本文關(guān)鍵詞：先天性巨結(jié)腸癥中Neuroligin2基因的表達(dá)及相關(guān)血漿GABA臨床意義

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【摘要】：研究背景及研究目的：先天性巨結(jié)腸(Hirschsprung's Disease, HD),是病變腸管神經(jīng)節(jié)細(xì)胞缺如的一種先天性消化道發(fā)育畸形。目前雖然對(duì)HD發(fā)病機(jī)制的基礎(chǔ)性研究很多,如RET、SOX10、EDNRB等,但仍不能解釋所有患兒的發(fā)病機(jī)制。Neuroligin2基因存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central Nervous System, CNS),對(duì)突觸的形成、發(fā)育以及突觸功能循環(huán)具有重要的作用,且腸神經(jīng)系統(tǒng)(Enteric Nervous System, ENS)與CNS是有密切關(guān)聯(lián)的。據(jù)此,本文研究HD患兒各段腸管中Neuroligin2基因的表達(dá)情況,探討Neuroligin2基因表達(dá)與HD發(fā)生的可能關(guān)系。已證實(shí),Neuroligin2基因在CNS表達(dá)于γ-氨基丁酸(Gamma-Aminobutyric Acid, GABA)能神經(jīng)元,且GABA能反應(yīng)Neuroligin2的表達(dá)水平,臨床上對(duì)HD的診斷缺乏血液學(xué)檢查指標(biāo),血漿GABA可能為HD新的診斷方法,本文探索HD患兒血漿GABA表達(dá)水平及對(duì)臨床診斷的意義。實(shí)驗(yàn)方法：選取山東大學(xué)齊魯醫(yī)院小兒外科行手術(shù)治療的52例HD患兒切除病變結(jié)腸及血漿作為研究標(biāo)本,52例腹股溝斜疝(Indirect Inguinal Hernia, ⅡH)患兒的血漿作為研究對(duì)照。應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色、Western blot及實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)方法觀察Neuroligin2在各腸段的表達(dá)情況,應(yīng)用ELISA實(shí)驗(yàn)方法測(cè)量血漿中GABA的表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：Western blotting結(jié)果示Neuroligin2蛋白在狹窄段相對(duì)表達(dá)量為0.012±0.0011,明顯少于移行段和擴(kuò)張段(0.039±0.0014,0.057±0.0018；P0.05)。qRT-PCR結(jié)果顯示Neuroligin2基因的mRNA水平與蛋白表達(dá)趨勢(shì)一致。免疫組織化學(xué)染色示HD患兒擴(kuò)張段腸管的肌間腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中有Neuroligin2強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),而在狹窄段弱陽(yáng)性表達(dá),移行段可見(jiàn)Neuroligin2陽(yáng)性表達(dá)。ELISA示HD患兒血漿GABA水平(23.69±2.30)較對(duì)照組(7.65±1.16)高,統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：Neuroligin2基因在人ENS有表達(dá),HD患兒狹窄段腸管中Neuroligin2的表達(dá)缺失可能與HD的發(fā)生有關(guān)；與Neuroligin2基因相關(guān)的血漿GABA的表達(dá)水平可能成為一種診斷HD新的臨床指標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】：先天性巨結(jié)腸 Neuroligin2基因 實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 血漿γ-氨基丁酸
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R725.7
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 英文縮略詞表10-11
• 第一章 前言11-14
• 第二章 材料與方法14-26
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-27
• 第四章 討論27-31
• 第五章 結(jié)論31-32
• 附表及附圖32-36
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 致謝41-42
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文42-43
• 附件43

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本文編號(hào)：521253