發(fā)布時間：2017-10-30 06:14

  本文關鍵詞：子宮內膜異位癥性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細胞成熟的影響及內異方的干預作用

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【摘要】：子宮內膜異位癥(endometriosis,EM),是子宮內膜腺上皮細胞和基質細胞種植于子宮以外的一種雌激素依賴性疾病。EM在育齡期婦女中發(fā)病率高達10%~15%,與不孕癥高度相關。與其他不孕癥的患者相比,EM性不孕癥患者促排卵后正常獲卵率相對較低,其采用輔助生殖技術后的妊娠結局也相對較差,可能與卵泡成熟障礙、卵母細胞質量受損等因素相關。卵泡液包圍卵母細胞并構成排卵前的微環(huán)境,必然對卵母細胞的成熟過程和質量造成影響。已有研究表明EM性不孕癥患者卵泡液中多種蛋白表達出現(xiàn)異常,還有研究者對具體異常表達的蛋白進行了研究,他們認為這有可能是除EM導致盆腔解剖結構紊亂以外導致不孕癥發(fā)生的重要因素。中藥內異方是臨床治療EM和EM性不孕癥的有效中藥復方。本實驗旨在研究EM性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細胞成熟和質量的影響及機制,篩查并驗證EM性不孕癥患者卵泡液中明顯表達異常的細胞因子和蛋白質,探討中藥內異方對EM性不孕癥患者卵泡液影響小鼠卵母細胞成熟的干預作用,為EM性不孕癥的理論研究和臨床治療提供新的思路和方法。研究目的1、了解EM性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細胞成熟和質量的影響,并探討其機制。2、發(fā)現(xiàn)EM性不孕癥患者卵泡液中表達明顯異常的細胞因子和蛋白質。3、了解中藥內異方藥物血清對EM性不孕癥患者卵泡液影響小鼠卵母細胞成熟的干預作用。研究方法1、通過在小鼠卵母細胞體外成熟的培養(yǎng)液加入EM性不孕癥患者卵泡液,觀察EM性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細胞成熟的阻礙作用;通過對成熟卵母細胞中紡錘體的熒光染色及形態(tài)觀察,了解EM性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細胞質量的影響;通過檢測EM性不孕癥患者卵泡液參與體外培養(yǎng)的卵母細胞中氧化應激的水平,了解EM性不孕癥患者卵泡液影響小鼠卵母細胞成熟和質量的部分機制。2、通過對EM性不孕癥患者卵泡液的蛋白芯片檢測,篩查出表達異常(差異2倍或以上)細胞因子和蛋白;選擇其中與EM相關的細胞因子和蛋白,擴大樣本進行ELISA方法檢測并驗證。3、在EM性不孕癥患者卵泡液參與小鼠卵母細胞體外成熟培養(yǎng)的基礎上,加入中藥內異方藥物血清參與培養(yǎng),了解中藥內異方藥物血清對EM性不孕癥患者卵泡液影響小鼠卵母細胞成熟的干預作用。研究結果1、EM性不孕癥患者卵泡液降低了小鼠卵母細胞體外成熟率,損傷卵母細胞紡錘體,增強細胞內氧化應激水平。2、EM性不孕癥患者卵泡液中ICAM-1表達明顯增多(P0.001),TECK表達明顯降低(P0.001);I-309、Lymphotactin(XCL1)、MMP-25、TSG-6等多種蛋白異常表達。3、中藥內異方藥物血清能提高EM性不孕癥患者卵泡液降低的小鼠卵母細胞體外成熟率。結論1、子宮內膜異位癥性不孕癥患者卵泡液增強小鼠卵母細胞內的氧化應激水平,阻礙其體外成熟。2、子宮內膜異位癥性不孕癥患者卵泡液中ICAM-1過量表達,或同時存在多種細胞因子和蛋白質異常表達,造成了卵泡液微環(huán)境異常。3、中藥內異方藥物血清能改善子宮內膜異位癥性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細胞體外成熟的阻礙作用。
【關鍵詞】：子宮內膜異位癥 卵泡液 不孕癥 內異方
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R711.71
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 縮略詞表9-10
• 前言10-11
• 第一部分 EM性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細胞體外成熟及質量的影響11-18
• 一、材料11-12
• 二、方法12-15
• 三、結果15-18
• 第二部分 EM性不孕癥患者卵泡液中特異表達蛋白的篩選18-25
• 一、材料18-19
• 二、方法19-21
• 三、結果21-25
• 第三部分 EM性不孕癥患者卵泡液中特異表達蛋白的ELISA法驗證25-33
• 一、材料25-26
• 二、方法26-28
• 三、結果28-33
• 第四部分 內異方藥物血清對EM性不孕癥患者卵泡液阻礙小鼠卵母細胞成熟的干預機制研究33-39
• 一、材料33
• 二、方法33-36
• 三、結果36-39
• 討論39-47
• 參考文獻47-51
• 結論51-52
• 文獻綜述 子宮內膜異位癥患者卵泡液微環(huán)境與不孕癥發(fā)生相關性研究進展52-59
• 參考文獻56-59
• 在讀期間發(fā)表論文和參加科研工作59-60
• 致謝60

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本文編號：1116452