導(dǎo)師汪受傳教授領(lǐng)銜研制的金欣口服液在前期臨床和實驗研究中均被證實是抗RSV感染的有效中藥復(fù)方。本課題前期研究成果已表明金欣口服液能調(diào)控RSV感染活化誘導(dǎo)的TLR4及下游信號分子的表達水平。鑒于中醫(yī)藥作用的多靶點性,本實驗從干擾TLR4表達入手,探討RSV感染時金欣口服液對TLR4信號通路的調(diào)控,及與其它TLRs的相關(guān)性。目的本實驗主要研究目的是干擾TLR4表達,分析金欣口服液對TLR4信號通路下游相關(guān)蛋白的影響,旨在進一步闡明金欣口服液通過免疫調(diào)節(jié)治療小兒呼吸道合胞病毒肺炎的分子生物學(xué)機理。方法本實驗采用小分子RNA干擾技術(shù),TLR4-siRNA和脂質(zhì)體Lipofectamine2000復(fù)合物轉(zhuǎn)染RAW264.7細胞,Realtime RT-PCR法檢測TLR4mRAN轉(zhuǎn)錄水平,確定siRNA干擾效率。RAW264.7細胞TLR4表達被干擾后,以RSV感染,再采用金欣口服液含藥血清處理,收集細胞,Realtime RT-PCR、Western blot法檢測TLR4及其信號通路關(guān)鍵分子TRIF、 NF-κB mRNA和蛋白的表達變化。結(jié)果1.體外化學(xué)合成的TLR4siRNA,經(jīng)脂質(zhì)體L... 

【文章來源】：南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)染后金欣口服液對RAW264.7細胞TRIF蛋白表達的影響

組；ETLR4siRNA+RSV+金欣組）如圖2-9、表2-9所示，TLR4siRNA轉(zhuǎn)染RAW264.7細胞后，可見NF-kB蛋白的表達有所下調(diào)，與正常組相比，蛋白的表達量為76.7% (戶<0.01)，表達抑制率為23.3%。轉(zhuǎn)染后，RSV感染RAW264.7細胞，可見NF-KB蛋白的表達下降56.5% (尸〈0.01 )。利巴韋林注射液、金欣含藥血清均可上調(diào)NF-kB蛋白的表達（P<0.05)，二者無顯著性差異（i^〉0.05)。32

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3243295