背景Wilson病(Wilson Disease, WD),又稱肝豆狀核變性病(Hepatolenticular degeneration,HLD),是由于ATP7B基因缺陷引起銅代謝異常的常染色體隱性遺傳病,以不同程度的肝損害、腦退行性變和角膜邊緣銅鹽沉著環(huán)為臨床特征,ATP7B基因位于13q14.3,含個21外顯子,編碼一種P型銅轉(zhuǎn)運ATP酶。肝豆狀核變性是由于ATP7B基因突變,使ATP酶功能喪失,多余的銅不能清除而在肝臟、大腦大量沉積而出現(xiàn)肝病和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。本病臨床表現(xiàn)多種多樣,易造成漏診和誤診,早期診斷、早期治療可以在一定程度上預防和逆轉(zhuǎn)臨床癥狀。ATP7B基因突變分散在基因各個部位,迄今為止已發(fā)現(xiàn)500多種ATP7B基因外顯子突變類型。 目的探討肝豆狀核變性ATP7B基因診斷的方法和意義,以及肝豆狀核變性患者基因型和臨床表型之間的關(guān)系。 方法提取7例臨床診斷為肝豆狀核變性的患兒外周血基因組DNA,應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)對肝豆狀核變性ATP7B基因的21個外顯子進行擴增,運用DNA直接測序法檢測是否存在突變,并分析WD患者的臨床特點。 結(jié)果7例患者中,1例患者在第2外顯子檢測到918_919insC純合突變,以肝腎損害為主要表現(xiàn),該突變未見報道;1例患者檢測到第8外顯子C2332T雜合突變,表現(xiàn)為嚴重肝損害和溶血性貧血,該突變未見國內(nèi)報道;1例患者檢測到第12外顯子C2804T純合突變,以肝損害表現(xiàn)為主,癥狀較輕。6例者均發(fā)現(xiàn)存在基因多態(tài)現(xiàn)象,共四種:T1216G、G1366C、G2855A,T3419C。 結(jié)論C2332T與918_919insC突變與肝腎損害有關(guān)。C2804T是癥狀較輕的溫和突變。918_919insC在國內(nèi)外未見報道。未見突變的患者不能排除WD,突變可能位于內(nèi)含子或其他區(qū)域。DNA直接測序法可作為WD患者的基因診斷方法。
【學位單位】：廣州醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2009
【中圖分類】：R742.4
【部分圖文】：

離子到細胞膜的表面。（3）疏水區(qū)為 6 個跨膜螺旋區(qū)和 1 個親媒性區(qū)，穿插于整個多肽鏈中。ATP7B 蛋白位于反面高爾基網(wǎng)，主要功能是調(diào)節(jié)銅代謝平衡(1)將肝細胞內(nèi)過多的銅轉(zhuǎn)運到分泌途徑，排入膽道;(2)轉(zhuǎn)運銅離子與前銅藍蛋白結(jié)合，使之成為成熟的全銅藍蛋白。ATP7B 的 6 個銅離子結(jié)合區(qū)接受銅伴侶蛋白傳遞的銅后，發(fā)生構(gòu) 象 改 變 ， 此 時 該 酶 的 主 要 生 理 功 能 就 是 定 向 引 導 銅 與 銅 藍 蛋 白 前 體(apro-ceruloplasmin)結(jié)合，形成銅藍蛋白（holo-ceruloplasmin)，銅藍蛋白通過血漿分泌進入血循環(huán)，將銅運送到各組織臟器；如果銅經(jīng)飲食吸收過多，結(jié)合到 ATP7B 銅結(jié)合區(qū)的銅數(shù)量增多，銅結(jié)合區(qū)的構(gòu)象改變，導致 ATP7B 定位于另一個新的位置，進入高爾基體形成的大泡，然后該酶利用水解 ATP 釋放能量，促使銅離子完成跨膜轉(zhuǎn)運過程，將大泡腔內(nèi)的銅經(jīng)肝細胞膜排入膽汁，再通過膽汁由糞便排出多余的銅，這時 ATP7B 再回到高爾基體，這是銅排泄的正常生理途徑（見圖 2）[20]。因此 ATP7B 對維持細胞內(nèi)銅離子平衡，維持正常的銅代謝具有重要作用。

離子到細胞膜的表面。（3）疏水區(qū)為 6 個跨膜螺旋區(qū)和 1 個親媒性區(qū)，穿插于整個多肽鏈中。ATP7B 蛋白位于反面高爾基網(wǎng)，主要功能是調(diào)節(jié)銅代謝平衡(1)將肝細胞內(nèi)過多的銅轉(zhuǎn)運到分泌途徑，排入膽道;(2)轉(zhuǎn)運銅離子與前銅藍蛋白結(jié)合，使之成為成熟的全銅藍蛋白。ATP7B 的 6 個銅離子結(jié)合區(qū)接受銅伴侶蛋白傳遞的銅后，發(fā)生構(gòu) 象 改 變 ， 此 時 該 酶 的 主 要 生 理 功 能 就 是 定 向 引 導 銅 與 銅 藍 蛋 白 前 體(apro-ceruloplasmin)結(jié)合，形成銅藍蛋白（holo-ceruloplasmin)，銅藍蛋白通過血漿分泌進入血循環(huán)，將銅運送到各組織臟器；如果銅經(jīng)飲食吸收過多，結(jié)合到 ATP7B 銅結(jié)合區(qū)的銅數(shù)量增多，銅結(jié)合區(qū)的構(gòu)象改變，導致 ATP7B 定位于另一個新的位置，進入高爾基體形成的大泡，然后該酶利用水解 ATP 釋放能量，促使銅離子完成跨膜轉(zhuǎn)運過程，將大泡腔內(nèi)的銅經(jīng)肝細胞膜排入膽汁，再通過膽汁由糞便排出多余的銅，這時 ATP7B 再回到高爾基體，這是銅排泄的正常生理途徑（見圖 2）[20]。因此 ATP7B 對維持細胞內(nèi)銅離子平衡，維持正常的銅代謝具有重要作用。

ATP7B基因21個外顯子23個片段2%瓊脂糖凝膠電泳圖

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 邱曉云，盧大儒;內(nèi)含子在基因表達調(diào)控中的作用[J];國外醫(yī)學.遺傳學分冊;1996年01期

2 馮凱;許賢豪;呂憲民;孟曉梅;謝琰臣;張華;殷健;;肝豆狀核變性的早期臨床表現(xiàn)及誤診分析[J];腦與神經(jīng)疾病雜志;2005年06期

3 黃麗素;劉曉青;張雅芬;李進;;肝豆狀核變性ATP7B基因啟動子區(qū)域的分子特征[J];實用兒科臨床雜志;2007年20期

4 劉曉青,張建明,顧學范,吳潔,張雅芬,薛和平,許燮萍,鮑克容,陳瑞冠;Wilson病ATP7B基因Arg778Leu突變與臨床表型之相關(guān)性探討[J];中華兒科雜志;1999年06期

5 王檸,吳志英,林珉婷,慕容慎行;應(yīng)用限制性酶譜分析法快速檢出Wilson病基因突變熱點[J];中華神經(jīng)科雜志;1999年05期

6 梁秀齡,馬少春,徐評議;肝豆狀核變性病基因突變的檢測及酶切診斷方法[J];中華神經(jīng)科雜志;2000年03期

7 黃帆,梁秀齡,王瑩,徐評議,楊春水,閻振文;肝豆狀核變性基因Arg778Leu突變與臨床表現(xiàn)關(guān)系研究[J];中華神經(jīng)科雜志;2000年05期

8 吳志英,王檸,林珉婷,方玲,慕容慎行;Wilson病基因全長外顯子的突變檢測和分析[J];中華神經(jīng)科雜志;2001年03期

9 趙鵬,張本恕;載脂蛋白E基因型對肝豆狀核變性發(fā)病年齡的影響[J];中華神經(jīng)科雜志;2005年08期

10 許月芳,范玉新,余龍,江螢,楊任民,韓詠竹,崔映宇,任明山,趙壽元;PCR直接測序在Wilson病基因第8外顯子檢出一個突變熱點[J];中華醫(yī)學遺傳學雜志;1998年05期

本文編號：2829016