發(fā)布時(shí)間：2024-12-09 22:58

　　目的:通過(guò)檢測(cè)先天性巨結(jié)腸(Hirschprung's disease,HSCR)組織中長(zhǎng)鏈非編碼RNA-母系表達(dá)基因3(Lnc RNA-MEG3)啟動(dòng)子甲基化情況,并在細(xì)胞模型中對(duì)p53/p21信號(hào)通路進(jìn)行調(diào)控,探討MEG3啟動(dòng)子甲基化對(duì)p53/p21信號(hào)通路的調(diào)控作用在先天性巨結(jié)腸發(fā)病中的機(jī)制。方法:對(duì)診斷明確30例HSCR患兒的狹窄段、吻合段分別采用免疫組織化學(xué)染色(IHC)、熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(q RT-PCR)、免疫蛋白印跡(Western blot)、甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)和直接測(cè)序法檢測(cè)p53基因的表達(dá)和MEG3基因啟動(dòng)子甲基化情況。應(yīng)用MEG3過(guò)表達(dá)和沉默質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SK-N-BE(2)細(xì)胞株,設(shè)立MEG3過(guò)表達(dá)(MEG3-OE)組、MEG3抑制組(MEG3-KD)及空白(NC)組,3組細(xì)胞分別加入甲基化抑制劑氮雜胞苷(5-aza-Cd R),應(yīng)用CCK-8、凋亡實(shí)驗(yàn)觀察3組細(xì)胞增殖、凋亡情況,q RT-PCR、Western blot方法觀察p21的表達(dá)情況。結(jié)果:(1)IHC:p53主要表達(dá)在HSCR腸壁的黏膜下神經(jīng)叢、肌間神經(jīng)叢和腺上皮細(xì)胞的胞核,陽(yáng)性表...

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中英縮略詞對(duì)照表
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 先天性巨結(jié)腸相關(guān)信號(hào)通路研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：4015201