本文關(guān)鍵詞：EphB4基因甲基化異常與兒童ALL發(fā)病的臨床研究

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【摘要】：目的本課題擬通過(guò)研究骨髓標(biāo)本EphB4基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)對(duì)其表達(dá)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用，探討EphB4基因甲基化在兒童ALL發(fā)生發(fā)展中的生物學(xué)意義，以及EphB4基因甲基化狀態(tài)對(duì)ALL患兒預(yù)后的影響。 方法（1）分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞并提取基因組DNA，采用亞硫酸氫鹽修飾后（BisulfiteSequencing PCR，BSP）法檢測(cè)EphB4基因甲基化水平。（2）提取骨髓樣本總RNA，采用實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增（real time quantitation PCR, QPCR）檢測(cè)EphB4基因mRNA表達(dá)；（3）提取骨髓樣本總蛋白質(zhì)，以Western blot法檢測(cè)EphB4蛋白表達(dá)水平。（4）對(duì)比甲基化組及非甲基化組ALL患兒對(duì)誘導(dǎo)緩解治療的效果，分析EphB4基因甲基化對(duì)ALL兒童治療效果的影響。 結(jié)果：（1）、確定ALL患兒骨髓單個(gè)核細(xì)胞EphB4基因啟動(dòng)子區(qū)域CpG島存在甲基化,甲基化水平在7.94-36.5%之間，平均水平為15.76%，甲基化率為32.5%（13/40），對(duì)照組均未發(fā)生甲基化，經(jīng)Fisher精確檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；（2）、對(duì)照組及未發(fā)生甲基化患兒mRNA相對(duì)表達(dá)量（21.14±4.95及11.24±3.03）明顯高于發(fā)生甲基化ALL患兒（5.89±2.40），，并且ALL患兒中甲基化程度越高者表達(dá)越少；（3）、Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)發(fā)生甲基化的ALL患兒骨髓單個(gè)核細(xì)胞中幾乎無(wú)該基因的表達(dá)，而對(duì)照組細(xì)胞可檢測(cè)到EphB4基因的表達(dá)，非甲基化的ALL患兒EphB4基因表達(dá)減弱。（4）、甲基化組2年EFS率（68.4±1.58）%高于非甲基化組2年EFS率為（91.7±8）%。 結(jié)論： ALL患兒骨髓EphB4基因啟動(dòng)子區(qū)域CpG島存在異常甲基化并影響其表達(dá)，對(duì)照組患兒未發(fā)生甲基化。EphB4基因甲基化狀態(tài)在兒童ALL的發(fā)病及預(yù)后中發(fā)揮作用。
【關(guān)鍵詞】：EphB4 兒童 ALL 甲基化
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R733.71
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-6
• 1 前言6-8
• 2 實(shí)驗(yàn)材料8-12
• 3 實(shí)驗(yàn)方法12-18
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-23
• 5 討論23-29
• 6 結(jié)論29
• 7 展望29
• 參考文獻(xiàn)29-34
• 附文綜述34-39
• 參考文獻(xiàn)38-39
• 英文縮略詞索引39-41
• 致謝41-42

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 文飛球,陳亦欣,曹勵(lì)之,劉馮,周克英,陳霆;兒童急性白血病端粒酶活性與p15基因表達(dá)關(guān)系的研究(英文)[J];中國(guó)當(dāng)代兒科雜志;2005年02期

2 李玉華;文飛球;陳亦欣;陳俐麗;;5-Aza-CdR對(duì)CEM細(xì)胞生長(zhǎng)抑制的實(shí)驗(yàn)研究[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2012年10期

3 文飛球,陳亦欣,曹勵(lì)之,周克英,李博,李玉華,劉智屏;急性髓性白血病p15~(INK4B)基因表達(dá)和基因甲基化狀態(tài)的研究[J];中華兒科雜志;2005年03期

本文編號(hào)：626971