本文選題：卵巢癌 + 葡萄糖　； 參考：《濟(jì)南大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的近年來流行病學(xué)證據(jù)表明,肥胖可能通過上調(diào)體內(nèi)胰島素及胰島素樣生長因子水平以及多種脂肪因子相互作用,改變卵巢癌的發(fā)病機(jī)制。癌細(xì)胞的細(xì)胞生長與分裂需要通過其自身新陳代謝提供中間物質(zhì),并且維持其自身于較低水平的氧化(還原)穩(wěn)態(tài)。本研究旨在通過探討糖酵解途徑與谷氨酰胺分解途徑之間可能存在的潛在關(guān)系,從而分別驗(yàn)證葡萄糖與谷氨酰胺對卵巢癌細(xì)胞生長的影響。針對SKOV3,IGROV-1與Hey三種卵巢癌細(xì)胞系,給予不同刺激后,通過分析其細(xì)胞毒性、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡與細(xì)胞內(nèi)ATP的生物合成的改變,探討葡萄糖、谷氨酰胺與相應(yīng)抑制劑對卵巢癌細(xì)胞生長的影響。方法應(yīng)用MTT法、細(xì)胞周期分析、膜聯(lián)蛋白V測定、裂解胱天蛋白酶3的測定實(shí)驗(yàn)、Annexin-PI法、流式細(xì)胞儀,檢測在不同葡萄糖濃度、谷氨酰胺以及丙酮酸培養(yǎng)條件下,以及經(jīng)2-脫氧葡萄糖(2-DG)、3-溴丙酮酸(3-BP)與AOA行不同干預(yù)后,卵巢癌細(xì)胞在增殖、凋亡、細(xì)胞周期、細(xì)胞活性等方面的改變。通過應(yīng)用ATP生物發(fā)光檢測試劑盒觀察不同糖濃度刺激后,卵巢癌細(xì)胞內(nèi)ATP產(chǎn)量的變化。運(yùn)用乳酸定量試劑盒以檢測4種葡萄糖濃度對卵巢癌細(xì)胞中乳酸鹽生成的影響。通過應(yīng)用免疫蛋白印跡法檢測在不同的培養(yǎng)條件對P-MAPK、P-S6、CDK4、cyclinD1、P21、Mcl-1、Bcl-2等相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果葡萄糖與谷氨酰胺為卵巢癌細(xì)胞提供主要的能量來源。葡萄糖促進(jìn)三種卵巢癌細(xì)胞的細(xì)胞增殖、增加其胞內(nèi)ATP水平與乳酸鹽產(chǎn)量。葡萄糖、谷氨酰胺以及丙酮酸三者聯(lián)合能夠最大程度刺激卵巢癌細(xì)胞增殖。低糖或無糖條件誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞的凋亡,使膜聯(lián)蛋白V表達(dá)增加,半胱天冬酶-3活性增加。葡萄糖亦誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞周期阻滯。2-DG,3-BP與AOA抑制卵巢癌細(xì)胞增殖。2-DG誘導(dǎo)的卵巢癌細(xì)胞阻滯于G1期。AOA增加卵巢癌細(xì)胞對2-DG的敏感性,二者協(xié)同抑制卵巢癌的細(xì)胞增殖。結(jié)論葡萄糖是卵巢癌細(xì)胞最重要的能量來源。糖酵解抑制劑聯(lián)合AOA可能對卵巢癌的治療具有新的應(yīng)用價(jià)值。
[Abstract]:Objective recent epidemiological evidence suggests that obesity may change the pathogenesis of ovarian cancer by upregulating the levels of insulin, insulin-like growth factor and multiple fatty factors.The growth and division of cancer cells need to provide intermediates through their own metabolism and maintain a low level of redox homeostasis.The purpose of this study was to investigate the potential relationship between glycolysis pathway and glutamine decomposition pathway and to verify the effects of glucose and glutamine on the growth of ovarian cancer cells.Three ovarian cancer cell lines SKOV3, IGROV-1 and Hey were treated with different stimuli. The changes of cytotoxicity, cell cycle, apoptosis and intracellular ATP biosynthesis were analyzed.Effects of glutamine and its inhibitors on the growth of ovarian cancer cells.Methods MTT assay, cell cycle analysis, membrane protein V assay, cystatin 3 assay, Annexin-PI assay and flow cytometry were used to detect the concentration of glucose, glutamine and pyruvate.After different intervention of 2-DGG 3-BPwith AOA, the changes of proliferation, apoptosis, cell cycle and cell activity of ovarian cancer cells were observed.ATP bioluminescence assay kit was used to observe the changes of ATP production in ovarian cancer cells stimulated by different glucose concentrations.The effects of four glucose concentrations on lactate production in ovarian cancer cells were detected by using lactic acid quantitative kit.The effects of different culture conditions on the expression of cyclin D1OP21mcl-1Bcl 2 and other related proteins were detected by Western blot.Results glucose and glutamine provided the main energy source for ovarian cancer cells.Glucose promoted the proliferation of three kinds of ovarian cancer cells and increased the intracellular ATP level and lactate production.The combination of glucose, glutamine and pyruvate can stimulate the proliferation of ovarian cancer cells to the greatest extent.The apoptosis of ovarian cancer cells was induced by low glucose or no glucose condition, the expression of annexin V was increased, and the activity of cysteinase-3 was increased.Glucose also induced ovarian cancer cell cycle arrest. 2-DGG 3-BP and AOA inhibited the proliferation of ovarian cancer cells. 2 DG induced inhibition of ovarian cancer cell proliferation at G1 phase. AOA increased the sensitivity of ovarian cancer cells to 2-DG, and both inhibited the proliferation of ovarian cancer cells.Conclusion glucose is the most important energy source for ovarian cancer cells.Glycolytic inhibitors combined with AOA may be of new value in the treatment of ovarian cancer.
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R737.31

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7 趙U，

本文編號(hào)：1757600