目的:使用RNA干擾技術(shù)抑制miR-155,探討miR-155對(duì)膿毒癥小鼠JAK/STAT信號(hào)通路的影響,明確miR-155是否可通過(guò)調(diào)節(jié)SOCS1而影響JAK/STAT通路減輕膿毒癥小鼠炎癥因子水平及機(jī)制。方法:采用腹腔注射內(nèi)毒素法向3-5周齡健康雄性BALB/c小鼠注射內(nèi)毒素建立膿毒癥小鼠模型,應(yīng)用miR-155抑制物尾靜脈注射進(jìn)行干預(yù)。各組在建模后6,12,24,48小時(shí)留取肝臟組織標(biāo)本,HE染色觀察肝組織病理變化;實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)miR-155表達(dá)水平,以及STAT1mRNA,SOCS1mRNA的表達(dá)水平,ELISA法檢測(cè)肝組織TNF-α和IL-10蛋白的表達(dá)。結(jié)果:LPS組及LPS+mi R-155抑制組小鼠肝臟miR-155與對(duì)照組比較水平升高,隨病情呈動(dòng)態(tài)變化,LPS+miR-155抑制組miR-155水平較LPS組下降（P<0.05）。光學(xué)顯微鏡觀察:LPS組小鼠肝組織病理?yè)p傷出現(xiàn)早,損傷程度重,LPS+miR-155抑制組病理?yè)p傷程度有減輕。LPS組及LPS+miR-155抑制組肝組織TNF-α,IL-10水平較對(duì)照組升高（P<0.05）,LPS+... 

【文章來(lái)源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

實(shí)驗(yàn)流程圖

的兩倍以上，說(shuō)明RNA的完整性好。凝膠電泳圖3.2.2 熔解曲線和擴(kuò)增曲線分析3.2.2.1 熔解曲線分析本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示各PCR產(chǎn)物熔解曲線呈銳利單峰，說(shuō)明PCR擴(kuò)增屬特異性擴(kuò)增，無(wú)引物二聚體及非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)，所獲結(jié)果可靠。擴(kuò)增產(chǎn)物熔解曲線Real-Time PCR melting curves3.2.2.2 擴(kuò)增曲線分析擴(kuò)增曲線呈典型的S型。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微小RNA在膿毒癥發(fā)病機(jī)制的作用研究進(jìn)展[J]. 呂鑫,張育才.  中華實(shí)用兒科臨床雜志. 2014 (18)



本文編號(hào)：3303949