本文關(guān)鍵詞：體內(nèi)探討維生素A對(duì)結(jié)腸上皮屏障功能的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分 正常維生素A營養(yǎng)水平促進(jìn)結(jié)腸上皮屏障功能目的體內(nèi)探討維生素A(VA)對(duì)結(jié)腸上皮粘膜屏障功能的影響。方法建立孕期開始的VA正常(VAN)、VA缺乏(VAD)大鼠模型,并給予VAD生后1天新生大鼠VA補(bǔ)充(VAS)。利用高效液相色譜儀(HPLC)檢測(cè)血清中視黃醇水平,Ussing chamber系統(tǒng)檢測(cè)大鼠結(jié)腸上皮粘膜跨上皮電阻(TER)的變化,ELISA試劑盒測(cè)定大鼠血清二胺氧化酶(DAO)濃度,Real-time PCR和Western blot技術(shù)檢測(cè)大鼠結(jié)腸上皮粘膜組織中RARp、TLR4和ZO-2 mRNA和蛋白的表達(dá)水平變化。結(jié)果VAD組大鼠血清視黃醇水平顯著低于VAN組(P0.001);VAN組大鼠結(jié)腸上皮粘膜層的腸上皮電阻明顯高于VAD組(P0.001),血清DAO水平較VAD組顯著降低(P0.001),提示孕期開始的VA缺乏可能會(huì)導(dǎo)致生后仔鼠腸道屏障功能下降。而對(duì)VAD生后1天新生鼠給予VA干預(yù)后,發(fā)現(xiàn)大鼠血清視黃醇濃度較VAD組顯著提高(P0.001),與VAN組沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。VAS組結(jié)腸跨上皮電阻也明顯高于VAD組(P0.01),血清DAO水平顯著降低(P0.001),但均未達(dá)到VAN大鼠正常水平,表明VA補(bǔ)充可有效提高血清視黃醇水平,改善腸道屏障功能。Real-time PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,VAD組大鼠結(jié)腸上皮粘膜層中的RARβ、TLR4和ZO-2的mRNA表達(dá)水平均較VAN組顯著降低(P0.05,P0.001),而VAS組中上述三種基因的表達(dá)水平均較VAD組明顯增高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.001,P0.01). VAN組中的RARβ和TLR4蛋白表達(dá)水平均明顯高于VAD組,但VAS組的上述兩種蛋白表達(dá)水平雖較VAD組有上升趨勢(shì),卻不能完全恢復(fù)到VAN組的蛋白水平。結(jié)論孕期開始的VA缺乏可導(dǎo)致生后仔鼠結(jié)腸屏障功能下降,并與結(jié)腸上皮中RARp信號(hào)、TLR4和緊密連接蛋白ZO-2密切相關(guān)。第二部分孕期開始的VA缺乏降低仔鼠結(jié)腸上皮屏障功能目的：探討LPS感染對(duì)孕期開始的VA缺乏(VAD)的仔鼠結(jié)腸上皮屏障功能的影響。方法：給予6周齡的VAN和VAD仔鼠脂多糖(LPS)灌胃誘導(dǎo)腸道感染。高效液相色譜儀(HPLC)檢測(cè)血清中的視黃醇濃度；ELISA試劑盒檢測(cè)大鼠血清二胺氧化酶(DAO)濃度；采用Real-time PCR和western blot技術(shù),從蛋白和mRNA水平測(cè)定RA受體(RARβ)、Toll樣受體4和緊密連接蛋白ZO-2的表達(dá)變化。結(jié)果：1.VAD組仔鼠血清視黃醇水平較VAN組明顯降低,LPS感染VAN組后血清視黃醇水平下降明顯,但影響血清視黃醇水平的主要因素是VA營養(yǎng)水平(P0.0001)。2.雙因素分析發(fā)現(xiàn)VA水平與LPS感染均是血清DAO水平的影響因素(P=0.0463和P0.0001),但LPS是引起DAO濃度升高的主要影響因素(P0.0001)。3.VAD大鼠結(jié)腸粘膜組織的RARβ、TLR4和ZO-2 mRNA和蛋白表達(dá)水平均較VAN組有顯著性地降低。LPS感染可明顯下調(diào)VAN組結(jié)腸粘膜層中RARβmRNA表達(dá)水平(P0.05),其表達(dá)受到VA水平及LPS感染交互作用的影響。而通過雙因素分析發(fā)現(xiàn),LPS感染是大鼠結(jié)腸粘膜組織中TLR4表達(dá)的主要影響因素,VA營養(yǎng)水平是ZO-2表達(dá)的關(guān)鍵影響因子。結(jié)論：孕期開始的VA缺乏降低TLR4表達(dá)水平,減弱仔鼠腸道免疫調(diào)節(jié)能力；下調(diào)ZO-2表達(dá)水平,影響結(jié)腸上皮緊密連接,使腸道屏障功能減弱,從而影響腸道的抗感染能力。
【關(guān)鍵詞】：維生素A 結(jié)腸上皮 屏障功能 RARβ toll樣受體4 緊密連接蛋白ZO-2 維生素A缺乏 結(jié)腸上皮屏障功能 LPS感染 RARβ Toll樣受體4 緊密連接蛋白ZO-2
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R725.7
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對(duì)照5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-14
• 前言14-18
• 參考文獻(xiàn)16-18
• 第一部分 正常維生素A營養(yǎng)水平促進(jìn)結(jié)腸上皮屏障功能18-38
• 1. 材料與方法18-27
• 2. 結(jié)果27-32
• 3. 討論32-34
• 4. 小結(jié)34-35
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 第二部分 孕期開始的VA缺乏降低仔鼠結(jié)腸上皮屏障功能38-50
• 1. 材料與方法38-39
• 2. 結(jié)果39-45
• 3. 討論45-47
• 4. 小結(jié)47-48
• 參考文獻(xiàn)48-50
• 全文總結(jié)50-51
• 文獻(xiàn)綜述51-62
• 參考文獻(xiàn)56-62
• 致謝62-63
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及參加的學(xué)術(shù)交流63

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 林芳珊;;人體八大屏障功能趣談[J];健康生活;2007年06期

2

本文編號(hào)：338309