發(fā)布時(shí)間：2017-07-26 02:01

  本文關(guān)鍵詞：Fth1基因標(biāo)記對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及體外MRI表現(xiàn)的影響

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【摘要】：目的觀察鐵蛋白報(bào)告基因Fth1標(biāo)記對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)生物學(xué)特性及體外MRI表現(xiàn)的影響。方法原代分離培養(yǎng)大鼠MSCs,取第4代MSCs,用構(gòu)建的攜帶鐵蛋白重鏈基因Fth1的慢病毒載體進(jìn)行感染,并在培養(yǎng)液內(nèi)加入1mol/L檸檬酸鐵進(jìn)行培養(yǎng)。采用普魯士藍(lán)染色檢測(cè)MSCs的攝鐵能力,錐蟲藍(lán)染色活細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)MSCs的細(xì)胞存活率,CCK-8方法測(cè)定MSCs的增殖活性。應(yīng)用MRI的FSE T2WI和SWAN序列觀察Fth1標(biāo)記的MSCs和未標(biāo)記MSCs MRI信號(hào)的差異。結(jié)果 Fth1基因可成功轉(zhuǎn)染MSCs,轉(zhuǎn)染MSCs的普魯士藍(lán)染色標(biāo)記效率為87%。未加含鐵培養(yǎng)液的Fth1標(biāo)記MSCs細(xì)胞存活率為(92.17±1.91)%,細(xì)胞增殖活性D值為1.094±0.068,與未標(biāo)記MSCs比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[細(xì)胞存活率為(94.23±2.42)%,細(xì)胞增殖活性D值為1.027±0.122;P0.05);加入含鐵培養(yǎng)液培養(yǎng)3d后的Fth1標(biāo)記MSCs細(xì)胞存活率為(77.47±4.10)%,細(xì)胞增殖活性D值為0.493±0.024,與未加含鐵培養(yǎng)液的Fth1標(biāo)記MSCs及未標(biāo)記MSCs比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。MRI掃描FSE T2WI和SWAN序列顯示,加入含鐵培養(yǎng)液培養(yǎng)5d后Fth1標(biāo)記MSCs信號(hào)強(qiáng)度為656.6±18.2,與未加含鐵培養(yǎng)液的Fth1標(biāo)記MSCs及未標(biāo)記MSCs比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為807.3±17.1和847.1±10.5,P0.05),而未加含鐵培養(yǎng)液的Fth1標(biāo)記MSCs與未標(biāo)記MSCs比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 Fth1報(bào)告基因可成功轉(zhuǎn)染MSCs,轉(zhuǎn)染后的MSCs可高效表達(dá)并攝取鐵;細(xì)胞活力及增殖活性在不含鐵的培養(yǎng)液中不受影響,但在鐵濃度1mol/L含鐵培養(yǎng)液中受到一定影響;經(jīng)含鐵培養(yǎng)液培養(yǎng)5d后,MRI可體外檢測(cè)Fth1標(biāo)記MSCs,其FSE T2WI和SWAN序列呈低信號(hào)改變。
【作者單位】： 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院影像科;上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬第七人民醫(yī)院影像科;
【關(guān)鍵詞】： 鐵蛋白報(bào)告基因 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 生物學(xué)特性 磁共振成像
【基金】：上海市科委科技創(chuàng)新行動(dòng)計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(10411953400) 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院項(xiàng)目(12XJ30061) 上海市衛(wèi)生局科研課題(20124194) 上海市寶山區(qū)科學(xué)技術(shù)委員會(huì)科研項(xiàng)目(14-E-4)~~
【分類號(hào)】：R445.2;R329.2
【正文快照】： signal differences between transfected MSCs and normal MSCs were observed by MRI FSE T2WI and SWAN sequence.Results MSCs were successfully transfected with Fth1 gene,with the Prussian blue staining efficiency being 87%.Fortransfected MSCs without ferric

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 孫志華;杜軍偉;劉娟;許長(zhǎng)萌;韓玉霞;關(guān)團(tuán);陳創(chuàng)夫;張輝;;FTH1在布魯氏菌侵染宿主細(xì)胞中的作用[J];石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2014年02期

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本文編號(hào)：574206