本文關(guān)鍵詞：E-鈣粘蛋白基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病風(fēng)險的關(guān)聯(lián)性研究

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【摘要】：目的:子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis,EMs)是育齡期婦女的常見疾病,臨床主要表現(xiàn)為進(jìn)行性加重的痛經(jīng)和不孕,嚴(yán)重影響育齡期婦女的健康和生育能力。目前,EMs的病因和發(fā)病機制仍不明確,普遍接受的是“子宮內(nèi)膜種植學(xué)說”。但是隨經(jīng)血逆流的子宮內(nèi)膜碎片得以存活并致病,異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移能力對于異位病灶的形成起到了重要的作用。相關(guān)研究認(rèn)為,異位的子宮內(nèi)膜細(xì)胞可能通過上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化獲得侵襲能力而參與EMs的發(fā)病過程。E-鈣粘蛋白(E-cadherin,CDH1)是上皮細(xì)胞表面Ca2+依賴性細(xì)胞粘附分子,主要參與形成上皮細(xì)胞之間的連接,是上皮細(xì)胞表面重要的分子標(biāo)志,其表達(dá)水平降低將引起上皮細(xì)胞間連接系統(tǒng)的異常,使細(xì)胞的活動性增加,是發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的重要標(biāo)志。相關(guān)研究證實,異位病灶處上皮細(xì)胞表面的E-cadherin表達(dá)水平和正常在位子宮內(nèi)膜相比顯著降低,并且E-cadherin表達(dá)陰性的異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞是具有侵襲性的。因此E-cadherin表達(dá)降低可能與EMs的發(fā)病過程相關(guān)。E-cadherin基因的任何突變均可能引起E-cadherin表達(dá)異常,對E-cadherin基因的研究有助于進(jìn)一步揭示EMs的發(fā)病機制。本研究擬探討E-cadherin基因多態(tài)性與EMs發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系。方法:采用病例-對照研究分析E-cadherin基因多態(tài)性與EMs發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系。采集EMs患者和健康對照婦女的靜脈抗凝血各5ml,于4℃保存。一周內(nèi)采用蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取外周血白細(xì)胞DNA。采用DNA直接測序法檢測病例組和對照組中E-cadherin基因啟動子、所有外顯子和3’-UTR所有變異位點,主要是SNPs位點。對直接測序結(jié)果的17個SNPs位點進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,篩選出6個可能的差異性SNPs位點—rs16260、rs28372783、rs1801552、rs1801026、rs8049282、rs13689。擴大樣本量采用聚合酶鏈反應(yīng)-連接酶檢測反應(yīng)(polymerase chain reaction-ligase detection reaction,PCR-LDR)技術(shù)檢測病例組(651例)和對照組(655例)這6個SNPs位點基因型和等位基因型頻率的分布情況。數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析采用SPSS13.0版軟件包,以雙尾P0.05為標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。病例組和對照組的年齡差異行t檢驗。各位點對照組基因型頻率分布情況行χ2檢驗,進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡分析。比較病例組和對照組各位點基因型和等位基因頻率分布采用χ2檢驗。以非條件Logistic回歸法計算相對風(fēng)險度的比值比(odds ratio,OR)及95%可信區(qū)間(confidence interval,CI)。采用EH和2LD軟件分析等位基因連鎖不平衡狀態(tài)。并進(jìn)一步采用χ2檢驗分析病例組中原發(fā)不孕患者與有孕產(chǎn)史患者及健康對照組各位點基因型和等位基因頻率分布的差異,計算相對風(fēng)險度的比值比(OR)及95%可信區(qū)間(CI)。結(jié)果:1病例組的平均年齡是34.60±7.3(20~50歲),對照組的平均年齡是34.48±7.3(20~50歲),兩組間進(jìn)行t檢驗,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2 DNA直接測序結(jié)果分析2.1 DNA直接測序總共檢測有17個SNPs位點,其中15個位點在NCBI數(shù)據(jù)庫上有記載,而2個位點尚無相關(guān)記載,位于3’-UTR+759和3’-UTR+1445。2.2對DNA直接測序結(jié)果的17個SNPs位點進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,綜合篩選出6個可能的差異性SNPs位點—rs16260、rs28372783、rs1801552、rs1801026、rs8049282、rs13689。2.3 3’-UTR的8個SNPs位點,即3’-UTR+54至3’-UTR+1502,約1450個堿基,連鎖不平衡分析發(fā)現(xiàn),除外rs145920869(3’-UTR+221)和rs74957007(3’-UTR+475)兩個位點,其他6個SNPs位點為緊密連鎖。3 E-cadherin基因多態(tài)性與EMs發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系擴大樣本驗證6個可能的差異性SNPs與EMs發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系,統(tǒng)計分析顯示,這6個SNPs—rs16260、rs28372783、rs1801552、rs1801026、rs8049282、rs13689的基因型和等位基因頻率分布在病例組和對照組中差異均無顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P值均大于0.05)。4 E-cadherin基因多態(tài)性與EMs相關(guān)原發(fā)不孕的關(guān)系將病例組患者按照是否原發(fā)不孕進(jìn)行分組(其中未婚患者除外),分為原發(fā)不孕組和有孕產(chǎn)史組,進(jìn)一步分析6個SNPs與EMs相關(guān)原發(fā)不孕發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系。統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn),與EMs有孕產(chǎn)史患者相比,rs8049282CT多態(tài)的C、T等位基因頻率在EMs原發(fā)不孕患者及有孕產(chǎn)史患者中分別為91.5%、8.5%和85.4%、14.6%,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.358,P=0.012);與C/T+T/T基因型相比,C/C基因型可顯著增加EMs患者原發(fā)不孕的發(fā)病風(fēng)險,OR值為2.33(95%CI=1.36~3.99)。當(dāng)兩組按照年齡進(jìn)行校正后,與C/T+T/T基因型相比,C/C基因型可顯著增加EMs患者原發(fā)不孕的發(fā)病風(fēng)險,OR值為2.54(95%CI=1.45~4.44)。與對照組相比,rs8049282CT多態(tài)的C、T等位基因頻率在EMs原發(fā)不孕患者及對照組中分別為91.5%、8.5%和85.2%、14.8%,兩組進(jìn)行比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.896,P=0.009);與C/T+T/T基因型比較,C/C基因型可顯著增加子宮內(nèi)膜異位癥患者原發(fā)不孕的發(fā)病風(fēng)險,OR值為2.25(95%CI=1.32~3.83)。當(dāng)兩組按照年齡進(jìn)行校正后,與C/T+T/T基因型相比,C/C基因型可顯著增加EMs患者原發(fā)不孕的發(fā)病風(fēng)險,OR值為2.70(95%CI=1.45~5.00)。另外,rs1801552TC多態(tài)的T、C等位基因頻率在EMs原發(fā)不孕患者及有孕產(chǎn)史患者中分別為42.5%、57.5%和35.1%、64.9%,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.621,P=0.032);與C/C基因型相比,T/T基因型可顯著增加子宮內(nèi)膜異位癥患者原發(fā)不孕的發(fā)病風(fēng)險,OR值為1.93(95%CI:1.07~3.48)。但是按照年齡進(jìn)行校正后,rs1801552多態(tài)與子宮內(nèi)膜異位癥患者原發(fā)不孕的發(fā)病風(fēng)險無關(guān)(P0.05)。其它多態(tài)位點rs16260、rs28372783、rs1801026、rs13689的基因型和等位基因頻率分布進(jìn)行比較均無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P值均大于0.05)。結(jié)論:1 E-cadherin基因啟動子區(qū)、外顯子和3’-UTR的SNPs可能與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病風(fēng)險無關(guān)。2 E-cadherin基因rs8049282CT多態(tài)可能與子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)原發(fā)不孕的發(fā)病風(fēng)險相關(guān),即CC基因型可顯著增加子宮內(nèi)膜異位癥患者原發(fā)不孕的發(fā)病風(fēng)險。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R711.71

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 吳天思;趙瑞華;;子宮內(nèi)膜異位癥對胚胎著床影響的研究進(jìn)展[J];河北醫(yī)藥;2014年17期

2 劉頌平;溫堅;;子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機制研究新進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2013年02期

3 徐曉宇;叢慧芳;;子宮內(nèi)膜異位癥致不孕的機制探討[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年13期

4 郎景和;;子宮內(nèi)膜異位癥研究的深入和發(fā)展[J];中華婦產(chǎn)科雜志;2010年04期

5 郎景和;;重視疑難性子宮內(nèi)膜異位癥的臨床與基礎(chǔ)研究[J];中國實用婦科與產(chǎn)科雜志;2009年09期

6 胡電,古航,金志軍,劉彥,熊英,章青;孤啡肽與子宮內(nèi)膜異位不孕的相關(guān)研究[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2004年01期

7 譚先杰,郎景和,劉東遠(yuǎn),沈鏗,許秀英;單核細(xì)胞趨化蛋白-1在子宮內(nèi)膜異位癥患者子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)[J];中華婦產(chǎn)科雜志;2001年02期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王罡;siRNA阻斷wnt/β-catenin信號通路對子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞侵襲能力的影響[D];華中科技大學(xué);2010年

2 黃敬華;早期自然流產(chǎn)患者母胎界面上皮鈣黏素與β-連環(huán)素的表達(dá)[D];華中科技大學(xué);2008年

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本文編號：1163981