目的:新生兒呼吸窘迫綜合征（neonatal respiratory distress syndrome,NRDS）是新生兒重癥監(jiān)護病房常見疾病。細胞凋亡參與NRDS肺損傷機制。CD80基因于外界刺激后可在非骨髓來源的細胞中表達,參與致病機制。長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA,Lnc RNA）轉移相關肺腺癌轉錄本1（metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1）與脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）誘導的炎癥有關,參與基因轉錄調控。在本研究中,我們擬明確MALAT1是否參與CD80調控及肺細胞凋亡過程及其潛在機制,為NRDS機制研究和精準治療奠定基礎。方法:（1）實時熒光定量PCR技術檢測NRDS患兒外周血單個核細胞及LPS誘導后的細胞系CD80 m RNA、MALAT1 RNA表達水平;敲低MALAT1,觀察CD80 m RNA、蛋白表達水平及轉錄活性的改變。（2）生物信息學預測、定點堿基突變及染色質免疫沉淀技術尋找LPS誘導后CD80啟動子潛在的轉錄因子。RNA... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

CD80mRNA在LPS10ng/ml刺激12h后的A549細胞中表達上調

A 在 LPS 10ng/ml 刺激 12 h 后的 A549 細胞中劑量 LPS（10ng / ml）刺激 12h 后，CD80 m，在 LPS 刺激后 24 h 后降低；并且在 LPS 刺激D80 mRNA 水平亦上調（*p <0.05），但趨勢較在 HeLa 細胞中沒有觀察到明顯變化（p> 0.0種細胞系 PBS 陰性處理對照組比較。）

與陰性對照相比，敲低LncRNA MALAT1后，促進了LPS誘導的CD80 mRNA 及蛋白水平的上調。圖4. 驗證MALAT1敲低效率。 通過RT-qPCR測定法檢測轉染不同濃度的siMALAT1（10nM，50nM，100nM）后，MALAT1在A549細胞中的表達水平。（**p<0.01，與相同處理條件陰性對照比較。）


本文編號：3432901