本文關(guān)鍵詞：川芎嗪對(duì)人食管癌細(xì)胞株ECA109體外放射敏感性的影響　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:研究川芎嗪對(duì)食管癌ECA109細(xì)胞株的抑制作用及其放療增敏作用,并初步探討其可能的機(jī)制,為川芎嗪作為放療增敏劑在臨床上應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。方法:采用CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度的川芎嗪和不同劑量放療及二者聯(lián)合對(duì)ECA109細(xì)胞株的增殖抑制率的影響;倒置顯微鏡下觀察川芎嗪和放療及二者聯(lián)合對(duì)ECA109細(xì)胞株形態(tài)的影響。流式細(xì)胞儀檢測(cè)ECA109細(xì)胞株的細(xì)胞周期變化及早期凋亡率。免疫熒光雙重染色檢測(cè)ECA109株細(xì)胞的凋亡情況;DNA電泳觀察ECA109細(xì)胞株的晚期凋亡情況;western blot檢測(cè)Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:1 CCK-8結(jié)果CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示川芎嗪和放療單獨(dú)應(yīng)用對(duì)ECA109細(xì)胞株均有抑制作用,并且在一定范圍內(nèi)呈劑量依賴性,不同濃度的川芎嗪(0.5mg/ml、1 mg/ml、1.5 mg/ml、2.0 mg/ml、2.5 mg/ml、3.0 mg/ml)作用于ECA109細(xì)胞株24h后的抑制率分別為:(9.60±0.95)%、(21.13±3.58)%、、(35.37±3.21)%、(49.68±0.99)%、(55.36±6.36)%、(61.26±5.26)%,在觀察范圍內(nèi)(0.5-3mg/ml),抑制率隨著川芎嗪濃度的升高而升高(P0.05)。川芎嗪作用于ECA109細(xì)胞株24h的IC50值為2.03mg/ml。放射劑量為2、4、6、8Gy對(duì)ECA109細(xì)胞株的抑制率分別為:(8.97±1.11)%、(15.22±2.36)%、(23.31±5.24)%、(32.15±5.21)%,抑制率隨著放射劑量的升高而升高(P0.05)。川芎嗪聯(lián)合放療對(duì)ECA109細(xì)胞株的抑制率,最低值川芎嗪0.5mg/ml+2Gy放療抑制率(20.57±4.25)%,最高值川芎嗪3mg/ml+8Gy放療抑制率(88.36±8.69)%,較單一用藥或者單純放療高(P0.05)。2光學(xué)顯微鏡觀察結(jié)果倒置顯微鏡下可以看到川芎嗪和放療及二者聯(lián)合作用后,ECA109細(xì)胞株形態(tài)發(fā)生了不同程度的變化,以聯(lián)合應(yīng)用組為著。3細(xì)胞周期檢測(cè)結(jié)果流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期結(jié)果顯示川芎嗪可以阻滯ECA109細(xì)胞株的G0/G1期,放療阻滯ECA109細(xì)胞株的G2/M期,聯(lián)合應(yīng)用后,ECA109細(xì)胞株處于G2/M期的細(xì)胞與放療組相比顯著增多。4流式細(xì)胞儀檢測(cè)早期凋亡率結(jié)果流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡率結(jié)果顯示,川芎嗪?jiǎn)为?dú)作用與ECA109細(xì)胞株的早期凋亡率為(13.57±1.32)%,放療組ECA109細(xì)胞株早期凋亡率為9.14±2.01)%,川芎嗪和放療聯(lián)合應(yīng)用組早期凋亡率為(22.31±2.14)%,均顯著高于對(duì)照組(1.77±0.15)%(P0.01)。5瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示,川芎嗪組和聯(lián)合作用組出現(xiàn)了明顯的梯狀條帶,對(duì)照組和放療組沒(méi)有出現(xiàn)梯狀條帶。6 Western blot結(jié)果WB結(jié)果顯示,川芎嗪組Bcl-2蛋白表達(dá)下降,Bax蛋白表達(dá)量明顯上升。放療單獨(dú)應(yīng)用對(duì)Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)無(wú)明顯影響,放療聯(lián)合川芎嗪組的Bcl-2蛋白表達(dá)明顯下降,而Bax蛋白表達(dá)明顯升高。結(jié)論:1川芎嗪和放療對(duì)ECA109細(xì)胞株具有抑制作用,并且在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)劑量依賴性,放療和川芎嗪聯(lián)合應(yīng)用對(duì)ECA109細(xì)胞株的抑制作用強(qiáng)于二者單用。2川芎嗪和放療對(duì)ECA109細(xì)胞株的抑制作用與誘導(dǎo)ECA109細(xì)胞株凋亡有關(guān)。3川芎嗪對(duì)ECA109細(xì)胞株具有放療增敏作用。4川芎嗪對(duì)ECA109細(xì)胞株的放療增敏作用可能與改變細(xì)胞周期、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,下調(diào)Bcl-2與Bax蛋白比值有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.1;R730.55

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本文編號(hào)：1333071