目的:構(gòu)建NgR特異性siRNA慢病毒重組體,在新生大鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷模型水平,探討NgR特異性siRNA慢病毒重組體干擾大鼠NgR mRNA表達及其對新生大鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷的修復作用。方法:1、建立P3新生SD大鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷模型,從生物行為學、組織形態(tài)學進行驗證。2、設(shè)計、構(gòu)建NgR特異性siRNA慢病毒重組體并鑒定。3、Western Blot方法外源篩靶、內(nèi)源篩靶,選擇最有效的靶點,并包裝成慢病毒。4、40只SD大鼠隨機分為假手術(shù)組、模型組、空病毒組、慢病毒組（每組10只）,新生大鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷3天后（P6）經(jīng)側(cè)腦室注射給藥,觀察大鼠的行為學改變。5、80只SD大鼠隨機分為假手術(shù)組、模型組、空病毒組、慢病毒組（每組20只）,新生大鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷3天后（P6）經(jīng)側(cè)腦室注射給藥,RT-PCR檢測P6、P7、P9、P13 SD大鼠NgR mRNA表達情況。結(jié)果:1、結(jié)扎P3新生SD大鼠雙側(cè)頸總動脈建立缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷模型,從生物行為學、組織形態(tài)學進行驗證,模型組都出現(xiàn)了有意義的改變。2、設(shè)計、構(gòu)建NgR特異性siRNA慢病毒重組體經(jīng)PCR鑒定、... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學福建省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

動物模型制作a結(jié)扎頸總動脈b造模術(shù)后ab

臺上休息 30s。大鼠休息 2min 后進入下一個象限訓練。2.3.3 測試階段訓練 2d 后的第 3d 進行正式測試。用微機追蹤系統(tǒng)記錄整個實驗過程，應系統(tǒng)軟件進行視頻記錄及數(shù)據(jù)分析。分析大鼠找到平臺的時間（平均逃避潛期）、距離靶心的距離，檢測大鼠空間學習能力。在第 5d 第四象限結(jié)束后，撤平臺，觀察 60s 內(nèi)大鼠在平臺附近停留的情況，檢測大鼠空間記憶能力，見圖

結(jié) 果驗動物術(shù)后情況前大鼠全身粉嫩，吸吮有力，術(shù)后大鼠全身變得蒼白，自發(fā)運動減少，多數(shù)于 48h 后恢復正常。Sham 組術(shù)中死亡 1 只，可能是術(shù)中麻醉術(shù)后 48h 內(nèi)無死亡。WMD 組術(shù)中死亡 3 只，1 只可能是剝離動脈和神干凈，誤把迷走神經(jīng)與頸總動脈一起結(jié)扎造成死亡；2 只是用力過猛拉扯斷，引起大出血死亡，術(shù)后 48h 內(nèi)死亡 2 只，估計與手術(shù)創(chuàng)傷及力差有關(guān)。物行為學觀察重比較MD 組大鼠平均體重（31.094±1.285 g）明顯低于相應日齡 Sham 組大（36.256±1.363 g），兩組比較有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。兩組平均圖 3，統(tǒng)計數(shù)據(jù)分析見表 1。

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]Nogo-66受體在成年大鼠脊髓白質(zhì)內(nèi)膠質(zhì)細胞的分布[J]. 胡澤嵐,劉瑩瑩,金衛(wèi)林,劉惠玲,鞠躬.  第四軍醫(yī)大學學報. 2004(16)



本文編號：3118181