本文關(guān)鍵詞：涼血化瘀法對紫癜性腎炎大鼠血尿、蛋白尿和腎組織Nephrin及Podocin的影響

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【摘要】：過敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)是兒童時期最常見的微血管炎,臨床以皮膚紫斑、腹痛或伴便血、關(guān)節(jié)疼痛、腎臟炎癥等為主要表現(xiàn)。HSP可引起多臟器損害,其中大約有20%-80%可涉及腎臟,造成紫癜性腎炎(Henoch-Schonlein purpura nephritis,HSPN)。大多數(shù)的HSPN預后尚可,但仍有部分患兒病程遷延,少數(shù)甚至發(fā)展成慢性腎功能不全,直至終末期腎病。通過對HSPN研究進展的分析,發(fā)現(xiàn)目前鮮有關(guān)于HSPN模型的報道,沒有成熟的動物模型,限制了對HSP及HSPN病理機制、治療方案的探索,同時為新藥的研發(fā)帶來困難。另一方面,涼血化瘀法是中醫(yī)治療HSPN血尿及蛋白尿的主要方法,近幾年研究發(fā)現(xiàn)裂孔膜蛋白Nephrin及Podocin與腎臟疾病導致的蛋白尿關(guān)系密切,涼血化瘀法對Nephrin及Podocin的影響目前還未有相關(guān)研究。目的 探索并建立有效的HSPN大鼠模型,觀察丹芍顆粒Ⅲ對HSPN大鼠血尿、蛋白尿和腎組織Nephrin及Podocin的影響,探討涼血化瘀法對HSPN大鼠的治療作用及其可能機制。方法 1.將21只SD大鼠(雄性)按隨機數(shù)字表法分為空白組、模型組、丹芍組,每組7只。模型組和丹芍組以BSA+LPS+CCl4方法造就IgA腎病模型,同時用熱性藥物灌胃造就瘀熱模型,復合成為HSPN動物模型。 2.丹芍組給予丹芍顆粒Ⅲ進行治療。造模及治療結(jié)束后應(yīng)用尿沉渣計數(shù)法檢測尿紅細胞個數(shù),BCA法檢測24h尿蛋白定量；光鏡下觀察腎小球系膜變化；采用間接免疫熒光法檢測腎小球Nephrin及Podocin的表達及分布；采用RT-PCR技術(shù)檢測腎組織Nephrin mRNA和Podocin mRNA的表達。 3.采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理。結(jié)果 1.模型組僅2例出現(xiàn)皮下紫癜,但模型組鏡下紅細胞計數(shù)及24h尿蛋白定量均顯著高于空白組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01),病理結(jié)果提示造模后腎組織腎小球系膜明顯增生,腎小管腫脹,腎小球上有IgA沉積,說明造模有效； 2.丹芍組大鼠的尿紅細胞計數(shù)及尿蛋白定量均明顯低于模型組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)； 3.丹芍組大鼠腎組織病理顯示腎小球系膜增厚,但較模型組好轉(zhuǎn),僅有少量炎癥細胞浸潤； 4.免疫熒光結(jié)果顯示丹芍組大鼠腎小球Nephrin表達量較模型組升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01),丹芍組腎小球Podocin表達雖然較模型組有上升趨勢,但差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)； 5.激光共聚焦顯微鏡下模型組的腎小球Nephrin及Podocin蛋白分布不均,甚至出現(xiàn)斷裂,丹芍組大鼠腎小球Nephrin及Podocin蛋白分布較模型組有所改善； 6.RT-PCR結(jié)果表明丹芍組大鼠腎組織Nephrin mRNA及Podocin mRNA的表達較模型組升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論 1.綜合模擬IgA腎病與瘀熱證實驗動物模型,復合成為HSPN模型的造模方法可行,但需要進一步重復實驗進行驗證。 2.以涼血化瘀為主要作用機制的丹芍顆粒Ⅲ能有效降低HSPN大鼠血尿及蛋白尿水平,改善腎組織炎癥反應(yīng),改善腎小球Nephrin及Podocin的分布不均及斷裂的情況,并能提高腎組織Nephrin mRNA及Podocin mRNA的表達。
【關(guān)鍵詞】：涼血化瘀 丹芍顆粒Ⅲ 紫癜性腎炎 動物模型 Nephrin Podocin
【學位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R272
【目錄】：

• 中文摘要8-10
• ABSTRACT10-12
• 前言12-13
• 第一部分 理論研究13-27
• 1 HSPN的中醫(yī)藥研究概況13-17
• 1.1 病名溯源13
• 1.2 歷代醫(yī)家對病因病機的探討13-15
• 1.3 歷代醫(yī)家對治則治法的闡述15-17
• 2 HSPN的現(xiàn)代醫(yī)學研究概況17-23
• 2.1 流行病學17
• 2.2 發(fā)病原因及發(fā)病機制17-19
• 2.3 診斷19-20
• 2.4 西醫(yī)治療20-22
• 2.5 中西醫(yī)結(jié)合治療22
• 2.6 預后22-23
• 3 Podocin及Nephrin與HSPN的關(guān)系23-24
• 3.1 Podocin及Nephrin的作用23-24
• 3.2 Podocin Nephrin與繼發(fā)性腎病的關(guān)系24
• 4 復合造模的依據(jù)24-26
• 4.1 建立IgA腎病模型的依據(jù)25
• 4.2 建立“瘀熱證”模型的依據(jù)25-26
• 5 丹芍顆粒的前期研究成果26-27
• 第二部分 實驗部分27-36
• 1 材料27-28
• 1.1 實驗動物27
• 1.2 實驗藥物27
• 1.3 實驗試劑27
• 1.4 實驗儀器及設(shè)備27-28
• 2 方法28-32
• 2.1 HSPN實驗動物模型的建立28
• 2.2 實驗分組、給藥方案及標本的采集28-29
• 2.3 免疫組化法檢測實驗大鼠腎小球IgA沉淀29
• 2.4 實驗大鼠尿紅細胞計數(shù)及尿蛋白定量檢測29-30
• 2.5 實驗大鼠腎組織病理切片30
• 2.6 間接免疫熒光法檢測腎小球Podocin及Nephrin的表達30
• 2.7 RT-PCR法檢測腎組織Podocin mRNA及Nephrin mRNA的表達30-32
• 2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計32
• 3 結(jié)果32-36
• 3.1 空白組與模型組腎小球IgA沉積對比32-33
• 3.2 丹芍顆粒Ⅲ對實驗大鼠血尿、蛋白尿水平的影響33
• 3.3 丹芍顆粒Ⅲ對實驗大鼠腎小球Podocin及Nephrin表達及分布的影響33-34
• 3.4 丹芍顆粒Ⅲ對實驗大鼠腎組織Podocin mRNA及Nephrin mRNA表達的調(diào)控作用34-35
• 3.5 大鼠病理切片結(jié)果35-36
• 第三部分 討論36-38
• 第四部分 結(jié)語38-40
• 1 結(jié)論38
• 2 創(chuàng)新之處38
• 3 研究展望38-40
• 參考文獻40-47
• 英文縮略詞表47-49
• 碩士在讀期間發(fā)表論文49-50
• 致謝50-51
• 個人簡歷51

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉玉清;丁櫻;翟文生;任獻青;楊曉青;;小兒過敏性紫癜性腎炎腎臟病理分級與中醫(yī)辨證的關(guān)系[J];安徽中醫(yī)學院學報;2011年05期

2 孫軼秋,汪受傳,金鐘大,朱萱萱;丹芍顆粒改善微循環(huán)、抗炎、抗Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的實驗研究[J];北京中醫(yī);2003年01期

3 袁斌;孫軼秋;樊忠民;吳波;劉光陵;李輝;孔飛;袁增輝;張永春;;涼血化瘀通絡(luò)法治療小兒過敏性紫癜腎炎臨床療效及病理類型關(guān)系[J];中華中醫(yī)藥雜志;2011年03期

4 張曉強;劉品莉;李孟芳;任文棟;;過敏性紫癜動物模型的研制思路[J];中華中醫(yī)藥雜志;2011年10期

5 梁s，

本文編號：909821