目的:本實驗旨在研究染色質重構復合物核心催化亞基（Brg1）對哮喘小鼠氣道黏液高分泌的影響及探討其可能作用機制。方法:將6⁸周齡SPF級雌性野生型C57bl/6小鼠和Brg1^-/-小鼠（AEC2s上特異性條件敲低Brg1的C57bl/6小鼠）隨機分為四組:Control（正常對照組）、Asthma（哮喘組）、Brg1^-/-（Brg1敲低對照組）和Brg1^-/-+Asthma（Brg1敲低后構建哮喘模型組）,每組10只。Asthma組和Brg1^-/-+Asthma組用雞卵清蛋白OVA制備過敏性哮喘模型,對照組用生理鹽水代替。于最后一次霧化后24h內收取建模標本。PAS染色檢測各組小鼠氣道杯狀細胞的增生情況和黏液分泌量;ELISA檢測小鼠支氣管肺泡灌洗液中黏蛋白MUC5AC和細胞因子IL-13水平;熒光定量PCR檢測肺組織勻漿黏蛋白MUC5AC水平;免疫組化檢測各組小鼠氣道黏蛋白MUC5AC和STAT6的表達和定量;Western blot檢測各組小鼠肺組織中STAT6、p-STA... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數】：44 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組小鼠肺組織PAS染色Fig.1PASstainingofeachgroup（A為各組小鼠肺組織PAS染色，B為其統計結果，*P<0.01與Control組比較，#P<0.01與Asthma組比較）

圖 2 各組小鼠 BALF 上清液中 MUC5AC、IL-13 含量Fig.2 Expression of MUC5AC and IL-13 in BALF of each group（A 為 BALF 中 MUC5AC 表達統計，B 為 BALF 中 IL-13 表達統計，*P<0.01 與 Control 組比較，#P<0.01 與 Asthma 組比較）2.3 各組小鼠氣道上皮黏蛋白 MUC5AC 表達情況MUC5AC 免疫組化染色的陽性信號為氣道上皮細胞的細胞質和細胞膜顯示出黃色或黃棕色顆粒。與 Control 組（12.29±3.336）比較，免疫組化染色顯示 Asthma組（44.62±11.76）氣道上皮細胞中 MUC5AC 高表達（P<0.01），而 Brg1-/-+Asthma組（22.71±3.510）氣道上皮細胞中 MUC5AC 較 Asthma 組表達顯著減少，差異具有統計學意義（P<0.01）。（A）Control Asthma（B）

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文圖 3 各組小鼠氣道上皮黏蛋白 MUC5AC 表達情況（200×）Fig.3 Expression of mucin MUC5AC in each group(magnification: ×200).（A為MUC5AC免疫組化染色，B為其統計結果，*P<0.01 與Control組比較，#P<0.01 與組比較）2.4 各組小鼠肺組織 MUC5AC mRNA 表達情況通過 q-PCR 檢測黏蛋白 MUC5AC mRNA 的表達發(fā)現：Asthma 組小鼠中黏蛋白 MUC5AC mRNA 與 Control 組比較，表達明顯增高，差異具有統義( P<0.01) 。與 Asthma 組比較，Brg1-/-+Asthma 組 MUC5AC mRNA 表降低，差異有統計學意義( P<0.01)。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]針刺對哮喘模型大鼠肺組織中TGF-β1表達的調控[J]. 韓君萍,李雙,趙葉,楊金華,虞躍躍,孫娜,崔建美.  中國針灸. 2017(07)
[2]Ⅱ型肺泡上皮細胞Brg1基因條件敲低小鼠的基因型鑒定[J]. 司道祝,彭單伊,張榮,夏耘秋,牛超,茍好,劉姜,王莉佳,田代印,劉恩梅,鄒琳,符州.  中國細胞生物學學報. 2017(03)



本文編號：3289773