【摘要】：目的:從基因和蛋白水平探討轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2(transglutaminase-2,TGM2)在過敏性紫癜腎損傷中的表達及其臨床意義,初步探討過敏性紫癜患兒腎損害可能的發(fā)病機制,從而為臨床對過敏性紫癜性腎炎的治療提供新的方法和理論依據(jù)。方法:納入2016年10月至2017年4月江西省兒童醫(yī)院住院的初發(fā)的過敏性紫癜患兒,從中隨機選取20例過敏性紫癜、20例腎性過敏性紫癜患兒作為實驗組;從江西省兒童醫(yī)院兒童保健科隨機選取同期年齡、性別相匹配的20例健康體檢兒童作為對照組,采用實時熒光定量PCR方法檢測過敏性紫癜組、腎型過敏性紫癜組和健康對照組外周血有核細胞TGM2 mRNA的表達。從江西省兒童醫(yī)院病理科隨機選取同期年齡和性別匹配的5例腎母細胞瘤患者手術(shù)切除組織,分離腫瘤組織遠端的正常組織作為對照組,應(yīng)用免疫組化方法檢測腎型過敏性紫癜組和正常對照腎組織TGM2蛋白的表達,并根據(jù)ISKDC分級標準對腎型過敏性紫癜組腎臟損害程度分組,分析TGM2的表達強度與腎臟病理損害程度的關(guān)系。結(jié)果:腎型過敏性紫癜組、過敏性紫癜組和健康對照組外周血有核細胞TGM2mRNA相對表達水平分別為(5.33±1.46)、(1.21±0.32)和(1.19±0.15),腎型過敏性紫癜組較過敏性紫癜組和健康對照組相對表達水平均高,且差異均具有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.031和0.035),過敏性紫癜組與健康對照組比較無統(tǒng)計學差異。腎型過敏性紫癜組腎組織TGM2陽性表達評分四分位數(shù)(P_(25),P_(75))為2.25-3.00,正常對照組TGM2陽性表達評分四分位數(shù)為1.00-1.50,兩組差異具有顯著性(P=0.001);根據(jù)ISKDC分級,20例腎型過敏性紫癜患兒中包括Ⅱ級4例,Ⅲ級12例,Ⅳ級4例,其TGM2陽性表達評分四分位數(shù)分別為2.00-2.75、3.00-3.00和3.00-4.00,三組表達水平具有統(tǒng)計學差異,且其表達水平與腎型過敏性紫癜病理分級呈正相關(guān)(Kendall相關(guān)系數(shù)為0.659),即病理分級程度越重,TGM2表達水平越高。結(jié)論:TGM2的表達與過敏性紫癜腎臟受損有關(guān),且與腎臟病理損害程度有關(guān),TGM2可能參與了腎型過敏性紫癜的發(fā)病機制,其表達升高可能成為過敏性紫癜患兒腎臟損傷及損傷程度的一種反映指標。
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R725.5;R726.9
【圖文】：

14圖 1 RNA 瓊脂糖凝膠電泳性鑒定熔解曲線分析，內(nèi)參 GAPDH 基因和 TGM2 基因的擴圖 2.3 和圖 2.4 所示：擴增曲線中基線整體平行性良好，示各標本擴增效率在，Tm 值一致，提示擴增產(chǎn)物特異性體）的產(chǎn)生。 2%瓊脂糖凝膠電泳分析后，可見條帶片段長度為 121bp，GAPDH 擴增片段長度，提示擴增片段的特異性良好（

第 3 章 結(jié)果3）測序?qū)?PCR 產(chǎn)物連接 pGEM -T Easy 載體（因目的片段較短，以提高測序的性）送檢上海生工公司測序，其結(jié)果完全符合 GenBank 中 TGM2 mRNA 序圖 4 所示。綜合以上 3 種方法可確認擴增產(chǎn)物的特異性，即為實驗?zāi)康漠a(chǎn)物。

性）送檢上海生工公司測序，其結(jié)果完全符合 GenBank 中 TGM2 mRNA 序圖 4 所示。綜合以上 3 種方法可確認擴增產(chǎn)物的特異性，即為實驗?zāi)康漠a(chǎn)物。圖 2.1 內(nèi)參基因 GAPDH 擴增曲線

【參考文獻】

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本文編號：2787344