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HMGB1-siRNA對卵巢癌細胞OV5生物學(xué)活性影響研究

發(fā)布時間:2018-06-29 21:42

  本文選題:卵巢癌OV + 高遷移率族蛋白B; 參考:《中華腫瘤防治雜志》2015年14期


【摘要】:目的探討高遷移率簇蛋白B1(high mobiligy group box-1,HMGB1)RNA干擾對人卵巢癌細胞株OV5生物學(xué)活性的影響。方法合成siRNA序列,構(gòu)建HMGB1基因的慢病毒shRNA載體,轉(zhuǎn)染卵巢癌OV5細胞。實驗分為HMGB1-siRNA-1組、HMGB1-siRNA-2組、HMGB1-siRNA-3組、陰性對照組和空白組。采用Real-time RT-PCR和蛋白質(zhì)印跡法等方法檢測RNA干擾對HMGB1表達的影響;MTT法繪制生長曲線,檢測細胞凋亡;Transwell小室檢測卵巢癌細胞侵襲能力的變化。結(jié)果 HMGB1-siRNA-1組、HMGB1-siRNA-2組和HMGB1-siRNA-3組細胞中,HMGB1mRNA的表達量分別為1.261±0.131、1.109±0.074和0.483±0.059,明顯低于陰性對照組的2.331±0.192和空白對照組的2.164±0.177,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P=0.005。實驗組癌細胞生長明顯受到抑制,與對照組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P=0.007。HMGB1表達下調(diào)明顯增加癌細胞的凋亡,HMGB1-siRNA-3組的凋亡率(16.89±1.13)%,明顯高于陰性對照組的(5.87±0.47)%和空白對照組的(4.51±0.48)%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.01。Transwell小室法檢測細胞侵襲力顯示,HMGB1-siRNA-3組穿膜細胞數(shù)明顯減少,與陰性對照組和空白組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。結(jié)論 HMGB1特異性siRNA序列可顯著下調(diào)HMGB1的表達,抑制OV5細胞的增殖,促進細胞凋亡,也可明顯降低OV5細胞的侵襲能力,HMGB1可能成為卵巢癌治療的一個潛在靶點。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of high mobility cluster protein B1 (high mobiligy group box-1 HMGB1 RNA interference on the biological activity of human ovarian cancer cell line OV5. Methods siRNA sequence was synthesized and lentivirus shRNA vector of HMGB1 gene was constructed and transfected into ovarian cancer OV5 cells. The experiment was divided into HMGB1-siRNA-1 group, HMGB1-siRNA-2 group, HMGB1-siRNA-3 group, negative control group and blank group. Real-time RT-PCR and Western blot were used to detect the effect of RNA interference on the expression of HMGB1. MTT method was used to draw the growth curve and the apoptosis chamber was used to detect the invasion ability of ovarian cancer cells. Results the expression of HMGB1 mRNA in HMGB1-siRNA-2 group and HMGB1-siRNA-3 group was 1.261 鹵0.131 鹵1.109 鹵0.074 and 0.483 鹵0.059 respectively, which was significantly lower than that in negative control group (2.331 鹵0.192) and blank control group (2.164 鹵0.177). The growth of cancer cells in the experimental group was significantly inhibited, compared with the control group. The down-regulation of HMGB1 expression significantly increased the apoptosis rate of cancer cells in HMGB1-siRNA-3 group (16.89 鹵1.13), which was significantly higher than that in negative control group (5.87 鹵0.47)% and blank control group (4.51 鹵0.48). The number of perforating cells in HMGB1-siRNA-3 group was significantly decreased. Compared with negative control group and blank group, the difference was statistically significant (P 0.05). Conclusion HMGB1 specific siRNA sequence can significantly down-regulate the expression of HMGB1, inhibit the proliferation of OV5 cells and promote apoptosis. HMGB1 may be a potential target for the treatment of ovarian cancer.
【作者單位】: 菏澤市立醫(yī)院婦產(chǎn)科;山東省腫瘤醫(yī)院婦瘤科;
【基金】:山東省自然科學(xué)基金(ZR2013HL047)
【分類號】:R737.31

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