【摘要】：目的:稽留流產(Missed abortion,MA)是流產中的一種特殊類型,隨著二胎政策的放開,發(fā)病率逐漸升高,目前稽留流產的發(fā)病機制尚不十分明確,且缺乏早期預測靶標。有研究認為氧化應激及凋亡可能參與了稽留流產的發(fā)生,本研究篩選參與氧化應激,凋亡等多種代謝途徑的臨床常用血液指標:γ-谷氨酰轉移酶(gamma glutamyltransferase,GGT),乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH),腺苷脫氨酶(adenosine deaminase,ADA)和纖維蛋白原(Fibrinogen,FIB),分析其在稽留流產患者及正常妊娠(Normal pregnancy,NP)孕婦外周血中的表達情況,并分析各項指標的診斷價值。同時,檢測自噬關鍵因子Beclin-1及LC3在正常妊娠和稽留流產患者的妊娠組織(絨毛及蛻膜)中的表達情況,探究自噬與稽留流產發(fā)病機制之間的關系,為稽留流產篩選預測靶標。通過Beclin-1相關的生物信息學分析,探索其可能涉及的致病機制。方法:1.回顧性分析2014年3月-2017年3月收治的795例稽留流產患者及694例正常妊娠患者其GGT,LDH,ADA和FIB的表達情況,并根據(jù)年齡平均分為年齡組1(17-27歲),年齡組2(28-38歲)和年齡組3(39-49歲)。分別統(tǒng)計每一年齡組的表達差異,以了解年齡因素與各指標表達差異之間的關系。應用ROC曲線對各項血液學指標進行分析。2.選取2017年1月-2017年3月收治的36例稽留流產患者作為稽留流產組,同期收治的36例自愿終止妊娠的正常妊娠孕婦作為正常妊娠組。利用HE染色觀察兩組絨毛及蛻膜組織的特點,利用免疫組化觀察Beclin-1在兩組絨毛及蛻膜組織中的定位情況,利用RT-PCR檢測兩組絨毛及蛻膜組織中Beclin-1mRNA的表達水平,利用Western Blot檢測兩組絨毛及蛻膜組織中Beclin-1蛋白、LC3II/LC3I比值的表達水平。3.應用STRING在線軟件繪制Beclin-1蛋白互作網(wǎng)絡圖,進而應用DAVID在線分析軟件對篩選到的相互作用蛋白進行信號通路富集分析,以預測Beclin-1參與的作用機制及可能調控的下游蛋白。結果:1.與正常妊娠患者相比,血清GGT和ADA水平在稽留流產患者中明顯增加(GGT:MA:17.68±9.85IU/L;NP:14.57±7.93 IU/L,P0.0001;ADA:MA:6.05±3.94 IU/L;NP:5.67±3.36 IU/L,P0.05),血漿FIB水平在稽留流產患者中呈下降趨勢(MA:4.31±0.91g/L;NP:4.44±0.96g/L,P0.01)。血清LDH水平在兩組之間沒有明顯差異(MA:148.05±30.46 IU/L;NP:149.34±27.88 IU/L,P0.05)。進一步年齡分組發(fā)現(xiàn):ADA與FIB的表達僅在17-27歲年齡組有統(tǒng)計學差異,GGT在各年齡組中均有明顯的統(tǒng)計學差異。2.GGT、ADA、FIB、LDH的ROC曲線下面積(AUC)分別為0.643、0.548、0.539、0.527。3.HE染色顯示:與正常妊娠患者的絨毛及蛻膜組織相比,稽留流產絨毛組織的合體滋養(yǎng)層及細胞滋養(yǎng)層明顯萎縮變薄,滋養(yǎng)細胞中出現(xiàn)核固縮,絨毛組織出現(xiàn)不同程度的退行性改變,絨毛間質出現(xiàn)纖維樣變性。稽留流產患者蛻膜組織的血管數(shù)目相對減少,血管腔不規(guī)則,表現(xiàn)為組織結構疏松,腺上皮細胞腫脹,腺腔顯示不清,蛻膜細胞體積增大,染色較淺,表現(xiàn)出明顯的水腫。4.免疫組化顯示Beclin-1蛋白在稽留流產絨毛及蛻膜組織中的表達模式呈上調趨勢。5.與正常妊娠組相比,Beclin-1 mRNA在稽留流產絨毛(NP:1.00±0.17;MA:1.48±0.24,P0.001)及蛻膜組織(NP:1.00±0.37;MA:2.30±0.37,P0.001)中均呈上調趨勢,差異有統(tǒng)計學意義。Beclin-1蛋白在稽留流產絨毛(NP:1.00±0.34;MA:2.90±0.60,P0.001)及蛻膜組織(NP:1.00±0.29;MA:3.00±0.73,P0.001)中均呈上調趨勢,差異有統(tǒng)計學意義。LC3II/LC3I在稽留流產絨毛(NP:1.00±0.27;MA:2.34±0.46,P0.001)及蛻膜組織(NP:1.00±0.02;MA:1.89±0.33,P0.001)中均呈上調趨勢,差異有統(tǒng)計學意義。6.通過STRING篩選到30個與Beclin-1相互作用的蛋白質,其中下游蛋白ATG14和PIK3C3有至關重要的作用。信號通路富集分析顯示,Beclin-1及其相互作用蛋白顯著富集在自噬、凋亡、癌癥、炎癥等途徑中。結論:1.與正常妊娠孕婦相比,稽留流產患者外周血中GGT及ADA水平均呈上調趨勢,FIB水平呈下調趨勢,且均有統(tǒng)計學差異,進一步年齡分組后發(fā)現(xiàn)血清ADA與FIB的表達僅在17-27歲年齡組有統(tǒng)計學差異,GGT在各年齡組中均有明顯的統(tǒng)計學差異。同時,GGT的ROC曲線下面積最大,診斷價值相對較高,因此GGT有望成為稽留流產可靠的預測靶標。2.Beclin-1 mRNA及蛋白的表達、LC3II/LC3I的比值在稽留流產患者的絨毛及蛻膜組織中均表現(xiàn)為上調趨勢,提示細胞自噬參與了稽留流產的發(fā)生。3.ATG14和PIK3C3可能是與Beclin-1密切相關的下游蛋白,同其他相關蛋白相互作用構成的網(wǎng)絡系統(tǒng)可能作用于細胞自噬、凋亡、腫瘤、炎癥等通路,為今后進一步研究Beclin-1在稽留流產中的作用機制提供了方向。
【圖文】：

pregnancy例數(shù) 年齡（歲） 流產患者 36 27.6±5.1 妊娠患者 36 28.3±4.4 >0.05 常妊娠患者及稽留流產患者絨毛及蛻膜組織組絨毛組織光鏡下的區(qū)別妊娠患者的絨毛組織大小均勻一致，光鏡下可見 層，絨毛間質及血管。絨毛表面有 2 層滋養(yǎng)層質呈空泡狀或細顆粒狀，為合體滋養(yǎng)層；內層滋多角形，邊界清楚，細胞質透明，為細胞滋養(yǎng)層

圖 3.3 稽留流產患者絨毛組織 HE 染色圖片（200X）.3 HE staining picture of villus tissue in patients with missed ab蛻膜組織光鏡下的區(qū)別妊娠患者的蛻膜組織結構比較致密，可見到比較多的方狀或扁平狀，排列整齊，腺腔形態(tài)規(guī)則，腺體分泌正常，胞質豐富，細胞核結構清晰，，未見明顯炎性細.4）
【學位授予單位】：江蘇大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R714.21

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 楊芳;朱學東;;稽留流產的病因分析[J];中國當代醫(yī)藥;2018年35期

2 趙方;胡昌華;張遠遠;;甲狀腺功能異常孕產婦發(fā)生稽留流產的臨床分析[J];中國婦幼保健;2019年03期

3 高麗;;稽留流產患者實施整體護理的效果分析[J];首都食品與醫(yī)藥;2019年07期

4 陸妍;;米非司酮配伍米索前列醇治療稽留流產的臨床效果[J];大醫(yī)生;2019年02期

5 張羽;張釵紅;唐丹;林換弟;曹麗;李紅梅;;稽留流產高危因素的相關研究進展[J];臨床誤診誤治;2017年12期

6 張藝瑋;郝亞楠;潘曉偉;;稽留流產發(fā)病因素臨床分析[J];河北醫(yī)藥;2018年03期

7 李辭妹;;米非司酮配伍米索前列醇治療稽留流產和終止10～16周妊娠的效果[J];北方藥學;2018年08期

8 楊家春;;雌、孕激素水平與稽留流產的關系研究[J];實用婦科內分泌雜志(電子版);2018年20期

9 吳春春;李愛祿;李麗春;;胎盤生長因子及可溶性血管內皮生長因子受體的表達與稽留流產的關系研究[J];中外醫(yī)學研究;2018年27期

10 曹小紅;楊玲;;彩超監(jiān)護、引導下稽留流產的操作配合體會[J];中國衛(wèi)生產業(yè);2017年05期

相關會議論文 前10條

1 陳勤芳;鄭薇;李玉宏;陳瑞玉;;藥物和手術方法治療妊娠12周內稽留流產臨床研究[A];第四屆長三角婦產科學術論壇暨浙江省2009年婦產科學術年會論文匯編[C];2009年

2 于桂敏;;稽留流產原因分析及健康教育[A];全國婦產科新技術、新理論進展研討會、全國助產專業(yè)護士培訓班論文匯編[C];2011年

3 接雪梅;;米非司酮配伍米索前列醇治療稽留流產的研究摘要[A];第八次全國婦產科學學術會議論文匯編[C];2004年

4 齊進;張恩娣;;宮腔鏡在探尋稽留流產病因中的應用價值[A];中華醫(yī)學會第八次全國計劃生育學術會議論文匯編[C];2012年

5 侯冠英;王吉云;戴慧雅;龐淑琴;劉明霞;張秀芬;;芬嗎通用于稽留流產刮宮術后對患者子宮內膜修復的效果觀察[A];中國醫(yī)藥教育協(xié)會神經(jīng)外科專業(yè)委員會第二屆學術年會論文集[C];2018年

6 朱韞春;楊吟秋;;血清孕酮診斷稽留流產的臨床價值[A];第三屆長三角圍產醫(yī)學學術論壇暨2006年浙江省圍產醫(yī)學學術年會論文匯編[C];2006年

7 袁銀娣;董其兵;韓賢斌;;稽留流產法醫(yī)學分析1例[A];法醫(yī)臨床學專業(yè)理論與實踐——中國法醫(yī)學會·全國第二十屆法醫(yī)臨床學學術研討會論文集[C];2017年

8 張長英;王秋紅;;腹腔妊娠誤診稽留流產1例[A];2005年浙江省婦產科學暨計劃生育學術會議論文匯編[C];2005年

9 于冰;楊

本文編號：2615856