本文選題：超順磁性氧化鐵納米顆粒　切入點(diǎn)：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：一、研究目的探索使用超順磁性氧化鐵納米顆粒標(biāo)記骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的適合濃度,量化體外MRI成像所需的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的最低細(xì)胞密度,證明超順磁性氧化鐵納米顆粒對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成軟骨細(xì)胞分化無顯著影響,為后續(xù)更深入的動物實(shí)驗等提供一定的實(shí)驗依據(jù)和基礎(chǔ)。二、研究方法本實(shí)驗采用全骨髓貼壁法體外分離培養(yǎng)獲得原代SD大鼠的自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,采用超順磁性氧化鐵納米顆粒標(biāo)記細(xì)胞后,觀察標(biāo)記后的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡等生物學(xué)行為變化,然后使用磁共振設(shè)備進(jìn)行體外骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成像,觀察和判斷標(biāo)記效果和成像質(zhì)量等,同時對標(biāo)記后的干細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)分化實(shí)驗,將其誘導(dǎo)分化為成軟骨細(xì)胞,并觀察和判斷誘導(dǎo)分化的效果。三、研究結(jié)果1.超順磁性氧化鐵納米顆粒標(biāo)記對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖能力的影響。通過從SD大鼠脛骨、股骨的骨組織內(nèi)分離并培養(yǎng)獲得了原代的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSC),并且可以不斷傳代和擴(kuò)增細(xì)胞,同時保持細(xì)胞生物學(xué)活性和狀態(tài)良好。本文所指超順磁性氧化鐵納米顆粒濃度均為含F(xiàn)e濃度。通過CCK-8法證明了當(dāng)超順磁性氧化鐵納米顆粒的濃度低于7.5μg/ml時,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖活性沒有受到明顯影響。還通過普魯士藍(lán)染色發(fā)現(xiàn)超順磁性氧化鐵納米顆粒的標(biāo)記率非常高。2.超順磁性氧化鐵納米顆粒標(biāo)記骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外MR成像。使用3.0T MRI對超順磁性氧化鐵納米顆粒標(biāo)記的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行體外成像掃描,成像質(zhì)量高,可以發(fā)現(xiàn)隨著骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞密度逐漸增大,在T2WI和T2*WI序列上的細(xì)胞信號都逐漸降低。T2WI成像可以發(fā)現(xiàn)的最低細(xì)胞密度為25×104/ml,T2*WI成像可以發(fā)現(xiàn)的最低細(xì)胞密度為12.5×104/ml,說明T2*WI比T2WI發(fā)現(xiàn)細(xì)胞信號改變更為敏感。3.超順磁性氧化鐵納米顆粒標(biāo)記對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化能力的影響。通過將超順磁性氧化鐵納米顆粒標(biāo)記的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)分化為成軟骨細(xì)胞的培養(yǎng),并使用阿利新藍(lán)染色進(jìn)行鑒別,發(fā)現(xiàn)了未標(biāo)記的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和被標(biāo)記的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞都生長、分化狀態(tài)良好,可見到分泌出內(nèi)酸性粘多糖。四、結(jié)論1.濃度為0,2.5,5,7.5μg/ml的超順磁性氧化鐵納米顆粒對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞增殖活性沒有顯著影響,而當(dāng)濃度為10,12.5 μg/ml時,干細(xì)胞的細(xì)胞活性受到了較明顯的影響。2.普魯士藍(lán)染色表明超順磁性氧化鐵納米顆粒濃度為2.5,5μg/ml時的干細(xì)胞標(biāo)記率低于濃度為7.5,10,12.5 μg/ml時的標(biāo)記率。3.體外MRI表明當(dāng)超順磁性氧化鐵納米顆粒的標(biāo)記濃度為7.5μg/ml時,標(biāo)記細(xì)胞的T2值隨著細(xì)胞密度增大而降低,在T2WI成像下可發(fā)現(xiàn)的最低細(xì)胞密度為25×104/ml,T2*WI成像可以發(fā)現(xiàn)的最低細(xì)胞密度為12.5×104/ml,說明T2*WI比T2WI發(fā)現(xiàn)細(xì)胞信號改變更為敏感。4.體外誘導(dǎo)分化實(shí)驗表明濃度為7.5μg/ml的超順磁性氧化鐵納米顆粒標(biāo)記骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞后仍可以經(jīng)過誘導(dǎo)分化后生長良好并分泌出內(nèi)酸性粘多糖,但需要進(jìn)一步研究以確定此標(biāo)記濃度下分化的細(xì)胞是否為成軟骨細(xì)胞。
[Abstract]:Bone marrow mesenchymal stem cells ( bone marrow mesenchymal stem cells , BMMSC ) were isolated and cultured in vitro .

【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R445.2;R68

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1709167