發(fā)布時間：2020-04-18 08:49

【摘要】：【研究目的】宮頸癌在全球范圍內是女性腫瘤中的高發(fā)疾病,盡管有廣泛的篩查和先進的治療手段,致死率有所降低,5年生存率有較大提高,但仍然存在較高的罹患率和病死率。早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌并進行有效治療,對提高患者生存率和生存質量有重要意義。宮頸癌發(fā)病原因未明,目前公認的是人乳頭瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)持續(xù)感染是發(fā)生宮頸癌的重要原因。有研究提出HPV與雌激素協(xié)同作用可能促進宮頸上皮細胞惡性轉化,雌激素和孕酮可能促進HPV DNA整合到宿主細胞基因組中,雌激素受體α(Estrogen Receptor alpha,ERα)表達下調是高危型HPV感染的宮頸病變進程中的一種早期改變。G蛋白偶聯(lián)受體30(G-protein coupled receptor 30,GPR30)與腫瘤細胞的增殖、遷移、侵襲、轉移、耐藥等有關。有學者認為GPR30在宮頸癌組織中的表達提示患者預后良好。孕酮促進HPV DNA與ras致癌基因對宿主細胞致癌性轉化作用,并增加E6和E7的表達,但有關性激素在宮頸癌病變中的作用研究較少,與HPV感染的關系知之甚少,還有待進一步研究。本課題為進一步研究雌激素受體與宮頸病變的關系,尋找宮頸癌的輔助治療藥物,檢測雌激素受體家族ERα、GPR30及孕激素受體(Progesterone Receptor,PR)、核增殖指數Ki67、多腫瘤抑制基因p16在宮頸病變中的表達及其變化趨勢,探討性激素在宮頸病變中的作用。檢測雌激素受體拮抗劑(Selective Estrogen Receptor Modulator,SERM)-Raloxifene對癌細胞生長的影響,尋找宮頸癌的輔助治療或聯(lián)合治療藥物,以改善腫瘤細胞的耐藥性�！静牧吓c方法】1.收集活檢及手術切除標本的石蠟包埋組織60例,其中正常宮頸組織10例,低級別鱗狀上皮內瘤變(LSIL)11例,高級別鱗狀上皮內瘤變(HSIL)21例,宮頸鱗狀細胞癌(SCC)18例。進行免疫組織化學(IHC)染色檢測ERα、GPR30、PR、Ki67、p16在宮頸病變中的表達。2.選擇宮頸鱗狀細胞癌細胞株C33-A(HPV-)和Caski(HPV16+)進行細胞培養(yǎng),給予雌激素受體拮抗劑Raloxifene藥物,觀察細胞生長情況,并收集細胞蛋白進行Western Blot定量檢測ERα表達,評估Raloxifene對宮頸癌細胞生長的影響�！狙芯拷Y果】1.石蠟包埋組織IHC檢測結果:(1)ERα染色評分:正常宮頸組織平均分10.30,LSIL平均分9.09,HSIL平均分6.57,SCC平均分3.68,P0.001,組間差異有統(tǒng)計學意義。(2)GPR30染色評分:正常組GPR30平均分2.00,LSIL組平均分3.18,HSIL組平均分3.38,SCC組平均分3.63,P0.05,組間差異有統(tǒng)計學意義。(3)PR染色評分:正常組PR平均分3.00,LSIL組平均分2.45,HSIL組平均分3.00,SCC組平均分2.68,P0.05,組間差異無統(tǒng)計學意義。(4)Ki-67染色評分:正常組平均分1.40,LSIL組平均分2.27,HSIL組平均分3.10,SCC組平均分3.47,P0.001,組間差異有統(tǒng)計學意義。(5)P16染色評分:正常組平均分0.001,LSIL組平均分1.09,HSIL組平均分2.10,SCC組平均分2.61,P0.001,組間差異有統(tǒng)計學意義。2.細胞藥敏實驗結果:Raloxifene抑制細胞株C33A和Caski細胞內ERα蛋白表達,觀察細胞生長受抑制,陰性對照組ERα蛋白灰度值與給藥組比較,P0.05,差異有統(tǒng)計學意義�！窘Y論】1.ERα表達與宮頸病變進程有關,正常宮頸組織和LSIL組織ERα高表達,隨著宮頸病變進展ERα表達逐漸減少,宮頸癌及高級別病變ERα表達減少或缺失。2.GPR30與宮頸病變進程有關,正常宮頸組織和LSIL組織GPR30低表達或不表達,HSIL組織和SCC中GPR30過表達。3.PR表達與宮頸病變程度無明顯關聯(lián)性,不能作為判斷宮頸病變程度的指標。4.Ki-67和p16與宮頸病變進程有關,正常宮頸組織不表達P16,Ki-67僅在宮頸基底細胞表達,隨著宮頸病變進展Ki-67和P16表達逐漸增多或高表達。5.Raloxifene通過特異性阻斷癌細胞內ERα受體表達,抑制宮頸癌細胞的增殖。綜上所述,ERα、GPR30、Ki-67、p16在不同宮頸病變中的表達具有差異性,隨著宮頸病變惡性級別的增高,GPR30、Ki-67、p16表達呈上升趨勢;ERα表達程度與之相反,隨著宮頸病變惡性程度的增高,ERα表達降低或缺失。Raloxifene可以特異性降低宮頸癌細胞中ERα蛋白表達水平,抑制細胞生長,期望能作為宮頸癌輔助治療藥物。
【圖文】：

圖 1：HPV 感染與宮頸腫瘤形成機制[15]雌激素能刺激女性生殖道正常上皮的生長和分化，其體調節(jié)轉錄因子雌激素受體α（ERα）而發(fā)揮作用的[，促進乳腺和子宮內膜腫瘤的發(fā)展，，這些腫瘤累計占[20]。ERα、ERβ、G 蛋白偶聯(lián)受體 30（GPR30）同屬又稱 ESR 1）位于 6q25 染色體上，由八個外顯子和 140,000 堿基[21-22]。ERα主要表達于垂體前葉、子宮

收集大理大學第一附屬醫(yī)院病理科 2013 年-2017 年病理診斷為 LSIL、HSIL、SCC 病例共 927 例，其中 LSIL308 例、HSIL388 例、SCC178 例，將不同宮頸病變類型劃分相同的年齡區(qū)間，進行流行病學統(tǒng)計，探討相同年齡在不同宮頸病變中的發(fā)病率有無差異，每一病變的發(fā)病年齡高峰有無差異。表 1-1 不同宮頸病變年齡分布情況病變年齡LSIL HSIL SCC 合計≤30 42（13.60%) 27（7%） 4（2.25%） 7331-40 86（27.9%） 101（26%） 23（12.92%） 21041-50 126（40.90%） 165（42.50%） 64（35.96%） 35551-60 45（14.60%） 65（16.80%） 51（28.65%） 161≥61 9（2.90%） 30（7.70%） 36（20.22%） 75合計 308 388 178 874
【學位授予單位】：大理大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R737.33

【參考文獻】

相關期刊論文 前5條

1 王軼英;王悅;孔北華;Wenxin Zheng;;HPV定量檢測的臨床意義與研究進展[J];中華婦產科雜志;2017年08期

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本文編號：2631924