【摘要】：子癇前期是一種妊娠特發(fā)性疾病,是造成不良妊娠結(jié)局的主要原因,其發(fā)病機(jī)制尚不明確,目前公認(rèn)的為“二階段”學(xué)說(shuō),第一階段為發(fā)生在孕早期的潛在病理改變期,主要指子宮螺旋小動(dòng)脈重鑄不良導(dǎo)致胎盤淺著床,第二階段為孕中晚期的臨床期。從一階段發(fā)展到二階段的過(guò)程中,機(jī)體需經(jīng)歷一系列病理生理改變,其主要的作用因素為氧化應(yīng)激及其所導(dǎo)致的血管內(nèi)皮損傷。褪黑素(melatonin, MT)是一種重要的吲哚類神經(jīng)內(nèi)分泌激素,是重要的抗氧化應(yīng)激物質(zhì)。它可以直接清除氧自由基和氮自由基,也可以通過(guò)受體依賴途徑發(fā)揮作用。在離體急性肺損傷、腦缺血再灌注損傷、化學(xué)藥物導(dǎo)致的腎損傷的動(dòng)物模型中研究發(fā)現(xiàn),MT主要通過(guò)Nrf2/ARE/HO-1通路發(fā)揮其抗氧化應(yīng)激的作用。目前研究發(fā)現(xiàn),MT在子癇前期產(chǎn)婦外周血中表達(dá)量較正常產(chǎn)婦顯著降低,提示MT在子癇前期發(fā)病中的重要作用,然而其具體的作用機(jī)制及相關(guān)通路尚不明確,既往研究顯示在子癇前期產(chǎn)婦外周血中Nrf2、HO-1表達(dá)也均存在顯著下降的現(xiàn)象。因此,本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)測(cè)量子癇前期產(chǎn)婦胎盤組織中MT、Nrf2、HO-1三種物質(zhì)的表達(dá)含量及外周血中MT的含量,初步探討三者的相關(guān)性及其對(duì)子癇前期從一階段向二階段發(fā)展的意義。 第一章子癇前期患者胎盤及外周血中褪黑素(melatonin,MT)的表達(dá) 目的：研究子癇前期產(chǎn)婦胎盤及外周血中MT含量的變化,并分析二者之間的相關(guān)性。探討MT對(duì)子癇前期發(fā)病的關(guān)系。 方法：1.選擇2013年7月至2014年3月在中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院診斷為子癇前期并住院分娩的單胎產(chǎn)婦25例,其中子癇前期輕度組10例,重度組15例,并選正常產(chǎn)婦15例作為妊娠對(duì)照組,門診正常體檢女性15例作為正常對(duì)照組。 2.門診入選對(duì)象于就診當(dāng)日空腹抽取外周靜脈血分離血清保存標(biāo)本,住院分娩對(duì)象于手術(shù)當(dāng)日6時(shí)空腹抽取外周血,均采取子宮下段橫切口剖宮產(chǎn)終止妊娠,胎盤娩出后取胎盤組織1cm3,-80℃冰箱保存。 3.選用Elisa法檢測(cè)四組研究對(duì)象外周血MT蛋白的表達(dá),Western blot法測(cè)量胎盤組織中MT蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：Elisa:未孕女性MT表達(dá)水平為6.00±0.53pg/ml,正常妊娠產(chǎn)婦為59.38±2.92pg/ml,子癇前期輕度產(chǎn)婦為38.43±1.50pg/ml,子癇前期重度產(chǎn)婦為24.84±2.58pg/ml,每?jī)山M間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Western blot:正常妊娠產(chǎn)婦胎盤中MT/actin為0.37±0.04,子癇前期輕度組為0.26±0.04,重度組為0.09±0.03,每?jī)山M間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。正常產(chǎn)婦、子癇前期輕度、子癇前期重度三組樣本中胎盤組織和外周血MT含量正相關(guān)(P=0.96)。 結(jié)論：正常妊娠產(chǎn)婦較未孕女性外周血MT含量顯著升高,提示其在正常妊娠的抗氧化應(yīng)激中具有一定的作用,而在子癇前期中,產(chǎn)婦胎盤組織及外周血MT含量較正常產(chǎn)婦顯著降低,且隨病情嚴(yán)重程度進(jìn)一步下降,MT表達(dá)的降低可能是導(dǎo)致機(jī)體抗氧化應(yīng)激能力降低的原因之一,是子癇前期病理改變的影響因素之一；正常產(chǎn)婦及子癇前期產(chǎn)婦外周血MT的含量與胎盤組織中MT含量正相關(guān),提示胎盤可能為孕期外周血MT主要來(lái)源。 第二章子癇前期胎盤組織中MT、Nrf2、HO-1蛋白的表達(dá) 目的：研究子癇前期患者胎盤組織中MT與Nrf2、HO-1蛋白的的相關(guān)性,探討三者在子癇前期病理改變中的作用。 方法：1.選擇2013年7月至2014年3月在中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院診斷為子癇前期并住院分娩的單胎孕婦25例,其中子癇前期輕度組10例,重度組15例,并選正常妊娠產(chǎn)婦15例作為妊娠對(duì)照組。 2.所有入選對(duì)象均采取剖宮產(chǎn)終止妊娠,胎盤娩出后取新鮮胎盤組織1×1×1cm3,液氮轉(zhuǎn)移,-80℃冰箱保存。 3.選用Western blot法測(cè)量胎盤組織中Nrf2、HO-1蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：正常產(chǎn)婦胎盤組織中Nrf2/actin為0.31±0.03,子癇前期輕度為0.18±0.06,重度組為0.07±0.02,每?jī)山M間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。正常產(chǎn)婦胎盤組織中HO-1/actin為0.34±0.04,子癇前期輕度組為0.02±0.04,重度組為0.08±0.03,每?jī)山M間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)合第一章實(shí)驗(yàn)結(jié)果,正常產(chǎn)婦及子癇前期產(chǎn)婦胎盤組織中MT、Nrf2、HO-1的表達(dá)具有相關(guān)性。 結(jié)論：子癇前期產(chǎn)婦胎盤組織中Nrf2、HO-1較正常產(chǎn)婦顯著降低,且隨疾病嚴(yán)重程度進(jìn)一步下降,二者變化之間顯著正相關(guān),提示子癇前期產(chǎn)婦胎盤組織中可能存在Nrf2/ARE/HO-1通路的變化,MT、Nrf2、HO-1表達(dá)之間的相關(guān)性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示在妊娠中MT可能通過(guò)Nrf2/ARE/HO-1通路發(fā)揮其抗氧化應(yīng)激的作用,而此通路作用的減弱,可能是子癇前期病理生理改變的基礎(chǔ)之一。
【圖文】：

.1四組外周血樣本中MT含量的結(jié)果分析正常產(chǎn)婦組胎盤中MT水平為59. 38±2. 19pg/ml,子癇前期輕度組胎水平為38.438±I.50pg/ml，子癇前期重度組胎盤中MT水平為24. 8pg/ml,未孕女性}DMT表達(dá)水平為6. ()0±0. 53pg/ml,四組外周血中異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=2()75.92, /'<0.05),每?jī)山M間通過(guò)LSD法對(duì)兩兩比較，差異Q囃臣蒲б庖澹，

本文編號(hào)：2561923