THBS2對(duì)宮頸鱗癌SiHa細(xì)胞生物特性的影響
發(fā)布時(shí)間：2020-04-25 01:52
【摘要】：目的:探討血小板蛋白2(thrombospondin2,THBS2)在人宮頸鱗癌SiHa細(xì)胞中的表達(dá)水平及其細(xì)胞生物學(xué)功能。方法:構(gòu)建NC及THBS2的慢病毒載體即NC-LV及THBS2-LV,分別感染SiHa細(xì)胞,Western blot及熒光定量PCR對(duì)比感染NC-LV及THBS2-LV前后SiHa細(xì)胞中THBS2的表達(dá)水平;采用CCK-8法、Transwell實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)對(duì)比感染NC-LV及THBS2-LV前后SiHa細(xì)胞增殖、遷移、侵襲能力的區(qū)別;流式細(xì)胞儀檢測(cè)感染NC-LV及THBS2-LV前后SiHa細(xì)胞的細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果:感染THBS2-LV的SiHa細(xì)胞的THBS2表達(dá)增高;感染THBS2-LV后宮頸鱗癌SiHa細(xì)胞的增殖、侵襲、遷移能力均下降;感染THBS2-LV后宮頸鱗癌SiHa細(xì)胞凋亡增高。結(jié)論:THBS2抑制宮頸鱗癌SiHa細(xì)胞的增殖、侵襲與遷移,THBS2可能是宮頸鱗癌的一個(gè)抑癌基因,可作為該疾病的潛在治療靶點(diǎn)。
【圖文】：
細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形。如圖2-1：圖 2-1 顯微鏡下 SiHa 細(xì)胞的形態(tài)Figure 2-1 The morphology of SiHa cells under a microscope.(2)熒光顯微鏡下經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的 SiHa 細(xì)胞的形態(tài)，如圖 2-2：圖 2-2 熒光顯微鏡下經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的 SiHa 細(xì)胞的形態(tài)Figure 2-2 The morphology of the SiHa cells after puromycin screening.2.2 Western Blot 檢測(cè) SiHa 細(xì)胞中 THBS2 蛋白表達(dá)提取 NC 組、NC-LV 組、THBS2-LV 組每組細(xì)胞的總蛋白，THBS2 用鼠抗人抗體、內(nèi)參 GAPDH 用鼠抗人抗體作為一抗的抗體進(jìn)行 Western Blot實(shí)驗(yàn)。結(jié)果如圖所示。在 SiHa 細(xì)胞中過表達(dá) THBS2 組（即 THBS2-LV 組）中，其灰度值明顯高于 NC 組以及 NC-LV 組，通過 SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)得出p<0.001，由此證明：SiHa 細(xì)胞過表達(dá) THBS2 成功。200×200×
40圖 2-2 熒光顯微鏡下經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的 SiHa 細(xì)胞的形態(tài)Figure 2-2 The morphology of the SiHa cells after puromycin screening..2 Western Blot 檢測(cè) SiHa 細(xì)胞中 THBS2 蛋白表達(dá)提取 NC 組、NC-LV 組、THBS2-LV 組每組細(xì)胞的總蛋白，THBS抗人抗體、內(nèi)參 GAPDH 用鼠抗人抗體作為一抗的抗體進(jìn)行 Western 驗(yàn)。結(jié)果如圖所示。在 SiHa 細(xì)胞中過表達(dá) THBS2 組（即 THBS2-LV，其灰度值明顯高于 NC 組以及 NC-LV 組，通過 SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)得0.001，由此證明：SiHa 細(xì)胞過表達(dá) THBS2 成功。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R737.33
【圖文】：
細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形。如圖2-1：圖 2-1 顯微鏡下 SiHa 細(xì)胞的形態(tài)Figure 2-1 The morphology of SiHa cells under a microscope.(2)熒光顯微鏡下經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的 SiHa 細(xì)胞的形態(tài)，如圖 2-2：圖 2-2 熒光顯微鏡下經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的 SiHa 細(xì)胞的形態(tài)Figure 2-2 The morphology of the SiHa cells after puromycin screening.2.2 Western Blot 檢測(cè) SiHa 細(xì)胞中 THBS2 蛋白表達(dá)提取 NC 組、NC-LV 組、THBS2-LV 組每組細(xì)胞的總蛋白，THBS2 用鼠抗人抗體、內(nèi)參 GAPDH 用鼠抗人抗體作為一抗的抗體進(jìn)行 Western Blot實(shí)驗(yàn)。結(jié)果如圖所示。在 SiHa 細(xì)胞中過表達(dá) THBS2 組（即 THBS2-LV 組）中，其灰度值明顯高于 NC 組以及 NC-LV 組，通過 SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)得出p<0.001，由此證明：SiHa 細(xì)胞過表達(dá) THBS2 成功。200×200×
40圖 2-2 熒光顯微鏡下經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的 SiHa 細(xì)胞的形態(tài)Figure 2-2 The morphology of the SiHa cells after puromycin screening..2 Western Blot 檢測(cè) SiHa 細(xì)胞中 THBS2 蛋白表達(dá)提取 NC 組、NC-LV 組、THBS2-LV 組每組細(xì)胞的總蛋白，THBS抗人抗體、內(nèi)參 GAPDH 用鼠抗人抗體作為一抗的抗體進(jìn)行 Western 驗(yàn)。結(jié)果如圖所示。在 SiHa 細(xì)胞中過表達(dá) THBS2 組（即 THBS2-LV，其灰度值明顯高于 NC 組以及 NC-LV 組，通過 SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)得0.001，由此證明：SiHa 細(xì)胞過表達(dá) THBS2 成功。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R737.33
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5 崔s，
本文編號(hào)：2639647
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