結(jié)腸癌是一個重要的世界性的公共衛(wèi)生問題,新的腫瘤生物標志物將有助于提高結(jié)腸癌病人在疾病的早期發(fā)現(xiàn)、預后或監(jiān)視。本研究主要是評估結(jié)腸癌患者組織的糖蛋白質(zhì)譜,以期發(fā)現(xiàn)潛在的糖蛋白生物標志物。我們首先使用凝集素芯片比較結(jié)腸癌組織和對應的正常組織蛋白之間糖鏈表達譜。結(jié)果表明與正常組織相比,結(jié)腸癌組織中有著廣泛的糖基化的表達,并且糖基化的強度較高。為了驗證芯片的結(jié)果,我們使用了凝集素組織化學的方法。我們的結(jié)果發(fā)現(xiàn)馬鈴薯凝集素（STL）所結(jié)合的N-乙酰氨基葡萄糖（GlcNAc）的水平在結(jié)腸癌中升高,這與凝集素芯片的結(jié)果一致。為了進一步探究N-乙酰氨基葡萄糖所結(jié)合的糖蛋白究竟是何種,我們首先使用凝集素親和的方法,利用磁珠為載體分離富集能與凝集素STL特異性結(jié)合的糖蛋白/糖肽,洗脫后用于液相色譜和質(zhì)譜進行蛋白的分析和鑒定。通過蛋白質(zhì)組學定量分析,我們確定了72個具有高可信度的蛋白質(zhì)。這些蛋白質(zhì)當中,有17個特異性的在結(jié)腸癌組織中檢測到,14個蛋白在腫瘤組織中顯著上調(diào)。隨后,我們選取兩個僅在癌組織中表達或在癌組織中上調(diào)的蛋白進行進一步的驗證,它們分別為Annexin A1和HSP90β。首先我們通過免疫... 

【文章來源】：南開大學天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 結(jié)腸癌候選糖蛋白生物標志物的鑒定及驗證
    第一節(jié) 前言
        1.1.1 糖蛋白的研究現(xiàn)狀
        1.1.2 糖蛋白質(zhì)組研究技術(shù)
        1.1.3 糖蛋白組的應用
    第二節(jié) 技術(shù)路線
    第三節(jié) 實驗材料與方法
        1.3.1 實驗材料
        1.3.2 實驗方法
    第四節(jié) 實驗結(jié)果
        1.4.1 凝集素芯片比較結(jié)腸癌組織與癌旁對照間的糖鏈差異
        1.4.2 凝集素組織化學驗證
        1.4.3 STL富集蛋白的鑒定以及相對定量
        1.4.4 凝集素印跡驗證
        1.4.5 Western blot驗證Annexin A1和HSP90β在結(jié)腸癌組織中的表達
        1.4.6 免疫組化驗證Annexin A1和HSP90β在結(jié)腸癌組織中的表達
    第五節(jié) 討論
        1.5.1 結(jié)腸癌研究的現(xiàn)狀
        1.5.2 結(jié)腸癌的診斷與治療
        1.5.3 糖基化與腫瘤
        1.5.4 糖基化研究手段
        1.5.5 糖蛋白的鑒定及驗證
    第六節(jié) 結(jié)論
第二章 新型娃兒藤堿衍生物NK-007在腸炎模型中的作用及機制探討
    第一節(jié) 引言
    第二節(jié) 材料與方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 實驗方法
    第三節(jié) 實驗結(jié)果
        2.3.1 NK-007在DSS誘導的急性腸炎中的治療作用
        2.3.2 NK-007緩解慢性腸炎的加重
        2.3.3 NK-007可緩解由醋酸誘導的大鼠腸炎
        2.3.4 MK-007可抑制BMDC中細胞因子的產(chǎn)生
        2.3.5 NK-007抑制腸炎的作用可能是通過抑制磷酸化P65的產(chǎn)生來實現(xiàn)的
    第四節(jié) 討論
參考文獻
致謝
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本文編號：3300066