新生兒溶血病發(fā)病風險因素分析及相關(guān)檢測實驗條件驗證
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【摘要】:目的通過文獻分析,獲得可能導致新生兒溶血病(heamolytic disease of the newborn HDN)發(fā)病的相關(guān)危險因素;結(jié)合臨床實際,針對HDN實驗室診斷檢測中最常見的且尚有爭議的問題——IgM抗體存在可影響IgG抗體效價準確檢測,研究適合臨床HDN實驗室診斷的IgG抗體效價準確檢測的實驗條件。方法1.采用新生兒溶血病相關(guān)檢索詞檢索中文及英文醫(yī)學數(shù)據(jù)庫。通過閱讀文獻題目和摘要篩選出關(guān)于新生兒溶血病發(fā)病危險因素的文獻,篩查可能與HDN發(fā)病相關(guān)的危險因素。2.用人源血漿及單克隆IgG和單克隆IgM抗D標準試劑血清配置4組不同效價配比的模擬血漿,效價分布分別為:128+512、128+128、128+32和128+8(IgG+IgM)。用等體積2-Me與模擬血漿混合,在室溫和37℃兩種條件孵育30min破壞IgM抗體,分別用鹽水血凝法和微柱凝膠抗人球蛋白法檢測模擬血漿破壞前后IgM和IgG抗體效價。3.用等體積2-Me分別在室溫和37℃孵育30min破壞孕婦血漿內(nèi)IgM抗體,并分別用鹽水血凝法和微柱凝膠抗人球蛋白法檢測血清破壞前后IgM和IgG抗體效價。4.應用免疫蛋白電泳對待檢血清進行IgM和IgG免疫球蛋白定性檢測,通過免疫蛋白定量檢測2-Me破壞IgM抗體前后IgG和IgM的變化水平,評估2-Me對IgM抗體的處理效果及對IgG抗體效價的影響。結(jié)果1.母親年齡、母嬰血型不合、不規(guī)則抗體、IgG抗體效價、懷孕次數(shù)、流產(chǎn)史、死胎史、輸血史等均有報道與新生兒溶血病發(fā)病相關(guān)。2.模擬血漿的4組標本用2-Me在室溫和37℃兩種不同條件破壞IgM抗體的效果無統(tǒng)計學差異(p0.05);當IgM≤gG抗體效價時,IgG抗體效價不受IgM干擾,檢測結(jié)果與已知結(jié)果一致;當IgMIgG抗體效價時,IgM可掩蓋IgG抗體效價結(jié)果,導致IgG效價檢測結(jié)果偏高。破壞前檢測IgG效價為128,IgM效價不同的3組標本IgG抗體效價分數(shù)與IgM效價成正相關(guān),破壞后4組IgG抗體效價分數(shù)差異無統(tǒng)計學意義。3.人源血清標本破壞后IgM抗體效價顯著降低(P0.05);IgM抗體破壞前、室溫破壞后、37℃破壞后IgG抗體效價檢測結(jié)果無統(tǒng)計學差異(p0.05):室溫和370C兩種條件破壞IgM抗體后,IgG抗體效價分數(shù)無顯著性差異(p0.05),均較破壞前降低(p0.05)。4.定量分析結(jié)果表明,2-Me破壞前后模擬血漿和患者標本IgM抗體定量結(jié)果均有增高(p0.05);破壞前后應用免疫電泳定性檢測IgG和IgM條帶均會出現(xiàn)。結(jié)論1.母親年齡、母嬰血型不合、不規(guī)則抗體、抗體效價、懷孕次數(shù)、流產(chǎn)史、死胎史、輸血史等可能為HDN發(fā)病危險因素。2.當患者血清IgM≤IgG效價時,IgM不會影響IgG抗體效價檢測準確性;颊哐鍍(nèi)IgM抗體經(jīng)2-Me室溫破壞30min后可達到應用微柱凝膠法檢測IgG抗體效價的實驗要求。
【關(guān)鍵詞】:新生兒溶血病 危險因素 抗體效價 IgM抗體 IgG抗體
【學位授予單位】:中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R722.1;R446.6
【目錄】:
- 中英文縮略詞表6-7
- 中文摘要7-9
- 英文摘要9-11
- 前言11-13
- 第一部分 新生兒溶血病發(fā)病相關(guān)危險因素分析13-19
- 1. 方法13-14
- 2. 結(jié)果14-17
- 3. 討論17-19
- 第二部分 新生兒溶血病相關(guān)檢測實驗條件驗證19-34
- 第一節(jié) 應用模擬血漿探討IgM對IgG抗體效價影響研究21-27
- 1. 材料21
- 2. 方法21-23
- 3. 結(jié)果23-24
- 4. 討論24-27
- 第二節(jié) IgM對IgG抗體效價檢測影響的臨床驗證27-31
- 1. 材料27
- 2. 方法27-28
- 3. 結(jié)果28-30
- 4. 討論30-31
- 第三節(jié) 2-Me破壞前后IgM和IgG抗體定性及定量研究31-34
- 1. 材料31
- 2. 方法31-32
- 3. 結(jié)果32-33
- 4. 討論33-34
- 參考文獻34-41
- 綜述41-48
- 參考文獻46-48
- 攻讀學位期間發(fā)表文章48-49
- 論文發(fā)表48
- 獲得獎勵48-49
- 致謝49
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7 賈Z
本文編號:356387
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