本文關(guān)鍵詞：先天性甲狀腺功能減低癥患兒TRβ及DUOXA1基因突變研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：先天性甲狀腺功能減低癥(CH)是一種最常見的新生兒內(nèi)分泌疾病,主要表現(xiàn)為甲狀腺功能部分或完全喪失導(dǎo)致的生長發(fā)育落后和智力發(fā)育遲緩。大約85%的CH由甲狀腺發(fā)育不全(TD)引起,其余大約15%的CH由甲狀腺激素合成異常導(dǎo)致,且常伴有甲狀腺腫。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了TSHR、TTF2、PAX8、TTF1、NKX2.5等TD致病基因,為了完善TD基因突變庫,本研究在TD患者中進(jìn)一步進(jìn)行基因突變篩查。另外,在甲狀腺激素的合成過程中,H2O2必不可少,而DUOXA1基因與H2O2產(chǎn)生有關(guān),但目前DUOXA1基因突變是否會導(dǎo)致CH還不清楚。因此,為了證明DUOXA1基因突變與CH關(guān)系,本研究同時在伴甲狀腺腫患者中對DUOXA1基因進(jìn)行了突變篩查。本實(shí)驗分為兩部分,第一部分利用外顯子測序技術(shù)對10例TD患者(排除了TSHR、TTF2、PAX8、TTF1、NKX2.5等基因突變)進(jìn)行致病基因篩查。結(jié)果在甲狀腺激素受體β(TRβ)基因第6外顯子區(qū)發(fā)現(xiàn)1個新的錯義突變位點(diǎn)c.107GA(p.C36Y)。經(jīng)Sanger測序驗證后,對來自山東地區(qū)的270例TD患者中進(jìn)行TRβ基因突變篩查。結(jié)果并未發(fā)現(xiàn)基因突變,但在第6、9外顯子區(qū)分別發(fā)現(xiàn)1個SNP位點(diǎn)(rs79220627,c.162GA;rs3752874,c.735CT),推測該基因在TD患者中的突變率很低,可能不是該地區(qū)CH伴TD的主要突變類型。本實(shí)驗第二部分選取山東地區(qū)60例伴甲狀腺腫大CH患兒為研究對象,采用PCR-DNA直接測序法對DUOXA1基因的5-9外顯子進(jìn)行突變篩查。結(jié)果在第6外顯子區(qū)發(fā)現(xiàn)1個新的錯義突變c.166CT(p.R56W),在第7外顯子發(fā)現(xiàn)1個SNP位點(diǎn)(rs75981505,c.398GT)。該突變在山東地區(qū)伴甲狀腺腫大CH患兒中突變率低,可能不是該地區(qū)CH伴甲狀腺腫大的主要突變類型。
【關(guān)鍵詞】：先天性甲狀腺功能減低癥 DUOXA1 TRβ 突變
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R725.8
【目錄】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-8
• 第一章 先天性甲狀腺功能減低癥伴甲狀腺發(fā)育不全患兒TRβ 基因突變研究8-23
• 1.1 研究對象8
• 1.2 材料與設(shè)備8-10
• 1.2.1 主要耗材8
• 1.2.2 主要試劑8-9
• 1.2.3 主要儀器設(shè)備9-10
• 1.2.4 軟件與數(shù)據(jù)庫10
• 1.3 研究方法10-16
• 1.3.1 外顯子測序標(biāo)本篩選10
• 1.3.2 外顯子技術(shù)篩查致病基因10-13
• 1.3.3 生物信息學(xué)分析13
• 1.3.4 Sanger測序驗證13
• 1.3.5 大量病例驗證13-16
• 1.4 實(shí)驗結(jié)果16-21
• 1.4.1 外顯子測序標(biāo)本篩選結(jié)果16
• 1.4.2 外顯子測序結(jié)果16
• 1.4.3 Sanger測序驗證及病例驗證結(jié)果16-19
• 1.4.4 TRβ 蛋白的同源性分析結(jié)果19-20
• 1.4.5 TRβ 突變位點(diǎn)（p.C36Y）對蛋白功能影響預(yù)測結(jié)果20-21
• 1.5 討論21-22
• 1.6 結(jié)論22-23
• 第二章 先天性甲狀腺功能減低癥伴甲狀腺腫大患兒DUOXA1基因突變研究23-31
• 2.1 研究對象23
• 2.2 材料與設(shè)備23-25
• 2.2.1 主要試劑23
• 2.2.2 主要實(shí)驗儀器23-24
• 2.2.3 主要耗材24
• 2.2.4 軟件與數(shù)據(jù)庫24-25
• 2.3 研究方法25-27
• 2.3.1 全血基因組DNA提取25
• 2.3.2 基因組DNA質(zhì)測25
• 2.3.3 PCR擴(kuò)增目的基因25-26
• 2.3.4 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測序26
• 2.3.5 測序結(jié)果及生物信息學(xué)分析26-27
• 2.4 實(shí)驗結(jié)果27-29
• 2.4.1 DUOXA1基因測序結(jié)果27-28
• 2.4.2 DUOXA1蛋白多序列同源性比較28
• 2.4.3 SIFT和PolyPhen2預(yù)測DUOXA1蛋白突變位點(diǎn)28-29
• 2.5 討論29-30
• 2.6 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-35
• 綜述35-53
• 參考文獻(xiàn)45-53
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果53-54
• 致謝54-55

【相似文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 臧紅偉;先天性甲狀腺功能減低癥患兒TRβ及DUOXA1基因突變研究[D];青島大學(xué);2016年

  本文關(guān)鍵詞：先天性甲狀腺功能減低癥患兒TRβ及DUOXA1基因突變研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：433296