本文關(guān)鍵詞：遺傳性肥胖兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌的分離鑒定及生理功能的探究

  更多相關(guān)文章： 遺傳性肥胖 腸道菌群 乳酸菌 短鏈脂肪酸 復(fù)雜碳水化合物 全基因組測(cè)序

【摘要】：人和動(dòng)物的腸道內(nèi)棲息著數(shù)量龐大且種類豐富的微生物。腸道菌群通過(guò)代謝、營(yíng)養(yǎng)、免疫等作用影響宿主健康。以乳桿菌和雙歧桿菌為代表的益生菌對(duì)人體具有多種重要的生理功能。失衡的腸道菌群對(duì)膳食誘導(dǎo)的肥胖的重要作用已得到證實(shí)。而腸道菌群在人類遺傳性肥胖中的作用還有待研究。小胖威利癥(Prader-Willi syndrome,PWS)由父源15號(hào)染色體的缺失、突變或基因印記導(dǎo)致,是最常見(jiàn)的基因缺陷導(dǎo)致的肥胖�；颊咴趦和瘯r(shí)期表現(xiàn)出暴食癥并發(fā)展為重度肥胖。本研究中的PWS肥胖兒童接受了為期105天的富含碳水化合物和復(fù)合益生元的營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后,體重顯著降低,糖、脂代謝相關(guān)的指標(biāo)顯著改善。其腸道內(nèi)的乳桿菌和雙歧桿菌顯著增加并成為優(yōu)勢(shì)菌。本研究首先采用MRS瓊脂選擇性培養(yǎng)基從該P(yáng)WS肥胖兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后的糞便樣品中進(jìn)行乳桿菌和雙歧桿菌的分離。使用變性梯度凝膠電泳技術(shù)、ERIC-PCR指紋圖譜技術(shù)、16S rRNA基因測(cè)序技術(shù)等分子生物學(xué)方法對(duì)分離物進(jìn)行分型和鑒定。94個(gè)分離物屬于乳桿菌,74個(gè)分離物屬于雙歧桿菌。其中88株粘膜乳桿菌分為4種ERIC類型;3株卷曲乳桿菌僅一種ERIC類型;3株格氏乳桿菌僅一種ERIC類型。73株假小鏈雙歧桿菌分為5種eric類型;1株長(zhǎng)雙歧桿菌為1種eric類型。為了進(jìn)一步研究pws兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌的生理功能,測(cè)定了分離株的短鏈脂肪酸產(chǎn)生能力、發(fā)酵液的抑菌能力和降解利用碳水化合物的能力,究發(fā)現(xiàn),所有分離株都只產(chǎn)乙酸,不產(chǎn)其他揮發(fā)性脂肪酸。而分離株的發(fā)酵液對(duì)pws兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)前腸道內(nèi)的大腸桿菌分離株、標(biāo)準(zhǔn)菌株escherichiacolimg1655和enterobactercloacaeb29無(wú)明顯的抑菌作用。研究菌株降解利用復(fù)雜碳水化合物的能力發(fā)現(xiàn),分離株bifidobacteriumpseudocatenulatumc95對(duì)低聚果糖和中長(zhǎng)鏈菊粉的利用能力優(yōu)于bacteroidesthetaiotaomicronatcc29148和eschrichiacolid45;對(duì)formulano.3(兒童膳食干預(yù)成份之一)的利用能力優(yōu)于bacteroidesthetaiotaomicronatcc29148、anaerostipeshadrusbpb5和eschrichiacolid45。綜上所述,本研究成功分離得到了一名pws兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌——乳桿菌和雙歧桿菌。發(fā)現(xiàn)腸道中同一類型的細(xì)菌具有豐富的菌株多樣性。與腸道中其他常見(jiàn)共生菌的代表菌株相比,分離株bifidobacteriumpseudocatenulatumc95具有更強(qiáng)的碳水化合物利用能力。該菌株的全基因組信息在cog和kegg兩大數(shù)據(jù)庫(kù)中的基因注釋結(jié)果顯示,菌株自身具有豐富的代謝碳水化合物的相關(guān)基因。雙歧桿菌分離株降解利用碳水化合物的能力,或許能夠一定程度地解釋該名兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)雙歧桿菌顯著增加并成為優(yōu)勢(shì)菌的這一現(xiàn)象。雙歧桿菌bifidobacteriumpseudocatenulatumc95是以志愿者健康效應(yīng)為指導(dǎo)分離得到的關(guān)鍵菌,具有成為益生菌的極大潛力。
【關(guān)鍵詞】：遺傳性肥胖 腸道菌群 乳酸菌 短鏈脂肪酸 復(fù)雜碳水化合物 全基因組測(cè)序
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R723.14
【目錄】：

• 摘要3-6
• ABSTRACT6-12
• 第一章 前言12-31
• 1.1 腸道菌群背景介紹12-18
• 1.1.1 腸道菌群的組成12
• 1.1.2 腸道菌群的功能12-14
• 1.1.3 腸道菌群與單純性肥胖及相關(guān)代謝綜合征的關(guān)系14-16
• 1.1.4 腸道菌群與遺傳性肥胖的關(guān)系16-17
• 1.1.5 腸道菌群中的關(guān)鍵細(xì)菌的作用17-18
• 1.2 乳桿菌和雙歧桿菌的背景介紹18-20
• 1.2.1 乳桿菌18
• 1.2.2 雙歧桿菌18-19
• 1.2.3 雙歧桿菌發(fā)酵利用碳水化合物的能力19-20
• 1.3 研究腸道菌群的相關(guān)技術(shù)20-21
• 1.3.1 變性梯度凝膠電泳指紋圖譜技術(shù)20
• 1.3.2 ERIC-PCR指紋圖譜技術(shù)20-21
• 1.3.3 16S rRNA基因測(cè)序技術(shù)21
• 1.3.4 腸道內(nèi)乳桿菌和雙歧桿菌的分離技術(shù)21
• 1.4 本論文的研究背景介紹21-24
• 參考文獻(xiàn)24-31
• 第二章 遺傳性肥胖兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌的分離和鑒定31-47
• 引言31
• 2.1 材料和方法31-34
• 2.1.1 PWS兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)105天的糞便樣品中優(yōu)勢(shì)菌的分離31-32
• 2.1.2 單菌分離物DNA的提取32
• 2.1.3 單菌分離物16S rRNA基因V3區(qū)PCR擴(kuò)增和DGGE分析32-33
• 2.1.4 單菌分離物ERIC-PCR指紋圖譜分析33
• 2.1.5 單菌分離物16S rRNA基因序列的測(cè)定和序列分析33-34
• 2.2 結(jié)果34-41
• 2.2.1 PWS兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)105天糞便樣品中優(yōu)勢(shì)菌的分離結(jié)果34
• 2.2.2 單菌分離物與原始糞便樣品 16S rRNA V3區(qū)PCR-DGGE圖譜比對(duì)結(jié)果34-36
• 2.2.3 單菌分離物ERIR-PCR指紋圖譜分型結(jié)果36-37
• 2.2.4 單菌分離物16S rRNA基因序列的分析結(jié)果37-40
• 2.2.5 乳桿菌分離物16S rRNA基因V3區(qū)PCR-DGGE圖譜多條帶現(xiàn)象的探究40-41
• 2.3 討論41-43
• 本章小結(jié)43-44
• 參考文獻(xiàn)44-47
• 第三章 遺傳性肥胖兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌生理功能的探究47-73
• 引言47
• 3.1 材料和方法47-50
• 3.1.1 PWS兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌生長(zhǎng)曲線的測(cè)定47-48
• 3.1.2 PWS兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌上清發(fā)酵液p H的測(cè)定48
• 3.1.3 PWS兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌短鏈脂肪酸產(chǎn)生能力的測(cè)定48
• 3.1.4 PWS兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌上清發(fā)酵液抑菌能力的測(cè)定48-49
• 3.1.5 PWS兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)雙歧桿菌分離株碳水化合物利用能力的研究49-50
• 3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果50-65
• 3.2.1 PWS兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌的生長(zhǎng)曲線50-51
• 3.2.2 PWS兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌的短鏈脂肪酸產(chǎn)生能力51-53
• 3.2.3 PWS兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌上清發(fā)酵液的抑菌能力53-55
• 3.2.4 PWS兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)雙歧桿菌分離株利用碳水化合物的能力55-65
• 3.3 討論65-68
• 本章小結(jié)68-69
• 課題總結(jié)69-70
• 參考文獻(xiàn)70-73
• 附錄 1：PWS兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌假小鏈雙歧桿菌C95菌株全基因組序列的測(cè)定73-84
• 引言73
• 4.1 方法73-75
• 4.1.1 菌株的全基因組DNA的提取73
• 4.1.2 菌株的全基因組序列的測(cè)定及分析73-75
• 4.2 菌株全基因組的測(cè)定結(jié)果75-81
• 4.2.1 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和質(zhì)控結(jié)果75-76
• 4.2.2 樣品reads的組裝結(jié)果76-78
• 4.2.3 基因注釋78-81
• 討論81-83
• 參考文獻(xiàn)83-84
• 附錄 2：培養(yǎng)基和溶液試劑的配制84-85
• 附錄 3：實(shí)驗(yàn)所用的主要儀器85-86
• 致謝86-88

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 洪忠新,許英霞,王立靜;營(yíng)養(yǎng)干預(yù)對(duì)重度一氧化碳中毒患者免疫狀況的影響[J];內(nèi)科急危重癥雜志;2001年03期

2 劉淮玉,唐毅,徐慧華,吳建華,錢利年,李兵,許潔,郭紅衛(wèi);社區(qū)2型糖尿病營(yíng)養(yǎng)干預(yù)的對(duì)比研究[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2002年06期

3 蘇應(yīng)雄,傅小魯,顏代英,馮戈,徐勇;成都市學(xué)生營(yíng)養(yǎng)干預(yù)[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2002年02期

4 朱蓓,王松俊;應(yīng)激及其營(yíng)養(yǎng)干預(yù)[J];解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2003年06期

5 李璞,趙理;2型糖尿病患者營(yíng)養(yǎng)干預(yù)的對(duì)照分析[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2004年01期

6 徐名周;關(guān)碧華;張正才;歐水招;李玉梅;林子雄;;廣州市東山區(qū)城市嬰兒營(yíng)養(yǎng)干預(yù)研究[J];國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào);2006年13期

7 燕慧梅;;早期營(yíng)養(yǎng)干預(yù)可減少住院時(shí)間[J];中國(guó)社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)半月刊);2008年06期

8 周喜云;;2型糖尿病認(rèn)知水平與營(yíng)養(yǎng)干預(yù)對(duì)照觀察[J];中國(guó)社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè));2010年14期

9 王露;高鍵;唐紅;金鳳妹;;門診糖尿病個(gè)體化營(yíng)養(yǎng)干預(yù)實(shí)施的后續(xù)研究[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2011年04期

10 韋燕萍;高銘云;劉柳芳;;營(yíng)養(yǎng)干預(yù)對(duì)消化系統(tǒng)惡性腫瘤住院患者營(yíng)養(yǎng)認(rèn)知影響[J];海南醫(yī)學(xué);2013年05期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉力源;;生命節(jié)能與運(yùn)動(dòng)營(yíng)養(yǎng)干預(yù)研究[A];中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)第十屆微量元素營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年

2 鄒貴森;;人人享有衛(wèi)生保健與營(yíng)養(yǎng)干預(yù)[A];營(yíng)養(yǎng)與保健食品研究及科學(xué)進(jìn)展學(xué)術(shù)資料匯編[C];2002年

3 王露;高鍵;唐紅;金鳳妹;陳璇;陳樺;;門診2型糖尿病個(gè)體化營(yíng)養(yǎng)干預(yù)效果影響因素研究[A];中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)第12屆全國(guó)臨床營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2009年

4 李曉輝;李明川;卓秋成;蔣世理;;淺談成都市營(yíng)養(yǎng)干預(yù)工作存在的問(wèn)題及對(duì)策[A];四川省營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)2000年學(xué)術(shù)會(huì)議專題報(bào)告及論文摘要匯編[C];2000年

5 暴書(shū)萍;;對(duì)臨床護(hù)士孕期的營(yíng)養(yǎng)干預(yù)[A];中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)臨床營(yíng)養(yǎng)分會(huì)第十屆全國(guó)學(xué)術(shù)交流論文匯編[C];2005年

6 周喜云;;2型糖尿病認(rèn)知水平與營(yíng)養(yǎng)干預(yù)對(duì)照觀察[A];第11屆中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)全國(guó)臨床營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文（摘要）匯編[C];2007年

7 馬冠生;;運(yùn)用健康促進(jìn)學(xué)校模式開(kāi)展學(xué)生營(yíng)養(yǎng)干預(yù)[A];達(dá)能營(yíng)養(yǎng)中心（中國(guó)）成立五周年[C];2003年

8 蔣世芬;;營(yíng)養(yǎng)干預(yù)策略初探[A];中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)公共營(yíng)養(yǎng)分會(huì)第六屆學(xué)術(shù)研討會(huì)暨中國(guó)居民膳食與營(yíng)養(yǎng)狀況變遷論文集[C];2005年

9 吳少雄;;云南彝族飲酒行為調(diào)查及營(yíng)養(yǎng)干預(yù)研究[A];達(dá)能營(yíng)養(yǎng)中心第十三屆學(xué)術(shù)研討會(huì)“膳食脂肪與健康”論文集[C];2010年

10 羅賢懋;;我國(guó)癌癥營(yíng)養(yǎng)干預(yù)試驗(yàn)研究進(jìn)展[A];中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)營(yíng)養(yǎng)與腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];1990年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 本報(bào)記者 程曉晨;營(yíng)養(yǎng)干預(yù) 健康革命的新時(shí)代[N];中國(guó)改革報(bào);2008年

2 張艷玲;專家呼吁完善學(xué)生營(yíng)養(yǎng)干預(yù)政策[N];中國(guó)食品質(zhì)量報(bào);2009年

3 本報(bào)記者 王薇;防控慢病 營(yíng)養(yǎng)干預(yù)當(dāng)先鋒[N];中國(guó)食品報(bào);2013年

4 王廣金;河北21個(gè)縣進(jìn)行嬰幼兒免費(fèi)營(yíng)養(yǎng)干預(yù)[N];中國(guó)食品質(zhì)量報(bào);2010年

5 記者 葉龍杰;每?jī)和隊(duì)I養(yǎng)干預(yù)成本400元[N];健康報(bào);2011年

6 本報(bào)記者 裴立英;營(yíng)養(yǎng)干預(yù) 三位營(yíng)養(yǎng)專家對(duì)對(duì)碰[N];中國(guó)消費(fèi)者報(bào);2005年

7 翁善鋼;肉雞足墊皮炎的營(yíng)養(yǎng)干預(yù)方案[N];山東科技報(bào);2014年

8 燕慧梅;早期營(yíng)養(yǎng)干預(yù)可減少住院時(shí)間[N];健康報(bào);2008年

9 本報(bào)記者 耿興敏;對(duì)27.4萬(wàn)名嬰幼兒實(shí)施營(yíng)養(yǎng)干預(yù)[N];中國(guó)婦女報(bào);2012年

10 本報(bào)記者 劉艷芳整理;急需進(jìn)行有效的營(yíng)養(yǎng)干預(yù)[N];中國(guó)食品報(bào);2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 林雙;補(bǔ)充雞蛋和牛奶等措施對(duì)貧困農(nóng)村兒童的營(yíng)養(yǎng)干預(yù)評(píng)價(jià)[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2015年

2 劉曉梅;食管癌放化療期間營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)及營(yíng)養(yǎng)參數(shù)的臨床意義[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2016年

3 張穎;腦卒中伴吞咽障礙患者的營(yíng)養(yǎng)狀況評(píng)估及營(yíng)養(yǎng)干預(yù)效果研究[D];山東大學(xué);2016年

4 李春微;第一部分：前瞻性病例對(duì)照研究 妊娠期糖尿病營(yíng)養(yǎng)及相關(guān)生活方式危險(xiǎn)因素分析 第二部分：Meta分析 醫(yī)學(xué)營(yíng)養(yǎng)干預(yù)對(duì)妊娠期糖尿病臨床結(jié)局的影響 第三部分：系統(tǒng)綜述 妊娠期糖尿病營(yíng)養(yǎng)與健康管理研究進(jìn)展[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

5 郭苗苗;基于PG-SGA的個(gè)體化營(yíng)養(yǎng)干預(yù)對(duì)胃癌術(shù)后化療患者生活質(zhì)量的影響[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

6 原曉華;膳食對(duì)妊娠期缺鐵性貧血的影響調(diào)查及個(gè)體化營(yíng)養(yǎng)干預(yù)方案對(duì)妊娠期鐵缺乏的效果研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

7 吳歡;遺傳性肥胖兒童營(yíng)養(yǎng)干預(yù)后腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌的分離鑒定及生理功能的探究[D];上海交通大學(xué);2015年

8 王忠禮;女子柔道運(yùn)動(dòng)員減重期力量、某些生化指標(biāo)變化及營(yíng)養(yǎng)干預(yù)效果研究[D];北京體育大學(xué);2007年

9 李鐵柱;昌平實(shí)驗(yàn)中學(xué)學(xué)生體質(zhì)現(xiàn)狀及運(yùn)動(dòng)營(yíng)養(yǎng)干預(yù)[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2011年

10 張輝;營(yíng)養(yǎng)干預(yù)對(duì)賽艇女運(yùn)動(dòng)員免疫功能及血液生化指標(biāo)的影響[D];武漢體育學(xué)院;2009年

，

本文編號(hào)：559544