背景:神經(jīng)母細(xì)胞瘤來源于交感神經(jīng)系統(tǒng),是小兒最常見的顱外實(shí)體惡性腫瘤,其發(fā)病率及死亡率均較高,對患兒及其家庭影響很大。高度異質(zhì)性是神經(jīng)母細(xì)胞瘤主要特點(diǎn)之一,臨床上根據(jù)風(fēng)險因素指標(biāo)的不同將神經(jīng)母細(xì)胞瘤劃分為低危組、中危組和高危組。低、中危組患兒預(yù)后較好,但對于高危組患兒而言,即使綜合多種治療方案,其預(yù)后仍不理想,目前針對神經(jīng)母細(xì)胞瘤的治療仍是臨床研究的難點(diǎn)。微管蛋白是中心體和紡錘體的基本結(jié)構(gòu)單位,在細(xì)胞有絲分裂過程中發(fā)揮重要作用。研究表明微管蛋白在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中特異表達(dá),且可作為該腫瘤的特異治療靶點(diǎn)。HAUS5是人類Augmin復(fù)合物的亞基之一,主要參與紡錘體組裝,維持中心體完整以及胞質(zhì)分裂等過程。HAUS5表達(dá)異�？烧T導(dǎo)中心體的微管片段化以及中心體體積的增大,導(dǎo)致染色體錯位以及雙極紡錘體功能缺陷等,而雙極紡錘體的異常又可誘發(fā)腫瘤形成。據(jù)國外研究報道,敲減HAUS5基因可抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞增殖以及腫瘤形成能力。綜上,HAUS5有可能對神經(jīng)母細(xì)胞瘤的發(fā)生、發(fā)展起作用,然而目前國內(nèi)外對HAUS5在神經(jīng)母細(xì)胞瘤組織中表達(dá)狀況,及其在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中的作用影響等方面研究尚不足。目的:本研... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１?ＨＡＵＳ５在ＮＢ腫瘤組織中免疫組化染色結(jié)果（２０〇ｘ），圖Ａ為高表達(dá)，??染色陽性率為８０％，總評分為８分；圖Ｂ為低表達(dá)，染色陽性申．為１０％，總評??

?＾???２?ＲＴ－ｑＰＣＲ檢測不同ＮＢ細(xì)胞中ＨＡＵＳ５表達(dá)結(jié)果??以ＧＡＰＤＨ作為內(nèi)參基因，以ＡＣｔ值反應(yīng)目的基因表達(dá)豐度高低（ＡＣｔ＝目??的基因Ｃｔ值－內(nèi)參基因Ｃｔ值）。測得ＡＣｔ值￡１２表示該細(xì)胞中基因表達(dá)豐度高；??１２＜ＡＣｔ值＜１６表示基因表達(dá)豐度為中；ＡＱ值２１６表示基因表達(dá)豐度低。本實(shí)驗(yàn)??ＲＴ－ｑＰＣＲ檢測ＳＨ－ＳＹ５Ｙ、ＳＫ－Ｎ－ＡＳ兩組細(xì)胞中ＨＡＵＳ５基因表達(dá)結(jié)果如下（表??２．１）?〇??表?２．１?ＲＴ－ｑＰＣＲ?檢測?ＳＨ－ＳＹ５Ｙ、ＳＫ－Ｎ－ＡＳ?兩組細(xì)胞?ＨＡＵＳ５?基因?Ａ?Ｃｔ?值??細(xì)胞名稱?ＧＡＰＤＨＣｔ值?ＨＡＵＳ５Ｃｔ值?ＡＣｔ?ＡＣｔ均值??ＳＨ－ＳＹ５Ｙ?１４．４６?２４．４８?１０．０２?１０．０５??１４．４９?２４．４９?１０??１４．４３?２４．５５?１０．１２??ＳＫ－Ｎ－ＡＳ?１２．９９?２２．５３?９．５４?９．５７??１２．８５?２２．４８?９．６３???１１９?２２．４３?＾５３???以ＧＡｒｏＨ為內(nèi)參的ＲＴ－ｑＰＣＲ檢測結(jié)果可以看出，ＨＡＵＳ５基因在ＳＨ－ＳＹ５Ｙ、??ＳＫ－Ｎ－ＡＳ兩組細(xì)胞中的表達(dá)豐度均高（圖２．１）。??１２．０??ｆ８．°．?■?■??０．０??■■■■?＾???ＳＨ－ＳＹ５Ｙ?ＳＫ－Ｎ－ＡＳ??圖２．１?ＲＴ－ｑＰＣＲ技術(shù)檢測ＳＨ－ＳＹ５Ｙ、ＳＫ－Ｎ－ＡＳ兩種ＮＢ細(xì)胞中ＨＡＵＳ５基因??表達(dá)豐度??２２??

Ｓ細(xì)胞中ＨＡＵＳ５??基Ｗ在ｍＲＮＡ水平的農(nóng)達(dá)量較ｓｈＣｔｒｌ組明顯受到抑制［相對衣達(dá)倍數(shù)??（０．３１８±０．０３８）?ｖｓ?（?１．０２０±０．２５３），尸＝０．０３８］，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（如圖?３．１）。??ＲＴ－ｑＰＣ’Ｒ檢測結(jié)汜敲減效率達(dá)到６８．２％，說明ｓｈＲＮＡ慢病毒感染ＮＢ細(xì)胞成功，??ＨＡＵＳ５基因敲減成功。??１?４００??Ｉ?Ｉ??？?１．２００??３?１?ＯＯＯ??ｚ?＆?｜Ｈ｜｜｜｜??＾?＾?０?８００??ｓｈＣｔｒｌ?ｓｈＨＡＵＳＳ??圖３＿?１敲減ＨＡＵＳ５基因后ｓｈＨＡＵＳ５組和ｓｈＣｔｒｌ組細(xì)胞中ｍＲＮＡ水平表達(dá)??中．度比較，＊表不？廠＜?（）．〇５??４?Ｃｅ?Ｉ?ｉ?ｇｏ細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測結(jié)果??Ｃｅｌｉｇｏ細(xì)胞成像分析儀器４讀取被病海感染后帶熒光的細(xì)胞并進(jìn)行細(xì)胞??計(jì)數(shù)，實(shí)驗(yàn)中所繪的細(xì)胞增殖曲線圖和增殖倍數(shù)的生長曲線圖均可反應(yīng)細(xì)胞的??生！？＜：增殖狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)中檢測結(jié)果為，在第４天和第５天ｓｌｉ丨ＩＡＵＳ５組較ｓｈＣｔｒｌ??組的細(xì)胞數(shù)量比較分別為［ｄａｙ４?（２２４１?士?１８８）?ｖｓ?（４４７２?±３９７）?，?Ｚ５＜０．０５〕，［ｄａｙ５??（２４２７±１３１）?ｖｓ?（５４６７?±３９５），尸〈０．?Ｏｆ；］。在第?４?大和第［；天?ｓｈＨＡＵＳ５?組較??ｓｈＣｔｄ組細(xì)胞數(shù)量的變化倍數(shù)比較分別為［ｄａｙ４?（１．１４±０．０２）?ｖｓ?（１．６８±０．０６），??Ｐ＜０．０５］，?［ｄａｙ５?（?１．２４±０＿０３）?ｖｓ?（２．０６±０．０３），尸?＜０．０５］。結(jié)果提示?ｓｈＨＡＵＳ５??２３??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3572415