本文關鍵詞：miR-126、EGFL7和微血管密度在上皮性卵巢癌組織中的表達及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：卵巢癌是女性生殖系統常見三大惡性腫瘤之一,其發(fā)病率低于宮頸癌及子宮內膜癌,但惡性程度最高,病情發(fā)展快,且由于缺乏有效的早期診斷指標,疾病發(fā)現時多已為中晚期,死亡率居婦科腫瘤疾病的第一位,目前國內外有關卵巢癌的研究眾多,然而其發(fā)病機制仍不清楚。卵巢癌的早期癥狀不明顯、缺乏有效的早期診斷方法,70%患者在確診時已出現腹水、惡病質等遠處轉移晚期癥狀。卵巢癌預后差,雖然通過手術和化療等方法能夠顯著改善晚期卵巢癌患者的生存質量,但5年生存率仍較低,僅在30%左右。因此,卵巢癌是威脅廣大女性生命健康的婦科腫瘤疾病。大多數卵巢癌起源于卵巢上皮組織,其中上皮性卵巢癌患者占卵巢癌總數的75%-90%。因此,研究上皮性卵巢癌發(fā)生和發(fā)展機制,找尋有效、敏感的標記物及治療靶點、改善患者預后目前仍然是卵巢癌研究最重要的目標。microRNA是近年來新發(fā)現的一類長21～25個核苷酸的小分子RNA。通過與其靶mRNA分子3’端非編碼區(qū)域(3'-UTR)互補配對使目標mRNA分子受到翻譯水平調控或直接導致其降解,來參與調控細胞生長分化、能量代謝、凋亡等各個重要而基本的細胞生理過程。近年來研究發(fā)現microRNA與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉移、預后密切相關。在卵巢癌中microRNA也發(fā)揮重要作用,如miR-21[64]、miR-181a[65],其中miR-181a通過作用于其功能靶點Smad7,促進TGF-β介導上皮間質轉化信號通路參與卵巢癌的侵襲、轉移過程。而miR-126在多種腫瘤中表達下調,可能在腫瘤發(fā)生過程中發(fā)揮抑癌基因的作用,但其在卵巢癌中的研究在國內外甚少且存在差異。類表皮生長因子域7(EGFL7)是在內皮細胞中特異性表達的因子,在多種實體腫瘤中表達均增高,但其在卵巢癌中的表達及作用國內外鮮有研究。miR-126基因定位于EGFL7基因7號內含子內,同時在非小細胞肺癌、前列腺癌等研究資料中提示EGFL7也是miR-126的靶基因。本研究通過qRT-PCR及免疫組化方法檢測了miR-126、EGFL7在上皮性卵巢癌的表達情況,及與微血管密度表達的相關性,以探討miR-126和EGFL7在上皮性卵巢癌發(fā)病機制中的作用,希望能為上皮性卵巢癌早期診斷、預后評估和治療提供新的思路和理論依據。目的研究不同卵巢上皮組織中miR-126、EGFL7和微血管密度的表達,探討它們在上皮性卵巢癌發(fā)病機制及發(fā)展過程中的作用,并分析三者在上皮性卵巢癌組織中表達的相關性。研究對象和實驗方法1.研究對象：收集鄭州大學第一附屬醫(yī)院及第三附屬醫(yī)院2011年3月-2014年3月手術標本89例,正常組21例,良性組23例,惡性組45例。其中正常組卵巢取材于因良性宮體疾病行附件切除患者；惡性組卵巢組織取材于術前未行化療、放療等輔助治療上皮性卵巢腫瘤患者(按FIGO2008分期標準：Ⅰ、Ⅱ期12例,Ⅲ、Ⅳ期33例；低分化25例,中分化11例,高分化9例；漿液性囊腺癌29例,粘液性囊腺癌8例,子宮內膜樣癌4例,透明細胞癌4例；有淋巴結轉移31例,無淋巴結轉移14例。所有病例均經手術和病理證實�；颊吣挲g27-73(47.6±5.5)歲。經過倫理委員會批準及受試者同意后進行收集。2.研究方法：對上述89例卵巢組織采用定量反轉錄聚合酶鏈反應(qRT-PCR)方法檢測miR-126 mRNA的表達,對其中45例卵巢癌組織中EGFL7 mRNA的表達進行檢測；對上述89例卵巢組織采用免疫組織化學SP法檢測EGFL7蛋白和微血管密度(CD34)的表達。3.統計學方法：采用SPSS 19.0進行數據統計分析。miR-126相對表達量以M(P25-P75)表示,余定量資料以x±s表示。非正態(tài)定量資料比較應用Kruskal-Wallis檢驗(組間比較用Nemeyi法)；定性資料比較用χ2檢驗；正態(tài)定量資料多組比較用單因素方差分析(組間比較用LSD-t法)、兩組比較用t檢驗。相關性分析采用秩和spearman法、Pearson積矩相關系數分析。檢驗水準a=0.05,組間兩兩比較時檢驗水準a'=a/比較次數=0.0167。結果l.miR-126 mRNA在正常組、良性組、惡性組中的表達量分別為2.865(1.491～4.879)、1.339(0.904～2.099)、0.310(0.209～0.858),存在顯著差異(P0.001)。其中在正常組、良性組差異無統計學意義(P0.05),在正常組、惡性組；良性組、惡性組差異均有統計學意義(P0.05)。2. EGFL7蛋白表達陽性染色位于細胞漿,不僅位于血管內皮細胞中,在腫瘤組織上皮細胞中也存在。EGFL7蛋白在正常組、良性組、惡性組中的陽性表達率分別為23.81%(5/21)、52.17%(12/23)、93.33%(42/45),存在顯著差異(P0.001)。其中在正常組、良性組差異無統計學意義(P0.0167)；在正常組、惡性組；良性組、惡性組差異均有統計學意義(P0.0167)。3.CD34蛋白表達陽性代表組織中微血管密度的檢測。微血管密度在正常組、良性組、惡性組中的檢測值分別為6.133±2.090、11.478±2.337、21.893±3.223,存在顯著差異(P0.001)；兩兩比較差異均有統計學意義(P0.0167)。4.上皮性卵巢癌組織中,miR-126 mRNA的表達、EGFL7 mRNA的表達和MVD的檢測均與FIGO分期及淋巴結轉移有關(P0.05)；與病理類型、組織分化程度無關(P0.05)。5.上皮性卵巢癌組織中miR-126 mRNA與EGFL7 mRNA表達呈負相關(r1=-0.413;P=0.005);EGFL7 mRNA與MVD表達呈正相關(r2=0.362,P=0.015)；miR-126 mRNA與MVD表達呈負相關(r3=-0.909,P0.001)。結論1.在上皮性卵巢癌組織中miR-126異常低表達,提示其可能參與上皮性卵巢癌的發(fā)生發(fā)展過程。2.在上皮性卵巢癌組織中EGFL7及微血管密度異常高表達,提示其可能參與上皮性卵巢癌的發(fā)生及發(fā)展過程。3.在上皮性卵巢癌組織中miR-126和EGFL7的表達呈負相關,EGFL7和微血管密度的表達呈正相關,miR-126和微血管密度的表達呈負相關,提示這三者可能通過某種機制共同參與上皮性卵巢癌的發(fā)生發(fā)展過程。
【關鍵詞】：上皮性卵巢癌 miR-126 EGFL7 MVD 免疫組化 定量反轉錄聚合酶鏈反應
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 摘要4-8
• Abstract8-14
• 中英文縮略詞14-15
• 1 引言15-17
• 2 實驗標本、試劑及儀器17-20
• 3 實驗方法20-26
• 4 實驗結果26-32
• 5 討論32-37
• 6 結論37-38
• 附圖38-40
• 參考文獻40-45
• 綜述部分 EGFL7基因在惡性腫瘤中的研究進展45-70
• 參考文獻64-70
• 臨床實踐技能訓練70-78
• 個人簡歷 在學期間發(fā)表的學術論文和研究成果78-79
• 致謝79

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前2條

1 婁艷輝;楊興升;王福玲;錢金花;黃煜;;miR-21在上皮性卵巢癌組織中的表達及臨床意義[J];南方醫(yī)科大學學報;2010年03期

2 Li Zhou;Jian Li;Yu-Pei Zhao;Jun-Chao Guo;Quan-Cai Cui;Wei-Xun Zhou;Tai-Ping Zhang;Wen-Ming Wu;Lei You;Hong Shu;;Prognostic significance of epidermal growth factor-like domain 7 in pancreatic cancer[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2014年05期

  本文關鍵詞：miR-126、EGFL7和微血管密度在上皮性卵巢癌組織中的表達及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：257603