白血病兒童骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及其生物學(xué)特性和免疫調(diào)節(jié)功能的初步研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-11 14:09
目的通過體外實(shí)驗(yàn)研究白血病兒童骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的生物學(xué)特性及其免疫調(diào)節(jié)作用,從而探討白血病兒童骨髓來源的MSCs在白血病兒童化療后實(shí)行自體回輸?shù)目尚行约翱赡艹霈F(xiàn)的免疫重建作用。方法通過Ficoll-Hypaque梯度密度離心法分離出白血病兒童骨髓單個(gè)核細(xì)胞,貼壁法體外純化擴(kuò)增MSCs,獲得第3~4(P34)代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。光鏡觀察細(xì)胞生長形態(tài),瑞氏染色觀察細(xì)胞核漿比例及形態(tài),MTT法檢測細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,FCM)檢測免疫表型,油紅O染色及茜素紅染色檢測其向脂肪及骨細(xì)胞分化等觀察其生物學(xué)特性。取外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cells, PB-MNCs),用植物凝集素(PHA)及白細(xì)胞介素2(IL-2)進(jìn)行刺激后將MSCs按照不同比例(1/51/1000)加入MNCs中,進(jìn)行細(xì)胞相互接觸的共培養(yǎng)、transwell體系的細(xì)胞非接觸性共培養(yǎng),在培養(yǎng)第5天后收集懸浮細(xì)胞,用LDH法檢測各組中MNCs的增殖情...
【文章來源】:廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
骨髓單個(gè)核細(xì)胞接種于塑料培養(yǎng)瓶,24h后部分細(xì)胞開始貼壁,形成集落
CD34、CD14雙陰性表達(dá)率98%以上;HLA-DR表達(dá)陰性;CD29、CD105、CD13陽性表達(dá)率99%
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞輸注支持長期反復(fù)化療急性白血病的療效觀察[J]. 楊桂玲,岳軍峰,汪清銘,石慶之,李劍,湯愛萍. 實(shí)用臨床醫(yī)學(xué). 2008(07)
[2]間充質(zhì)干細(xì)胞不抑制體內(nèi)T淋巴細(xì)胞的增殖[J]. 王恒湘,邊素艷,陳金龍,汪勁松,郭子寬. 組織工程與重建外科雜志. 2006(05)
[3]Ad/IFNγ轉(zhuǎn)染的骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體內(nèi)抗白血病作用[J]. 徐海鵬,呂躍,李曉青,譚銀多,耿其榮,陳曉勤. 廣東醫(yī)學(xué). 2006(06)
[4]不同年齡段人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性的研究[J]. 黃科,周敦華,黃紹良,梁舜華. 中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2005(06)
[5]化療聯(lián)合自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞治療急性白血病的臨床觀察[J]. 江浩,劉開彥,童春容,江濱,陸道培. 中華內(nèi)科雜志. 2005(03)
[6]間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響[J]. 江小霞,張毅,李秀森,吳英,于曉妉,唐佩弦,毛寧. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2005(02)
[7]兒童急性淋巴細(xì)胞白血病患者T淋巴細(xì)胞免疫功能的研究[J]. 鞠秀麗,孫念政,劉繼玲,段春紅. 臨床血液學(xué)雜志. 2004(02)
[8]自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞治療急性B淋巴細(xì)胞白血病22例臨床觀察[J]. 周曉宏,童春容. 河北醫(yī)學(xué). 2003(04)
[9]骨髓微環(huán)境的病理觀察(附血液腫瘤性疾病36例分析)[J]. 中國病理生理雜志. 2001(11)
[10]白血病T淋巴細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞功能分析[J]. 李?yuàn)?王冠軍,姚程,易永林,劉晶. 中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué). 1998(03)
本文編號(hào):2970913
【文章來源】:廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
骨髓單個(gè)核細(xì)胞接種于塑料培養(yǎng)瓶,24h后部分細(xì)胞開始貼壁,形成集落
CD34、CD14雙陰性表達(dá)率98%以上;HLA-DR表達(dá)陰性;CD29、CD105、CD13陽性表達(dá)率99%
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞輸注支持長期反復(fù)化療急性白血病的療效觀察[J]. 楊桂玲,岳軍峰,汪清銘,石慶之,李劍,湯愛萍. 實(shí)用臨床醫(yī)學(xué). 2008(07)
[2]間充質(zhì)干細(xì)胞不抑制體內(nèi)T淋巴細(xì)胞的增殖[J]. 王恒湘,邊素艷,陳金龍,汪勁松,郭子寬. 組織工程與重建外科雜志. 2006(05)
[3]Ad/IFNγ轉(zhuǎn)染的骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體內(nèi)抗白血病作用[J]. 徐海鵬,呂躍,李曉青,譚銀多,耿其榮,陳曉勤. 廣東醫(yī)學(xué). 2006(06)
[4]不同年齡段人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性的研究[J]. 黃科,周敦華,黃紹良,梁舜華. 中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2005(06)
[5]化療聯(lián)合自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞治療急性白血病的臨床觀察[J]. 江浩,劉開彥,童春容,江濱,陸道培. 中華內(nèi)科雜志. 2005(03)
[6]間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響[J]. 江小霞,張毅,李秀森,吳英,于曉妉,唐佩弦,毛寧. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2005(02)
[7]兒童急性淋巴細(xì)胞白血病患者T淋巴細(xì)胞免疫功能的研究[J]. 鞠秀麗,孫念政,劉繼玲,段春紅. 臨床血液學(xué)雜志. 2004(02)
[8]自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞治療急性B淋巴細(xì)胞白血病22例臨床觀察[J]. 周曉宏,童春容. 河北醫(yī)學(xué). 2003(04)
[9]骨髓微環(huán)境的病理觀察(附血液腫瘤性疾病36例分析)[J]. 中國病理生理雜志. 2001(11)
[10]白血病T淋巴細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞功能分析[J]. 李?yuàn)?王冠軍,姚程,易永林,劉晶. 中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué). 1998(03)
本文編號(hào):2970913
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