【摘要】：目的:研究HLA-G對育齡女性外周血中淋巴細胞(PBLC)增殖及Treg細胞亞群的影響,探討其在妊娠免疫耐受中的作用機制。方法:高表達HLA-G的絨癌細胞系JEG-3細胞與健康育齡女性外周血淋巴細胞(PBLC)分組共培養(yǎng),利用HLA-G中和抗體(87G)和重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體-抗體融合蛋白(rh TNFR∶Fc)進行干預,實驗分為7組:1JEG-3+PBLC培養(yǎng)組;2JEG-3+PBLC+87G培養(yǎng)組;3JEG-3+PBLC非接觸培養(yǎng)組;4JEG-3+PBLC+87G非接觸培養(yǎng)組;5對照組(單純PBLC組);6JEG-3+PBLC+rh TNFR:Fc培養(yǎng)組;7JEG-3+PBLC+87G+rh TNFR:Fc培養(yǎng)組。1~5每組CCK-8法檢測各組PBLC增殖抑制情況,RT-PCR方法檢測TNF-αmRNA的表達,1~7每組流式細胞術檢測Treg細胞的比例。結果:CCK-8法顯示,JEG-3+PBLC培養(yǎng)組、JEG-3+PBLC+87G培養(yǎng)組、JEG-3+PBLC非接觸培養(yǎng)組、JEG-3+PBLC+87G非接觸培養(yǎng)組PBLC增殖抑制率分別為(48.00±5.56)%、(14.67±4.04)%、(37.67±2.31)%、(8.33±3.21)%,各組間比較差異均有統(tǒng)計學意義,P值均0.05;RT-PCR結果顯示JEG-3+PBLC培養(yǎng)組、JEG-3+PBLC非接觸培養(yǎng)組TNF-αmRNA的表達量明顯低于對照組,加入87G干預后,TNF-αmRNA的表達量較相應無87G組明顯上升,P值均0.05。流式細胞檢測顯示,與對照組相比,JEG-3+PBLC培養(yǎng)組Treg細胞比例明顯上升(P0.05),而JEG-3+PBLC非接觸培養(yǎng)組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),JEG-3+PBLC+87G培養(yǎng)組Treg細胞比例較JEG-3+PBLC培養(yǎng)組明顯下降(P0.05);JEG-3+PBLC+rh TNFR:Fc培養(yǎng)組與JEG-3+PBLC培養(yǎng)組相比,Treg細胞比例明顯上升(P0.05);以JEG-3+PBLC+rh TNFR:Fc培養(yǎng)組為對照,JEG-3+PBLC+rh TNF:FC+87G培養(yǎng)組Treg細胞比例明顯下降,但明顯高于JEG-3+PBLC+87G培養(yǎng)組,各組間比較差異均有統(tǒng)計學意義,P值均0.05。結論:HLA-G可以抑制育齡女性外周血淋巴細胞的增殖及抑制TNF-α的表達,上調Treg細胞的比例。
[Abstract]:Aim: to study the effect of HLA-G on (PBLC) proliferation and Treg cell subsets in peripheral blood of women of childbearing age, and to explore the mechanism of Treg cell subsets in pregnancy immune tolerance. Methods: chorionic carcinoma cell line JEG-3 cells with high expression of HLA-G were co-cultured with (PBLC) of healthy female peripheral blood lymphocytes of childbearing age. HLA-G neutralizing antibody (87G) and recombinant human type 2 tumor necrosis factor receptor-antibody fusion protein (rh TNFR:Fc) were intervened. the cells were divided into 7 groups: 1JEG-3 PBLC culture group, 2JEG-3 PBLC 87G culture group, 3JEG-3 PBLC non-contact culture group, and 2JEG-3 PBLC 87G culture group, 2JEG-3 PBLC 87G culture group, 3JEG-3 PBLC non-contact culture group, 2JEG-3 PBLC 87G culture group, 3JEG-3 PBLC non-contact culture group. 4JEG-3 PBLC 87G non-contact culture group; 5 control group (simple PBLC group); 6JEG-3 PBLC rh TNFR:Fc culture group; 7JEG-3 PBLC 87G rh TNFR:Fc culture group. 1 CCK-8 assay was used to detect the proliferation inhibition of PBLC in each group, RT-PCR method was used to detect the expression of TNF- 偽 mRNA, and flow cytometry was used to detect the proportion of Treg cells in each group. Results: CCK-8 assay showed that the inhibition rates of PBLC proliferation in JEG-3 PBLC culture group, JEG-3 PBLC 87G culture group, JEG-3 PBLC non-contact culture group and JEG-3 PBLC 87G non-contact culture group were (48.00 鹵5.56)%, (14.67 鹵4.04)%, (37.67 鹵2.31)% and (8.33 鹵3.21)%, respectively. The results of RT-PCR showed that the expression of TNF- 偽 mRNA in JEG-3 PBLC culture group and JEG-3 PBLC non-contact culture group was significantly lower than that in control group. The expression of TNF- 偽 mRNA in JEG-3 PBLC non-contact culture group was significantly higher than that in non-87G group (P = 0.05). Flow cytometry showed that the proportion of Treg cells in JEG-3 PBLC culture group was significantly higher than that in control group (P 0.05), but there was no significant difference in JEG-3 PBLC non-contact culture group (P 0.05). The proportion of Treg cells in JEG-3 PBLC 87G culture group was significantly lower than that in JEG-3 PBLC culture group (P 0.05), and the proportion of Treg cells in JEG-3 PBLC rh TNFR:Fc culture group was significantly higher than that in JEG-3 PBLC culture group (P 0.05). Compared with JEG-3 PBLC rh TNFR:Fc culture group, the proportion of Treg cells in JEG-3 PBLC rh TNF:FC 87G culture group decreased significantly, but it was significantly higher than that in JEG-3 PBLC 87G culture group. Conclusion: HLA-G can inhibit the proliferation of peripheral blood lymphocytes and the expression of TNF- 偽 in women of childbearing age, and up-regulate the proportion of Treg cells.
【作者單位】： 徐州醫(yī)學院研究生學院;
【分類號】：R714

【參考文獻】

相關期刊論文 前4條

1 黃潔紅;李維樞;余琳;王志堅;;反復自然流產患者絨毛組織中HLA-G mRNA的異常表達及意義[J];南方醫(yī)科大學學報;2010年07期

2 栗一帆;梁志偉;;人類白細胞抗原-G與免疫耐受的研究進展[J];器官移植;2012年02期

3 王軍朋;太平;夏國良;王賓;;CD4~+CD25~+調節(jié)性T細胞與母胎耐受的研究進展[J];中國免疫學雜志;2008年01期

4 張娣;單士剛;陳俊;劉川橋;梁智輝;翁秀芳;吳雄文;;可溶性HLA-G二聚體在體外可抑制樹突狀細胞的成熟[J];中國免疫學雜志;2013年08期

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 古力米熱·布然江;古麗娜·庫爾班;;調節(jié)性T細胞與婦科惡性腫瘤免疫研究進展[J];癌癥進展;2011年02期

2 陳書尚;吳承耀;朱凌峰;鄧震;蔡錦全;楊順良;譚建明;;骨髓間充質干細胞抑制T淋巴細胞增殖和miRNA-155表達的體外研究[J];福建醫(yī)科大學學報;2014年04期

3 田玫玲;盧慶樂;;血清可溶性白細胞G抗原在宮頸癌及癌前病變的臨床診斷意義[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2015年07期

4 顧雪敏;古航;;人類白細胞抗原G與子癇前期相關性的研究進展[J];南昌大學學報(醫(yī)學版);2013年07期

5 李聰然;肖漓;石炳毅;李州利;王爽;詹勝利;蔡明;;人類白細胞抗原-G5對移植腎功能延遲恢復的影響[J];解放軍醫(yī)學院學報;2014年01期

6 程運洪;;癌癥患者人白細胞抗原G檢測結果分析[J];檢驗醫(yī)學與臨床;2014年17期

7 廖樂君;陳敦金;徐燕;郭仲輝;林曉暉;李敏;梁偉華;馬海燕;;胎膜早破患者陰道微生態(tài)及IL-2、IL-6、TNF-a變化的研究[J];熱帶醫(yī)學雜志;2008年12期

8 李會儉;劉學淵;顧蔚蓉;李笑天;;靶向人類白細胞抗原G1(HLA-G1)的siRNA真核表達載體的構建及表達[J];生殖與避孕;2011年11期

9 張小然;彭延文;項鵬;;間充質干細胞的免疫調節(jié)特性及其在實體器官移植中的應用[J];器官移植;2013年06期

10 趙輝;呂軍強;賈靜;王松;傅正;車緒春;陸融;林剛;姚智;;人脂肪源性間充質干細胞的分離培養(yǎng)和鑒定[J];天津醫(yī)科大學學報;2013年05期

相關博士學位論文 前10條

1 田小蘭;多發(fā)性肌炎/皮肌炎患者相關臟器受累和人類白細胞抗原-G表達水平的臨床研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

2 陳書連;1、骨髓間充質干細胞對小鼠異基因骨髓移植后aGVHD的作用研究 2、成人急性淋巴細胞白血病自體移植的臨床研究及相關預后因素[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

3 及月茹;人臍帶間充質干細胞促進B細胞增殖和終末分化[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

4 郭玲;人異常胎盤轉錄組分析及MAGEL2基因在豬胚胎中的印記研究[D];華中農業(yè)大學;2013年

5 宗晨;基于人骨髓間充質干細胞的組織工程技術研究[D];浙江大學;2013年

6 李娜;NF-кB信號通路在間充質干細胞調節(jié)巨噬細胞治療燒傷膿毒癥的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學;2013年

7 王耀軍;骨髓間充質干細胞（BMSCs）對嵌合體形成及大鼠異體復合組織成活影響的免疫機制研究[D];第四軍醫(yī)大學;2013年

8 孫培龍;攜帶HLA-G慢病毒轉染大鼠原代培養(yǎng)肝細胞及對抗大鼠肝移植排斥反應的研究[D];中南大學;2013年

9 陳廣順;穩(wěn)定表達Foxp3的間充質干細胞對大鼠移植肝免疫保護作用的研究[D];中南大學;2013年

10 劉歐勝;異體牙周膜干細胞移植與機體體液（B細胞）免疫應答研究[D];中南大學;2012年

相關碩士學位論文 前10條

1 趙曼麗;靶向捕獲技術搜尋6p21.3區(qū)域鼻咽癌易感位點及初步功能研究[D];南方醫(yī)科大學;2012年

2 侯麗;自體骨髓干細胞移植對乙肝肝硬化患者外周血Th17細胞水平的影響及意義[D];遵義醫(yī)學院;2013年

3 武麗萍;不同月齡人臍帶間充質干細胞移植對心肌梗死后梗死面積及梗死區(qū)血管新生的影響[D];遵義醫(yī)學院;2013年

4 劉圣;人羊膜間充質干細胞對外周血T淋巴細胞的免疫調節(jié)作用及機制[D];遵義醫(yī)學院;2013年

5 蒲瑩峰;人羊膜間充質干細胞對大鼠1型糖尿病的療效及免疫調節(jié)作用[D];遵義醫(yī)學院;2013年

6 羅偉峰;下調CD151對臍帶間充質干細胞生物學特性影響的初步研究[D];暨南大學;2013年

7 丘美蘭;臍帶間充質干細胞治療原發(fā)性腎病綜合征的臨床療效研究[D];福建醫(yī)科大學;2013年

8 王永磊;抗原特異性調節(jié)性T細胞的培養(yǎng)擴增[D];天津醫(yī)科大學;2013年

9 葛翠翠;人臍帶間充質干細胞對炎癥性腸病小鼠模型的治療作用及移植相關問題探討[D];安徽醫(yī)科大學;2013年

10 毛雨紅;CXCR4/CXCR7在SDF-1誘導間充質干細胞增殖、遷移中的作用及信號轉導機制研究[D];桂林醫(yī)學院;2013年

【二級參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 ;Inhibition of the activating signals in NK92 cells by recombinant GST-sHLAG1α chain[J];Cell Research;2004年02期

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 趙美云;王寧;葛寧;李雙鳳;;南京市2003年育齡女性死因減壽研究[J];中國婦幼保健;2006年22期

2 詹耀球;李艷萍;;重視育齡女性臨床尿HCG檢查[J];中國性科學;2009年09期

3 付朝偉;衛(wèi)國榮;王法弟;王學才;朱建福;宋建根;陳躍;姜慶五;;浙江德清農村社區(qū)已婚育齡女性飲茶與貧血的相關研究[J];衛(wèi)生研究;2009年06期

4 崔蓉;;年輕育齡女性的膳食營養(yǎng)[J];護理研究;2009年36期

5 邢文華;伊敏芳;鄒鳴飛;楊小朵;張依群;錢瑩瑩;;寧波市育齡女性健康狀況及相關因素調查分析[J];寧波大學學報(理工版);2011年01期

6 王愛敏;;寧海地區(qū)育齡女性靜脈血鋅含量流行病學調查分析[J];中國現(xiàn)代醫(yī)生;2011年28期

7 金曉春;;對938例育齡女性孕前優(yōu)生檢測結果的分析[J];求醫(yī)問藥(下半月);2012年04期

8 顧曉梅;;育齡女性慎穿緊身褲[J];醫(yī)藥與保健;2012年04期

9 趙會榮;;育齡女性如何推算排卵期[J];家庭科技;2012年11期

10 徐加禾;顏育云;;虹橋鎮(zhèn)外來務工已婚育齡女性健康檢查2753例分析[J];醫(yī)學理論與實踐;2013年01期

相關會議論文 前3條

1 吳慶生;劉志榮;袁恒慶;何揖徽;王宏;陶月英;史長萍;楊艷;王皖萍;姜桂蘭;沈春蘭;程慧敏;古明毅;儲蓉;劉珊珊;牟曉東;;皖當涂縣城鎮(zhèn)育齡女性居民癌癥防治知識知曉及健康檢查需求現(xiàn)狀調查[A];華東地區(qū)第十次流行病學學術會議暨華東地區(qū)流行病學學術會議20周年慶典論文匯編[C];2010年

2 劉愛東;趙麗云;張兵;于冬梅;王惠君;賈鳳梅;于文濤;張繼國;杜文雯;李婕;;從年輕育齡女性營養(yǎng)教育項目探討城市營養(yǎng)教育方法[A];中國營養(yǎng)學會第十次全國營養(yǎng)學術會議公共營養(yǎng)分會論文集[C];2008年

3 ;育齡女性和絕經期婦女膳食脂肪酸攝入水平、體內脂肪酸組成譜及其與乳腺癌發(fā)病相關性研究[A];中國營養(yǎng)學會第九次全國營養(yǎng)學術會議項目總結論文集[C];2004年

相關重要報紙文章 前10條

1 記者 崔立新;近九成育齡女性渴望優(yōu)生知識[N];中國人口報;2006年

2 羅剛;育齡女性營養(yǎng)認識誤區(qū)不少[N];健康報;2007年

3 魏雅寧;育齡女性每天吃點瓜子[N];健康時報;2007年

4 唐夏;育齡女性營養(yǎng)健康意識亟待提高[N];中國消費者報;2007年

5 中國營養(yǎng)學會 高慧英;關注育齡女性營養(yǎng)與健康[N];科技日報;2007年

6 賈建軍;關注育齡女性的營養(yǎng)與健康[N];中國中醫(yī)藥報;2008年

7 吳一福;城市育齡女性更缺鐵[N];中國醫(yī)藥報;2008年

8 記者 陳青;已婚育齡女性平均生育1.1個子女[N];文匯報;2011年

9 本報記者 周瓊;“單獨二胎”成育齡女性求職攔路虎[N];寧波日報;2014年

10 記者　余海蓉 通訊員　王光明 趙羚谷;兩成育齡女性面對懷孕難題[N];深圳特區(qū)報;2006年

，

本文編號：2500728