本文關鍵詞：HOXD10在膽管癌細胞放療增敏中的作用

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【摘要】：目的 :探討同源異型盒D10(homeobox D10,HOXD10)基因在人膽管癌細胞放療增敏中的作用及其可能的作用機制。方法:用不同劑量的放射線照射膽管癌RBE和HCCC9810細胞后,應用實時熒光定量PCR法檢測細胞中HOXD10 mRNA的表達。應用克隆形成實驗、"多靶單擊模型"和FCM法檢測HOXD10穩(wěn)定過表達的膽管癌LvHOXD10-RBE和Lv-HOXD10-HCCC9810細胞的放射增敏效應及細胞的凋亡情況,蛋白質(zhì)印跡法檢測放射治療對HOXD10過表達的膽管癌LvHOXD10-RBE和Lv-HOXD10-HCCC9810細胞中凋亡相關蛋白表達的影響。結果:2、4和8 Gy放射治療后48和72 h,膽管癌RBE和HCCC9810細胞中HOXD10 mRNA的表達水平均顯著高于放療后24 h組(P值均0.05)。在2、4和8 Gy放射治療后,Lv-HOXD10-RBE和LvHOXD10-HCCC9810細胞的克隆形成率均分別顯著低于對應的僅表達綠色熒光蛋白的陰性對照Lv-CTRL-RBE和Lv-CTRL-HCCC9810細胞(P值均0.05);Lv-HOXD10-RBE和Lv-HOXD10-HCCC9810細胞的平均致死劑量(mean lethal dose,D0)、準閾劑量(quasithreshold dose,Dq)和2 Gy單次照射后細胞的存活分數(shù)(survival fraction with 2 Gy,SF2)值均分別低于Lv-CTRL-RBE和Lv-CTRL-HCCC9810細胞(P值均0.05)。4 Gy放射治療后24 h,Lv-HOXD10-RBE和Lv-HOXD10-HCCC9810細胞凋亡率高于Lv-CTRL-RBE和Lv-CTRL-HCCC9810細胞(P值均0.05);Lv-HOXD10-RBE和Lv-HOXD10-HCCC9810細胞中p53、p21和Bax蛋白的表達水平均高于Lv-CTRL-RBE和Lv-CTRLHCCC9810細胞,而雙微體2(murine double minute 2,Mdm2)蛋白的表達水平均低于Lv-CTRL-RBE和Lv-CTRL-HCCC9810細胞(P值均0.05)。結論:HOXD10可增加人膽管癌RBE和HCCC9810細胞對放射的敏感性,這一作用可能與凋亡相關蛋白的表達上調(diào)有關。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學第二附屬醫(yī)院放射治療科;第四軍醫(yī)大學腫瘤研究所;河南科技大學第一附屬醫(yī)院病理科;西安交通大學第一附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科;
【關鍵詞】： 膽管腫瘤 放射療法 輻射耐受性 集落形成單位測定 基因 HOXD
【分類號】：R735.8;R730.55
【正文快照】： 方法:用不同劑量的放射線照射膽管癌RBE和HCCC9810細胞后,應用實時熒光定量PCR法檢測細胞中HOXD10 m RNA的表達。應用克隆形成實驗、“多靶單擊模型”和FCM法檢測HOXD10穩(wěn)定過表達的膽管癌Lv-HOXD10-RBE和Lv-HOXD10-HCCC9810細胞的放射增敏效應及細胞的凋亡情況,蛋白質(zhì)印跡法

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