發(fā)布時(shí)間：2017-06-03 11:05

  本文關(guān)鍵詞：貴陽(yáng)市500例兒童人偏肺病毒感染特征調(diào)查研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分熒光定量PCR檢測(cè)兒童NPA人偏肺病毒方法的建立目的:觀察比較實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)方法與普通反轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶鏈鎖反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法檢測(cè)人偏肺病毒(human Metapneumovirus,h MPV)的特異性、靈敏性,以建立能準(zhǔn)確定量檢測(cè)兒童深部鼻咽吸取物(nasopharyngeal aspirate,NPA)h MPV感染的分子生物學(xué)檢測(cè)方法。方法:用DNAstar軟件分析h MPV原型株及亞型的基因片段,找出相對(duì)保守的基因位點(diǎn),根據(jù)保守基因位點(diǎn)分別設(shè)計(jì)出針對(duì)h MPV F基因的引物及探針,建立檢測(cè)h MPV F基因的Real-time PCR方法,并同時(shí)根據(jù)引物設(shè)計(jì)原則設(shè)計(jì)RT-PCR的引物,對(duì)兩種方法的特異性、靈敏性、重復(fù)性以及是否實(shí)用于兒童深部鼻咽吸取物h MPV感染的檢測(cè)等指標(biāo)進(jìn)行比較評(píng)價(jià)。結(jié)果:Real-time PCR方法能夠特異性的的檢測(cè)兒童深部鼻咽吸取物h MPV,并且能進(jìn)行定量分析,定量的敏感度可達(dá)到102拷貝,比較Real-time PCR方法與RT-PCR方法,其檢出率分別為16%及9.8%,相對(duì)于Real-time PCR,RT-PCR的靈敏度及特異度分別為31.3%及94.3%。結(jié)論:Real-time PCR檢測(cè)h MPV敏感性明顯高于RT-PCR方法,為臨床開(kāi)展兒童深部鼻咽吸取物h MPV感染的定量檢測(cè)及貴陽(yáng)地區(qū)h MPV感染流行病學(xué)調(diào)查建立了有效的分子生物學(xué)檢測(cè)方法。第二部分貴陽(yáng)市500例兒童人偏肺病毒感染特征調(diào)查研究目的:采用已建立的Real-time PCR方法檢測(cè)貴陽(yáng)地區(qū)兒童急性下呼吸道感染(Acute lower respiratory tract infections,ALRTI)住院患兒人偏肺病毒(human Metapneumovirus,h MPV)感染情況,并對(duì)h MPV感染的流行病學(xué)特點(diǎn)和臨床特征進(jìn)行總結(jié)分析。方法:收集2014年1月~2014年12月全年間500例ALRTI患兒深部鼻咽吸取物(nasopharyngeal aspirate,NPA)和2ml靜脈血標(biāo)本,Real-time PCR方法對(duì)NPA進(jìn)行h MPV F基因檢測(cè),陽(yáng)性標(biāo)本擴(kuò)增產(chǎn)物行核苷酸序列測(cè)定,同時(shí)取NPA進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),并采用間接免疫熒光方法對(duì)血標(biāo)本進(jìn)行7種常見(jiàn)呼吸道病毒病原檢測(cè),收集病例臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:500例NPA標(biāo)本中共檢測(cè)到80例實(shí)時(shí)Real-time PCR陽(yáng)性,陽(yáng)性率16%,陽(yáng)性標(biāo)本測(cè)序結(jié)果與Gene Bank中h MPV同源性達(dá)91%-99%。80例h MPV陽(yáng)性患兒中,感染年齡0~6歲,其中1歲以下感染率最高,6歲以上合并基礎(chǔ)疾病患兒也易受h MPV感染;h MPV流行特點(diǎn)為全年散發(fā),發(fā)病高峰出現(xiàn)在2/3/5/6/12月;h MPV感染后喘息癥狀發(fā)生率較高;h MPV可協(xié)同感染其它呼吸道病原體,當(dāng)h MPV患兒協(xié)同其他病原感染時(shí),部分病例病情較重,可表現(xiàn)為重癥肺炎。結(jié)論:h MPV是貴陽(yáng)地區(qū)兒童患者急性下呼吸道感染的重要的病原體之一。
【關(guān)鍵詞】：熒光定量PCR 普通反轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶鏈鎖反應(yīng) 人偏肺病毒 兒童 急性下呼吸道感染 人偏肺病毒
【學(xué)位授予單位】：貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R725.6
【目錄】：

• 摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 縮略詞表10-11
• 引言11-12
• 第一部分 熒光定量PCR檢測(cè)兒童NPA人偏肺病毒方法的建立12-28
• 前言12-13
• 1.研究對(duì)象13-19
• 2.材料與方法19-23
• 3.討論23-25
• 4.小結(jié)25-26
• 參考文獻(xiàn)26-28
• 第二部分 貴陽(yáng)市500例兒童人偏肺病毒感染特征調(diào)查研究28-48
• 前言28
• 1.材料與方法28-34
• 2.結(jié)果34-41
• 3.討論41-44
• 4.小結(jié)44-45
• 參考文獻(xiàn)45-48
• 綜述48-58
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 作者簡(jiǎn)歷58-59
• 致謝59-60
• 學(xué)位論文集60

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 鄧?yán)^巋;羅宏英;鄭躍杰;袁雄偉;陸學(xué)東;高璐;;深圳地區(qū)80例兒童下呼吸道感染人類偏肺病毒的檢測(cè)[J];廣東醫(yī)學(xué);2006年12期

2 黃見(jiàn)可;葉淦湖;葉博材;楊學(xué)群;劉國(guó)權(quán);朱世根;盧宇德;梁景林;郝金斗;周曉光;;東莞市7歲以下小兒常見(jiàn)呼吸道病毒感染的病原學(xué)研究[J];國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào);2009年20期

3 丁韌;陳勇;楊晉川;潘浩;孔圓圓;王洪霞;;徐州地區(qū)急性呼吸道感染患者中人偏肺病毒的檢測(cè)[J];疾病監(jiān)測(cè);2006年12期

4 向磊;張國(guó)成;李國(guó)權(quán);;急性呼吸道感染住院兒童人偏肺病毒感染的流行情況及臨床特征[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2007年16期

5 梁沫;張兵;黃寒;肖霓光;王濤;鐘禮立;謝志萍;段招軍;;長(zhǎng)沙地區(qū)急性下呼吸道感染兒童呼吸道合胞病毒、偏肺病毒臨床特征及流行狀況分析[J];實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué);2012年07期

6 陳明艷;朱飛;劉愛(ài)玲;邱群芳;;實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)診斷人偏肺病毒檢測(cè)效果分析[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年30期

7 陳昕;張志勇;李榮培;趙耀;劉恩梅;趙曉東;;重慶地區(qū)急性下呼吸道感染住院患兒人偏肺病毒感染的流行病學(xué)研究[J];中國(guó)循證兒科雜志;2010年04期

8 陳俊平;伍嚴(yán)安;;人類偏肺病毒研究概況[J];醫(yī)學(xué)綜述;2009年14期

9 朱汝南;錢淵;趙林清;鄧潔;王芳;孫宇;廖斌;;北京地區(qū)2004—2006年嬰幼兒急性呼吸道感染中人偏肺病毒感染的研究[J];中華流行病學(xué)雜志;2007年07期

  本文關(guān)鍵詞：貴陽(yáng)市500例兒童人偏肺病毒感染特征調(diào)查研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：417963