。再使用慢病毒(Lentivirus,LV)敲低早孕人絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞株(HTR8/SVneo Cell Line)的Sirt3。ATP試劑盒檢測(cè)HTR8/SVneo細(xì)胞的ATP產(chǎn)生情況,了解線粒體產(chǎn)能狀態(tài);然后通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)(FCM)及CCK-8實(shí)驗(yàn)等檢測(cè)HTR8/SVneo細(xì)胞的凋亡情況;WB檢測(cè)active capase-3、IL-1β、MMP2等蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:與正常妊娠胎盤(pán)組織比較,Sirt3在子癇前期胎盤(pán)組織中的表達(dá)明顯降低,敲低Sirt3后HTR8/SVneo細(xì)胞的ATP產(chǎn)生減少,線粒體產(chǎn)能障礙,促使滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡和炎癥因子明顯增加,以及和侵襲相關(guān)的蛋白表達(dá)下調(diào)。結(jié)論:Sirt3表達(dá)降低導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡增加,可能在子癇前期的發(fā)病中起到一定的作用。
【圖文】：

14 PE 組中 Sirt3 的熒光相對(duì)表達(dá)量(n=3，**p=0orescence of Sirt3 in NC and PE group(n=3，** 1. Sirt3 在胎盤(pán)組織中的熒光表達(dá)情況(a.b) 1. Fluorescence expression of Sirt3 in placenta (

圖 3. Sirt3 在 HTR8/SVneo 細(xì)胞中的表達(dá)情況（n=3，**p＜0.0001） 3. Expression of Sirt3 in Vehicle group and LV-Sirt3 group（n=3，**p＜0.0001）表 2.Vehicle 組和 LV-Sirt3 組中 Sirt3 的平均吸光度值（x±s）Table 2 .Mean absorbance of Sirt3 in Vehicle and LV-Sirt3 group(x±s)Sirt3 表達(dá)水平 組 1.238 ± 0.022633 組 0.09169±0.0206037.45＜0.0001R8/SVneo 細(xì)胞 的 ATP 生成情況顯示，敲低 Sirt3 后，HTR8/SVneo 細(xì)胞線粒體的產(chǎn)能能力受損，，ATP差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（n=3，t=3.482，p=0.0253），如圖 4，表 3 所示：
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R714.244

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本文編號(hào)：2666706