發(fā)布時間：2018-04-01 21:20

  本文選題：子宮內膜異位癥　切入點：疼痛　出處：《河北醫(yī)科大學》2014年碩士論文

【摘要】：目的：子宮內膜異位癥(Endometriosis，EMs)，簡稱內異癥，是婦科常見病和多發(fā)病。臨床多以痛經(jīng)、不孕、盆腔痛為主癥。內異癥疼痛嚴重影響患者的生活質量。已知前列腺素與婦科疼痛的關系密切，近年的研究發(fā)現(xiàn)內異癥疼痛的發(fā)生與神經(jīng)纖維增生密切相關。本研究通過實驗動物模型分析神經(jīng)標記物蛋白基因產物PGP9.5(Protein gene Product9.5,PGP9.5)、神經(jīng)生長因子NGF(never growth factor,NGF)、前列腺素E2(ProstaglandinE2，PGE2)在內異癥子宮內膜組織中的表達，以探討內異癥疼痛發(fā)生的部分機制；并對實驗性小鼠采用補腎溫陽化瘀方進行治療，探討補腎溫陽化瘀法治療內異癥疼痛的作用機制。 方法：選用健康清潔級6~8周齡近交系BALB/c小鼠80只，體重20±2g，術前兩天以補佳樂0.5mg/kg灌胃，使手術時小鼠處于統(tǒng)一動情期(陰道涂片為大量無核角化細胞)。隨機取65只小鼠參考王艷萍方法復制內異癥模型，另外15只作為假手術組。將成功復制的內異癥模型的小鼠60只，隨機分為4組:模型組；補腎溫陽化瘀方高劑量組(61.67g/kg，相當于臨床用量20倍)，簡稱（“高劑量組”）；中藥低劑量組(15.42g/kg，相當于臨床用量5倍)，簡稱（“低劑量組”）；孕三烯酮組(0.42mg/kg，相當于臨床用量10倍)。假手術組正常清潔飼養(yǎng)。 術后1~12天采用補佳樂(0.5mg/kg)聯(lián)合縮宮素(2U/只)建立痛經(jīng)模型，同時給藥。給藥方案如下：假手術組給予純凈水灌胃1ml/100g，每日2次；模型組：上午純凈水灌胃1ml/100g，下午灌胃補佳樂；高劑量組：上午灌胃6.17g/ml濃縮液，下午灌胃補佳樂；低劑量組：上午灌胃1.54g/ml濃縮液，下午灌胃補佳樂；孕三烯酮組：每周2次上午灌胃孕三烯酮混懸液，其余時間上午給予純凈水灌胃，每天下午灌胃補佳樂；第12天末次給補佳樂后1小時，腹腔注射縮宮素2U/只(0.2ml)，誘發(fā)扭體反應，假手術組腹腔注射生理鹽水0.2ml/只。扭體觀察半小時，結束后斷頭處死，無菌操作剖腹取出異位內膜組織、在位子宮內膜組織，假手術組取子宮內膜組織，部分組織用4%多聚甲醛固定用于免疫組織化學染色，部分組織立即置于液氮中后轉入-80℃冰箱用于Western-blotting及Real time PCR檢測，部分組織勻漿取上清液用于酶聯(lián)免疫法檢測。 結果: 1扭體反應 除假手術組外，各組均發(fā)生扭體反應，扭體發(fā)生率100%。高劑量組、低劑量組、孕三烯酮組扭體潛伏期明顯延長，與模型組相比，差異有統(tǒng)計學意義(均為P0.01)，扭體次數(shù)顯著減少，與模型組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05，P0.01，P0.01)，各治療組之間差異無統(tǒng)計學意義(均為P0.05)。 2PGP9.5表達 2.1免疫組化法檢測PGP9.5蛋白表達 異位內膜表達：PGP9.5蛋白陽性主要表達于異位內膜間質細胞的胞漿中。模型組PGP9.5蛋白表達高于各治療組（均P0.05）。PGP9.5蛋白在各治療組表達差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 在位子宮內膜：PGP9.5蛋白陽性主要表達于在位內膜腺體細胞的胞漿中。模型組PGP9.5蛋白表達高于假手術組（P0.01）；PGP9.5蛋白在高劑量組、低劑量組表達高于假手術組(P0.05)；在各治療組表達差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 2.2Western-blotting檢測PGP9.5蛋白表達 異位內膜表達：模型組PGP9.5蛋白表達高于各治療組（均P0.01）。PGP9.5蛋白在各治療組表達差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 在位子宮內膜：模型組PGP9.5蛋白表達高于假手術組（P0.01）；PGP9.5蛋白在高劑量組、低劑量組的表達高于假手術組(P0.05)；PGP9.5蛋白在各治療組表達差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 2.3Real time PCR檢測PGP9.5mRNA的表達 異位內膜表達：模型組PGP9.5mRNA的表達高于各治療組（均P0.01）。PGP9.5mRNA在高劑量組表達低于孕三烯酮組（P0.05）；低劑量組與孕三烯酮組比較差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）；高劑量組低于低劑量組（P0.05）。 在位子宮內膜：模型組PGP9.5mRNA表達高于假手術組（P0.01）。PGP9.5mRNA在高劑量組、低劑量組表達高于假手術組(P0.05)；PGP9.5mRNA在高劑量組的表達低于孕三烯酮組(P0.01)；低劑量組與孕三烯酮組比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)；高劑量組低于低劑量組(P0.01)。 3NGF的表達 3.1免疫組化法檢測NGF蛋白表達（均P0.01） 異位內膜：NGF蛋白陽性主要表達于異位內膜間質細胞的胞漿中。模型組NGF蛋白表達高于各治療組（均P0.01）；NGF蛋白在各治療組表達差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 在位子宮內膜：NGF蛋白陽性主要表達于在位內膜間質細胞的胞漿中。模型組NGF蛋白表達高于假手術組（P0.01）；NGF蛋白在高劑量組、低劑量組表達高于假手術組(P0.05)；NGF蛋白在各治療組表達差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 3.2Western-blotting檢測NGF的表達 異位內膜：模型組NGF蛋白表達高于各治療組（均P0.01）；NGF蛋白在各治療組表達差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 在位子宮內膜：模型組NGF蛋白表達高于假手術組（P0.01）；高劑量組、低劑量組與假手術組表達比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)；NGF蛋白在各治療組表達差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 3.3Real time PCR檢測NGF的表達 異位內膜表達：模型組NGF mRNA表達高于各治療組（均P0.01）。NGF mRNA在高劑量組表達低于孕三烯酮組（P0.01）；低劑量組低于孕三烯酮組（P0.05）；高劑量組低于低劑量組（P0.05）。 在位子宮內膜：模型組NGF mRNA的表達高于假手術組（P0.01）。NGF mRNA在高劑量組表達與假手術組比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)；高劑量組低于孕三烯酮組(P0.01)；低劑量組與孕三烯酮組比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)；高劑量組低于低劑量組(P0.01)。 4酶聯(lián)免疫法檢測組織勻漿中PGE2的水平 異位內膜:模型組PGE2水平與各治療組比較差異有統(tǒng)計學意義(均P0.01)。高劑量組PGE2水平低于孕三烯酮組(P0.05)；低劑量組與孕三烯酮組比較差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）；高劑量組PGE2水平低于低劑量組(P0.01)。 在位子宮內膜:模型組PGE2水平高于假手術組，差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。高劑量組PGE2水平高于假手術組（P0.05）；高劑量組低于孕三烯酮組（P0.05）；低劑量組與孕三烯酮組比較差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）；高劑量組低于低劑量組（P0.01）。5PGE2、PGP9.5、NGF的相關性： 異位內膜及在位子宮內膜PGE2、PGP9.5、NGF作直線相關性檢驗。PGE2與PGP9.5(r=0.755,P=0.0005;r=0.456,P=0.044)；PGE2與NGF（r=0.747,P=0.0025;r=0.336,P=0.11）。NGF與PGP9.5(r=0.906,P0.01;r=0.964,P0.01),呈顯著正相關。 結論： 1行為學、大體標本、病理學三方面證實了子宮內膜異位癥痛經(jīng)模型的建立成功，可用于臨床疾病的研究。 2NGF、PGP9.5在內異癥痛經(jīng)模型的在位子宮內膜、異位內膜表達升高，且二者呈正相關關系。提示NGF促進神經(jīng)纖維生長，局部神經(jīng)纖維增生，參與內異癥疼痛的發(fā)生。 3PGE2在內異癥痛經(jīng)模型的在位子宮內膜、異位內膜組織中表達升高，PGE2與NGF、PGP9.5表達在異位內膜呈正相關。提示PGE2可能促進異位內膜中NGF表達，進而與局部神經(jīng)增生有關。 4補腎溫陽化瘀方可縮小移植內膜組織體積并具有鎮(zhèn)痛作用。同時補腎溫陽化瘀方可以降調內異癥異位內膜及在位子宮內膜中升高的NGF、PGP9.5、PGE2表達，提示該法可通過調節(jié)病灶局部及在位子宮內膜NGF、PGP9.5、PGE2水平，，起到治療內異癥疼痛的作用。該作用效果同孕三烯酮。
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【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R711.71

【參考文獻】

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1 陳景偉;仝瑞曉;范麗潔;孫曉換;馬惠榮;杜惠蘭;;BALB/c小鼠子宮內膜異位癥痛經(jīng)模型的建立[J];中國實驗動物學報;2014年01期

2 金雅茹;;假孕療法聯(lián)合中藥灌腸法治療子宮內膜異位癥的療效觀察[J];中國醫(yī)藥指南;2014年02期

3 侯莉娟;;陽和湯加味治療子宮內膜異位癥38例[J];寧夏醫(yī)學雜志;2014年01期

4 段丹梅;;紅藤方治療子宮內膜異位癥臨床療效及安全性分析[J];亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥;2014年01期

5 陳景偉;仝瑞曉;孫曉換;范麗潔;杜惠蘭;;補佳樂聯(lián)合縮宮素建立小鼠原發(fā)性痛經(jīng)模型[J];中國實驗動物學報;2013年05期

6 陳景偉;仝瑞曉;李清雪;田茜華;杜惠蘭;;補腎溫陽化瘀方對子宮內膜異位癥模型痛經(jīng)的影響[J];中藥藥理與臨床;2013年05期

7 熊平安;方彩云;張春蓮;黃潤強;;蛋白基因產物9.5在子宮內膜異位癥患者在位及異位內膜中的表達情況[J];國際婦產科學雜志;2013年05期

8 肖新春;劉霞;張歡歡;崔曉萍;;消異方對子宮內膜異位癥模型大鼠NGF表達的影響[J];遼寧中醫(yī)藥大學學報;2013年05期

9 劉亞麗;楊桂桂;楊麗娟;;電針結合TDP治療子宮內膜異位癥痛經(jīng)的臨床觀察[J];針灸臨床雜志;2013年04期

10 葛曼;付金榮;唐虹;姜卉;;加味盆痛靈對子宮內膜異位癥模型大鼠血清及腹腔液IL-1β、NGF的影響[J];上海中醫(yī)藥雜志;2013年03期

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1 王艷艷;子宮內膜異位癥組織中神經(jīng)纖維的分布及其與疼痛的關系[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2009年

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1 劉穎新;化ve止痛貼治療子宮內膜異位癥引起氣滯血瘀型痛經(jīng)的臨床觀察[D];長春中醫(yī)藥大學;2011年

本文編號：1697348