益氣化瘀清熱方治療難治性腎病的臨床觀察及其對足細胞表達TRPC6、Podocalyxin的影響
本文關鍵詞:益氣化瘀清熱方治療難治性腎病的臨床觀察及其對足細胞表達TRPC6、Podocalyxin的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:本論文分為臨床觀察、實驗研究兩個部分臨床觀察 目的:回顧性調(diào)查分析益氣化瘀清熱方治療兒童難治性腎病綜合征臨床療效。方法:采用回顧性縱向?qū)Ρ妊芯糠治?013年7月至2014年7月之間在河南中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院及鄭州市兒童醫(yī)院治療的60例難治性腎病綜合征患兒,觀察其在治療前及治療后2周、4周、8周、12周、24周及36周的24小時尿蛋白定量(24h-UTP)、總膽固醇(CHOL)、血漿白蛋白(ALB)、活化部分凝血酶時間(APTT)、凝血酶原時間(PT)、纖維蛋白原(FIB)、疾病復發(fā)率及血常規(guī)、肝腎功相關安全性指標的變化,通過統(tǒng)計學分析了解兩組之間的差異。結果:治療組總有效率86.7%,對照組總有效率70.0%,兩組間有統(tǒng)計學意義(P0.05)。并且治療組復發(fā)率比對照組低(P0.05)。36周治療結束后,治療組的尿蛋白定量和總膽固醇下降程度、血清白蛋白升高程度及凝血改善情況均優(yōu)于對照組(P0.05)。結論:益氣化瘀清熱方可改善患兒24小時蛋白定量、血漿白蛋白、血脂及高凝血情況,減少兒童難治性腎病綜合征的復發(fā)率,提高臨床總有效率,臨床觀察未見不良反應。實驗研究 目的:觀察益氣化瘀清熱方及其拆方對小鼠足細胞表達瞬時受體電位陽離子通道蛋白6(TRPC6)、podocalyxin的表達影響,探討這些中藥對嘌呤霉素氨基核苷(PAN)損傷足細胞的作用機理。方法:應用PAN刺激體外培養(yǎng)的小鼠足細胞,形成PAN足細胞損傷模型,造模成功后的足細胞隨機分為益氣組、化瘀組、清熱組、復方組、對照組、雷公藤組、模型組、空白組,采用RT-PCR和Western Blot法檢測各組血清對小鼠足細胞表達TRPC6、podocalyxin mRNA及蛋白表達的影響。結果:1、RT-PCR結果示,TRPC6、podocalyxin在空白組與模型組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。①含藥血清作用24小時后,雷公藤組和清熱組在提高podocalyxin表達方面作用最強,而其余各組的作用低于對照組;雷公藤組降低TRPC6表達最強,其次為清熱組、化瘀組和復方組,益氣組作用最弱。②含藥血清作用48小時后,各含藥血清均能促使podocalyxin表達升高,其中復方組和雷公藤組表現(xiàn)最強,其次為化瘀組,益氣組和清熱組作用最弱;各含藥血清均能降低TRPC6表達,且各組間無明顯差異(P0.05)。2、Western Blot結果示TRPC6、podocalyxin蛋白表達在空白組與模型組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。①含藥血清作用24小時后,清熱組對升高podocalyxin蛋白表達作用最強,優(yōu)于復方組、清熱組、化瘀組(P0.05);各含藥血清均能降低TRPC6蛋白表達,其中益氣組和化瘀組作用最強,優(yōu)于復方組和清熱組(P0.05)。②各含藥血清作用48小時后,各組含藥血清均能促使podocalyxin蛋白表達增高,其中復方組表達作用最強,其次為化瘀組,而益氣組和清熱組作用不明顯;各含藥血清均能降低TRPC6蛋白高表達,復方組作用最強,優(yōu)于益氣組、清熱組,而化瘀組作用最弱。結論:1、益氣化瘀清熱方及其拆方均能升高podocalyxin mRNA和蛋白的表達, 并降低TRPC6mRNA和蛋白的表達。2、當PAN刺激24小時后,清熱組在升高podocalyxin mRNA及蛋白表達方面作用最強。當PAN刺激48小時后,復方組在升高podocalyxin mRNA表達及蛋白表現(xiàn)最強,其次為化瘀組,益氣組和清熱組作用最弱。其中清熱組和復方組在不同時間點升高mRNA水平與雷公藤組作用相當。3、當PAN刺激24小時后,雷公藤組降低TRPC6 mRNA高表達最強,其次為清熱組、化瘀組和復方組。而在蛋白表達方面,益氣組和化瘀組作用最強,復方組和清熱組作用較弱。PAN刺激48小時后,各含藥血清均能降低TRPC6 mRNA及蛋白高表達,其中復方組在降低蛋白方面作用最強。
【關鍵詞】:益氣化瘀清熱方 臨床觀察 足細胞 Podocalyxin TRPC6
【學位授予單位】:河南中醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R272
【目錄】:
- 摘要8-10
- Abstract10-14
- 第一部分 臨床部分 益氣化瘀清熱方治療難治性腎病的臨床觀察14-30
- 前言14-15
- 研究對象與方法15-18
- 1 研究對象15-16
- 2 治療分組16
- 3 治療方法16
- 4 觀察時間16
- 5 觀察指標16-17
- 6 療效標準17
- 7 統(tǒng)計方法17-18
- 研究結果18-24
- 1 一般資料比較18
- 2 基線資料比較18-19
- 3 兩組總療效比較19
- 4 兩組復發(fā)情況比較19
- 5 兩組療效指標比較19-23
- 6 兩組安全性指標比較23-24
- 討論24-29
- 1 原發(fā)性腎病綜合征的發(fā)病機制24
- 2 難治性腎病綜合征難治原因24-26
- 3 益氣化瘀清熱方治療R N S理 論依據(jù)及臨床分析26-29
- 結論29-30
- 第二部分 實驗研究30-58
- 前言30-31
- 實驗一 不同含藥血清影響小鼠足細胞表達podocalyxin m RNA及TRPC6m R N A的 研究31-42
- 材料與方法31-36
- 1 實驗材料和儀器31-32
- 2 實驗方法32-35
- 3 統(tǒng)計學方法35-36
- 實驗結果36-42
- 1 不同含藥血清干預小鼠足細胞不同時間PodocalyxinmRNA表 達結果36-38
- 2 不同含藥血清干預小鼠足細胞不同時間TRPC6mRNA表 達結果38-42
- 實驗二 不同含藥血清影響小鼠足細胞表達podocalyxin及TRPC6蛋 白研究42-54
- 材料與方法42-49
- 1 實驗材料42-45
- 2 實驗方法45-48
- 3 統(tǒng)計方法48-49
- 實驗結果49-54
- 1 Podocalyxin蛋 白在含藥血清作用 24h和 48h表 達變化49-51
- 2 TPRC6 蛋白在含藥血清作用 24h和 48h表 達變化51-54
- 討論54-56
- 實驗結論56-57
- 問題和展望57-58
- 致謝58-59
- 參考文獻59-62
- 附錄62-84
- 附錄1 實驗圖片62-63
- 附錄2 益氣化瘀清熱方治療難治性腎病臨床觀察表63-70
- 附錄370-84
- 文獻綜述 170-78
- 參考文獻75-78
- 文獻綜述 278-84
- 參考文獻81-84
- 附錄4 在校期間論文論著和科研情況84
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