本文關(guān)鍵詞：miRNA-497通過調(diào)控FASN的表達(dá)抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[研究目的]通過研究：miRNA-497在上皮性卵巢癌組織／細(xì)胞中的表達(dá)情況,miRNA-497對(duì)卵巢癌細(xì)胞增殖能力的調(diào)控,以及miRNA-497對(duì)卵巢癌中FASN基因和蛋白的表達(dá)水平的影響,探討miRNA-497與FASN之間的關(guān)系,為臨床卵巢癌診治以及選擇性靶向藥物應(yīng)用提供新的實(shí)驗(yàn)研究依據(jù)。[研究方法]1.經(jīng)東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院倫理學(xué)委員會(huì)同意,收集東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院卵巢癌患者的標(biāo)本及正常卵巢標(biāo)本進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)研究,所有標(biāo)本均取自術(shù)前未經(jīng)放化療的患者且經(jīng)病理學(xué)確診。分別提取10例上皮性卵巢癌組織及10例相關(guān)正常卵巢組織中的RNA,qPCR技術(shù)分析不同卵巢組織中miRNA-497、FASN的表達(dá)情況,通過person相關(guān)性分析方法分析二者有無相關(guān)性。2.應(yīng)用qPCR技術(shù)檢測(cè)人卵巢癌細(xì)胞SKOV3、A2780中miRNA-497的表達(dá)水平。3.轉(zhuǎn)染miRNA-497 mimics、miRNA-497 inhibitor至卵巢上皮性癌細(xì)胞株SKOV3中,轉(zhuǎn)染miRNA-497 mimics control、miRNA-497 inhibitor control作為陰性對(duì)照,未轉(zhuǎn)染組為空白對(duì)照,CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞增殖能力的變化情況。4.PCR方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后不同組別細(xì)胞中FASN的mRNA的表達(dá)情況。5. Western blot方法分析轉(zhuǎn)染后不同實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞中FASN蛋白表達(dá)改變情況。[研究結(jié)果]1.與正常上皮性卵巢組織相比,miRNA-497在上皮性卵巢癌組織中是低表達(dá)的,FASN是高表達(dá)的。pearson相關(guān)性分析表明,卵巢癌組織中miRNA-497與FASN中mRNA的表達(dá)存在負(fù)相關(guān)(r=-0.45884,p0.01)。2.人卵巢癌細(xì)胞SKOV3、A2780中miRNA-497的表達(dá)結(jié)果顯示：SKOV3中miRNA-497的表達(dá)低于A2780,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),故選取SKOV3細(xì)胞作為后續(xù)研究的靶細(xì)胞。3. miRNA-497可以抑制卵巢癌細(xì)胞株SKOV3細(xì)胞的增殖。CCK8結(jié)果顯示miRNA-497 mimics作用SKOV3細(xì)胞后,靶細(xì)胞的細(xì)胞增殖能力明顯受到抑制,與對(duì)照組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；miRNA-497 inhibitor作用SKOV3細(xì)胞后,靶細(xì)胞的細(xì)胞增殖能力也會(huì)相應(yīng)地提升,與對(duì)照組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；表明miRNA-497對(duì)SKOV3細(xì)胞的生長(zhǎng)存在抑制效應(yīng)(p0.05),但此效應(yīng)不會(huì)隨著作用時(shí)間的增加而增加(p0.05)。4. miRNA-497可以抑制FASN的表達(dá)。miRNA-497 mimics作用SKOV3細(xì)胞后,可下調(diào)FASN的基因和蛋白表達(dá),與其它對(duì)照組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；而miRNA-497 mimics組中FASN的mRNA及蛋白的表達(dá)是下調(diào)的。這說明在卵巢癌中,miRNA-497可以抑制FASN的表達(dá)。[結(jié)論]1. miRNA-497在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)較正常卵巢組織明顯降低,而FASN基因在上皮性卵巢癌組織中卻存在異常高表達(dá),bearson相關(guān)性分析表明二者的表達(dá)水平存在負(fù)相關(guān)性。2. miRNA-497體外顯著抑制卵巢癌SKOV3細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖,對(duì)卵巢癌細(xì)胞的生物學(xué)特性有一定影響,但此抑制效應(yīng)與作用時(shí)間的長(zhǎng)短無明顯關(guān)聯(lián)。3.卵巢癌中1niRNA-497可以調(diào)控FASN的表達(dá)水平,FASN是miRNA-497的靶基因。miRNA-497可能是通過抑制FASN的表達(dá)而影響卵巢癌細(xì)胞的增殖,但具體機(jī)制不甚明朗。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為深入了解miRNA497在卵巢癌中的作用提供了理論依據(jù),也為臨床上進(jìn)一步研究卵巢癌的靶向治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：miRNA-497 卵巢癌 脂肪酸合成酶 FASN 增殖
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.31
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 英文縮略詞表9-13
• 前言13-15
• microRNA-497家族與疾病關(guān)系的研究進(jìn)展 文獻(xiàn)綜述15-27
• 1. 材料與方法27-40
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料27-30
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法30-40
• 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析40
• 2. 結(jié)果40-46
• 3. 討論46-49
• 結(jié)束語49-50
• 結(jié)論50-51
• 主要成果、存在問題與展望51-54
• 作者簡(jiǎn)介54-56
• 致謝56-57
• 參考文獻(xiàn)57-64

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