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微滴式數(shù)字PCR定量分析新生兒的腸道菌群

發(fā)布時(shí)間:2021-09-29 23:02
  目的:研究表明新生兒出生時(shí)已攜帶大量細(xì)菌,而分娩方式是影響其早期腸道菌群建立的重要因素。目前多數(shù)研究只分析了不同分娩方式對(duì)新生兒腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響,而對(duì)新生兒腸道菌群的定量研究較少,且沒有關(guān)于產(chǎn)婦生育年齡與新生兒腸道菌群的關(guān)聯(lián)性研究。方法:采集14份新生兒胎便樣品,利用微滴式數(shù)字PCR技術(shù)對(duì)胎便中的細(xì)菌總數(shù)以及核心菌群的腸桿菌科、乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、擬桿菌屬、梭菌屬、普氏菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬和大腸桿菌進(jìn)行定量研究。結(jié)果:不同分娩方式對(duì)新生兒腸道細(xì)菌總數(shù)存在顯著性差異(P<0.05),其中自然分娩新生兒腸道中腸桿菌科和乳桿菌屬的絕對(duì)含量均顯著高于剖腹產(chǎn)新生兒(P<0.05)。此外,高齡產(chǎn)婦所生新生兒腸道中鏈球菌屬的絕對(duì)含量顯著高于適齡產(chǎn)婦所生新生兒(P<0.05)。結(jié)論:產(chǎn)婦的分娩方式和生育年齡可能影響母嬰菌群的傳遞。本研究采用的微滴式數(shù)字PCR技術(shù)具有高靈敏度,可用于新生兒腸道菌群的定量檢測。 

【文章來源】:中國食品學(xué)報(bào). 2020,20(07)北大核心EICSCD

【文章頁數(shù)】:8 頁

【部分圖文】:

微滴式數(shù)字PCR定量分析新生兒的腸道菌群


不同生育年齡產(chǎn)婦所生新生兒腸道菌群的絕對(duì)含量

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本研究對(duì)14名足月新生兒胎便中的細(xì)菌總數(shù)進(jìn)行定量研究,發(fā)現(xiàn)所有新生兒胎便中均存在細(xì)菌,不同分娩方式新生兒胎便中的細(xì)菌總數(shù)定量結(jié)果如圖1所示,自然分娩和剖腹產(chǎn)新生兒每克胎便中的16S rRNA基因拷貝數(shù)取對(duì)數(shù)后分別為:5.49±0.20和5.23±0.14,不同分娩方式新生兒腸道總菌的絕對(duì)含量存在顯著差異,且自然分娩新生兒腸道總菌的含量顯著高于剖腹產(chǎn)新生兒(P<0.05)。2016年,Rocio等[18]利用DAPI染色法對(duì)143名不同分娩方式新生兒胎便中的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù),結(jié)果同樣發(fā)現(xiàn)自然分娩嬰兒胎便中的細(xì)菌總數(shù)顯著高于剖腹產(chǎn)嬰兒。Huurre等[19]利用熒光原位雜交技術(shù)研究嬰兒腸道微生物,結(jié)果發(fā)現(xiàn)1月齡自然分娩嬰兒腸道細(xì)菌的細(xì)胞總數(shù)平均值為9.9×109細(xì)胞/g,而剖腹產(chǎn)嬰兒腸道細(xì)菌的細(xì)胞總數(shù)平均值僅為3.1×109細(xì)胞/g,自然分娩嬰兒腸道總菌的數(shù)量同樣顯著高于剖腹產(chǎn)嬰兒;此外還發(fā)現(xiàn)自然分娩嬰兒外周血中的免疫球蛋白IgA、IgG和IgM分泌細(xì)胞總數(shù)顯著低于剖腹產(chǎn)嬰兒,而這種抗體分泌細(xì)胞總數(shù)的差異可能是由于抗原過度暴露于脆弱的腸道中導(dǎo)致。事實(shí)上,共生菌與腸上皮組織相互作用形成黏膜屏障,在保護(hù)腸道免受損傷方面起主要作用。在正常平衡狀態(tài)下,共生菌和病原體被特異性toll樣受體識(shí)別,并且共生菌和病原體在隨后的非炎癥和炎癥免疫反應(yīng)之間存在差異。如果這種平衡被打破,那么腸上皮細(xì)胞可能以更快的速度增殖,使腸道防御屏障容易受到抗原的侵襲,這種抗原早期主要來源于食物和細(xì)菌[20]。因此,不同分娩方式可能通過影響嬰兒腸道菌群的發(fā)育,從而對(duì)嬰兒免疫功能產(chǎn)生影響。為進(jìn)一步具體分析是哪種細(xì)菌使得不同分娩方式新生兒腸道菌群含量的顯著差異,本試驗(yàn)利用染料法對(duì)腸道核心菌群腸桿菌科、乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、擬桿菌屬、梭菌屬、普氏菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬進(jìn)行定量研究。此外,鑒于在新生兒期,定殖在腸道中的大腸桿菌是新生兒感染的主要來源,因此本研究還利用探針法對(duì)大腸桿菌進(jìn)行了定量研究。

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不同生育年齡產(chǎn)婦所生新生兒胎便中的細(xì)菌定量結(jié)果如圖3所示:適齡產(chǎn)婦和高齡產(chǎn)婦所生新生兒每克胎便中的16S rRNA基因拷貝數(shù)取對(duì)數(shù)后分別為5.40±0.22和5.25±0.15。其它腸道核心菌群的定量結(jié)果如下:腸桿菌科為3.40±0.26和3.45±0.22;乳桿菌屬為:3.59±0.42和3.40±0.08;雙歧桿菌屬為:3.74±0.42和3.73±0.38;擬桿菌屬為:3.73±0.42和3.73±0.38;梭菌屬為:2.93±1.03和3.54±0.93;普氏菌屬為:4.09±0.44和4.81±0.73;鏈球菌屬為:2.57±0.89和3.15±0.49;乳球菌屬為:3.74±0.25和3.94±0.19;腸球菌屬為:1.75±1.40和1.49±2.58;大腸桿菌為:3.17±0.25和3.23±0.32。圖3 不同生育年齡產(chǎn)婦所生新生兒腸道菌群的絕對(duì)含量

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]妊娠期B族鏈球菌感染現(xiàn)狀及對(duì)母兒結(jié)局的影響[J]. 楊夢(mèng)楠,花曉琳,金敏菲,周赟,顧盛奕,牟正騫,沈華祥.  現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展. 2019(03)
[2]基于性別二分類的青海天峻藏民腸道菌群差異分析[J]. 謝丹,張沐詩,陳春,烏恩奇,趙煥虎,李樹春.  中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2018(12)
[3]不同分娩方式和喂養(yǎng)方式下嬰兒腸道菌群的分布特征[J]. 劉譽(yù),秦勝堂,馬京梅,宋依臨,馮燁,劉飛,楊慧霞.  中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志. 2018 (07)
[4]維持性血液透析終末期腎病患者腸道優(yōu)勢(shì)菌群多樣性變化研究[J]. 金曉倩.  中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2015(05)

博士論文
[1]初生嬰兒腸道菌群與母體各部位菌群相關(guān)性研究[D]. 席曉霞.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]不同分娩方式嬰兒腸道菌群對(duì)比分析[D]. 郭賀.中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院 2014



本文編號(hào):3414637

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