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Rab26誘導(dǎo)宮頸癌HeLa細(xì)胞凋亡并抑制其遷移

發(fā)布時間:2018-10-15 11:14
【摘要】:目的研究調(diào)控Rab26蛋白表達(dá)對宮頸癌HeLa細(xì)胞凋亡及遷移的影響。方法常規(guī)培養(yǎng)HeLa細(xì)胞,分別將含有Rab26 cDNA全長的真核表達(dá)載體(過表達(dá)組)、含有Rab26 siRNA序列的真核表達(dá)載體(siRNA組)瞬時轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞,同時設(shè)立正常細(xì)胞組及空載體轉(zhuǎn)染組作為對照。轉(zhuǎn)染48 h后,分別用RT-PCR和Western blot檢測各組細(xì)胞中Rab26的mRNA及蛋白表達(dá)水平;采用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測各組細(xì)胞的凋亡率;同時采用劃痕實(shí)驗檢測各組細(xì)胞遷移速度。結(jié)果與正常細(xì)胞組及空載體轉(zhuǎn)染組相比,過表達(dá)組HeLa細(xì)胞中Rab26 mRNA及蛋白表達(dá)水平顯著上調(diào)(P0.05),而siRNA組細(xì)胞中Rab26 mRNA及蛋白表達(dá)水平顯著下調(diào)(P0.05),過表達(dá)組HeLa細(xì)胞凋亡率增高并抑制細(xì)胞遷移速度(P0.01),siRNA組則促進(jìn)細(xì)胞遷移(P0.05)。結(jié)論 Rab26與HeLa細(xì)胞的凋亡及細(xì)胞遷移有關(guān),故調(diào)控Rab26的表達(dá)有望成為治療宮頸癌的新靶點(diǎn)。
[Abstract]:Objective to study the effect of Rab26 protein expression on apoptosis and migration of cervical cancer HeLa cells. Methods HeLa cells were cultured routinely. Eukaryotic expression vector containing full length of Rab26 cDNA (overexpression group) and eukaryotic expression vector containing Rab26 siRNA sequence (siRNA group) were transiently transfected into HeLa cells respectively. Normal cell group and empty vector transfection group were used as control group. After 48 h transfection, the expression levels of Rab26 mRNA and protein in each group were detected by RT-PCR and Western blot, the apoptosis rate of each group was detected by flow cytometry (FCM), and the migration rate of each group was detected by scratch test. Results compared with normal cell group and empty vector transfection group, The expression of Rab26 mRNA and protein in HeLa cells was significantly up-regulated in overexpression group (P0.05), while the expression of Rab26 mRNA and protein in siRNA group was significantly down-regulated (P0.05). In over-expression group, the apoptosis rate of HeLa cells increased and the cell migration rate was inhibited (P0.01), siRNA group promoted cell migration (P0.05). Conclusion Rab26 is related to apoptosis and migration of HeLa cells, so regulating the expression of Rab26 may become a new target for the treatment of cervical cancer.
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院呼吸內(nèi)科 全軍呼吸內(nèi)科研究所 全軍呼吸病研究重點(diǎn)實(shí)驗室;解放軍海軍總醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金面上項目(81370168)~~
【分類號】:R737.33

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本文編號:2272370

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