本文選題：子宮頸癌 + 微小RNA--p��； 參考：《山東醫(yī)藥》2017年05期

【摘要】：目的探討miR-497-5p對人宮頸癌細胞(He La)增殖的抑制作用及機制。方法將對數(shù)生長期人宮頸癌He La細胞隨機分為兩部分,第一部分細胞隨機分為四組:miR-497-5p mimics NC+IKCa1 3'端非翻譯區(qū)(3'-URT)野生型雙熒光素酶重組質(zhì)粒載體(IKCa1-wt)轉染組、miR-497-5p mimics+IKCa1-wt轉染組、miR-497-5p mimics NC+3'-URT突變型雙熒光素酶重組質(zhì)粒載體(IKCa1-mut)轉染組、miR-497-5p mimics+IKCa1-mut轉染組,分別轉染相應質(zhì)粒48 h,用雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)檢測He La細胞熒光素酶活性。第二部分細胞隨機分為三組:miR-497-5p mimics轉染組、miR-497-5p mimics NC轉染組和空白對照組,分別轉染相應質(zhì)粒,用qRT-PCR技術檢測細胞IKCa1 mRNA表達,Western boltting法檢測細胞IKCa1蛋白表達,CCK-8法檢測細胞增殖能力。結果第一部分細胞中的miR-497-5p mimics+IKCa1-wt轉染組熒光素酶活性較其他三組降低(P均0.05),其他三組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P均0.05),證實miR-497-5p與IKCa1 3'-URT存在特異性結合位點。第二部分細胞中的miR-497-5p mimics轉染組IKCa1 mRNA、蛋白的相對表達量較其他兩組降低(P均0.05),其他兩組比較差異無統(tǒng)計學意義(P均0.05)。第二部分細胞培養(yǎng)24、48、72、96 h,miR-497-5p mimics轉染組增殖能力均較其他兩組降低(P均0.05),其他兩組比較差異無統(tǒng)計學意義(P均0.05)。結論 miR-497-5p可以通過負向調(diào)控IKCa1基因表達以抑制宮頸癌細胞增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the inhibitory effect and mechanism of miR-497-5p on the proliferation of human cervical cancer cell line he La. Methods Human cervical cancer He-La cells in logarithmic phase were randomly divided into two parts. The first part was randomly divided into four groups: MiR-497-5p mimics NC IKCa1 3'untranslated region 3'-URT) wild-type double-luciferase recombinant plasmid vector IkCa1-wt) transfection group (miR-497-5p mimics IKCa1-wt transfection group) and miR-497-5p mimics NC 3'-URT mutant vector IKCa1-mutated group (MIR-497-5p mimics IKCa1-mut transfection group). The luciferase activity of He-La cells was detected by double luciferase reporter gene detection system at 48 h after transfection of corresponding plasmids. The second part of cells were randomly divided into three groups: 1 miR-497-5p mimics transfection group (n = 10) and control group (n = 10). The corresponding plasmids were transfected respectively. The expression of IKCa1 protein was detected by qRT-PCR technique and the expression of IKCa1 protein was detected by CCK-8 method. Results the luciferase activity in the miR-497-5p mimics IKCa1-wt transfection group was lower than that in the other three groups (P < 0.05), but there was no significant difference among the other three groups (P < 0.05), which confirmed the existence of specific binding sites between miR-497-5p and IKCa1 3'-URT. In the second part, the relative expression of IKCa1 mRNAs in the miR-497-5p mimics transfection group was lower than that in the other two groups (P 0.05), but there was no significant difference between the other two groups (P 0.05). In the second part, the proliferation ability of the mimics transfected group was significantly lower than that of the other two groups, but there was no significant difference between the other two groups. Conclusion miR-497-5p can inhibit the proliferation of cervical cancer cells by negatively regulating the expression of IKCa1 gene.
【作者單位】： 西南醫(yī)科大學附屬醫(yī)院;
【基金】：四川省衛(wèi)生廳科研基金資助項目(110373) 四川省瀘州市科技局科研項目(2013LZLY-J30)
【分類號】：R737.33

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