本文選題：宮頸癌 + miR-�。� 參考：《中國病理生理雜志》2017年05期

【摘要】：目的:研究抑制miR-421表達增強宮頸癌細胞放療敏感性的分子機制。方法:運用脂質體2000將miR-421 inhibitor轉染4株宮頸癌細胞系HeLa、SiHa、C33A和CaSki,以轉染陰性核苷酸為對照,real-time PCR檢測子宮內膜上皮細胞ESC細胞和4株宮頸癌細胞中miR-421的表達水平;轉染的細胞經(jīng)不同劑量電離輻射(0、2、4、6和8 Gy)處理48 h后運用MTT法、ELISA和Annexin V-FITC/PI染色法聯(lián)合流式細胞術分別測定細胞活力、乳酸脫氫酶(LDH)漏出率和細胞凋亡率;運用Western blot檢測細胞中cleaved caspase-9、caspase-9、cleaved PARP、PARP、Bcl-2和Bax蛋白的水平。結果:miR421在ESC細胞中低表達,而在4株宮頸癌細胞中高表達,轉染miR-421 inhibitor后miR-421顯著低于陰性對照組(P0.05)。相同條件下,輻照后低表達miR-421的宮頸癌細胞活力和LDH漏出率顯著低于陰性對照組,72 h的細胞凋亡率明顯增加(P0.05)。Western blot結果顯示,電離輻射后與陰性對照組比較,低表達miR-421的宮頸癌細胞中cleaved caspase-9、cleaved PARP和Bcl-2的蛋白水平明顯增高,而Bax蛋白水平顯著降低(P0.05)。結論:miR-421在正常子宮內膜上皮ESC細胞中低表達,而在宮頸癌細胞系中高表達;下調miR-421表達能抑制宮頸癌細胞的活力,顯著增強宮頸癌細胞的輻射敏感性,其機制至少部分通過激活caspase-9細胞凋亡通路進而促進抗凋亡蛋白Bcl-2表達和抑制促凋亡蛋白Bax表達而實現(xiàn)。
[Abstract]:Objective: to study the molecular mechanism of inhibiting miR-421 expression to enhance the radiosensitivity of cervical cancer cells. Methods: Liposome 2000 was used to transfect miR-421 inhibitor into four cervical cancer cell lines (HeLa La-SiHaHaC33A and CaSki). The expression of miR-421 in endometrial epithelial cells (ESC) and four cervical carcinoma cells was detected by real-time PCR with transfection negative nucleotides as control. The transfected cells were treated with different doses of ionizing radiation for 48 h. The cell viability, the leakage rate of lactate dehydrogenase (LDH) and apoptosis were measured by MTT Elisa and Annexin V-FITC/PI staining combined with flow cytometry. The levels of Bcl-2 and Bax protein in cleaved caspase-9, caspase-9 and caspase-9 were detected by Western blot. Results the expression of miR-421 in ESC cells was significantly lower than that in negative control group (P 0.05), but was highly expressed in 4 cervical cancer cell lines after transfection of miR-421 inhibitor. Under the same conditions, the viability of cervical cancer cells with low expression of miR-421 and the leakage rate of LDH after irradiation were significantly lower than those of the negative control group for 72 h. The results of P0.05 +. Western blot showed that the cell viability and LDH leakage rate after ionizing radiation were significantly higher than those in the negative control group. The protein levels of cleaved caspase-9 cleaved PARP and Bcl-2 were significantly increased in cervical cancer cells with low expression of miR-421, while the level of Bax protein was significantly decreased (P 0.05). Conclusion the low expression of ESC in normal endometrial epithelium and the high expression in cervical carcinoma cell line, the down-regulation of miR-421 expression can inhibit the viability of cervical cancer cells and significantly enhance the radiosensitivity of cervical cancer cells. The mechanism is realized at least in part by activating the apoptosis pathway of caspase-9 cells and thus promoting the expression of anti-apoptotic protein Bcl-2 and inhibiting the expression of pro-apoptotic protein Bax.
【作者單位】： 濟南市第五人民醫(yī)院婦產(chǎn)科;中國計劃生育研究所細胞生物學實驗室;
【基金】：山東省醫(yī)藥衛(wèi)生資助項目(No.2013WS0010)
【分類號】：R730.23

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號：1990550