【摘要】：目的 以中濃度氧( FiO_2 : 60% )吸入法制作新生小鼠支氣管肺發(fā)育不良(bronchopulmonary Dysplasia,BPD)動物模型,研究中濃度氧暴露對新生小鼠肺部變化的影響、并檢測其血中及肺血管內皮細胞膜抗原Endoglin(CD105)的表達情況及CD105在血和肺組織中的表達關系,以尋求BPD新生小鼠肺微血管發(fā)育不良新的發(fā)病機制。 方法 將50只4日齡清潔級新生昆明小鼠,隨機分為2組(氧氣組、空氣組),每組25只。氧氣組置于氧濃度為60%的氧箱中,空氣組置于氧濃度為21%的空氣中,建立BPD小鼠模型,每組于不同時間點,隨機選取5只新生小鼠,分別于實驗的第0d、第7d、第14d、第21d、第28d時稱重后,摘眼球法留取血標本,應用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測血清中CD105的表達水平,分離肺組織,HE染色,光鏡下觀察肺組織形態(tài)學變化,測量呼吸膜的厚度,計算放射狀肺泡計數(shù)(radical alveolar counts,RAC)表示肺泡的數(shù)目,進行肺組織纖維化評分,免疫組織化學染色后,通過圖像分析技術測定CD105的積分光密度,對肺組織中的CD105表達水平進行半定量分析,SPSS13.0統(tǒng)計分析CD105在兩部位中表達的相關性。 結果 1.實驗動物一般狀態(tài):氧氣組有不同程度的精神反應差,體重增長緩慢,生長發(fā)育遲緩,刺激后反應遲鈍,肢體活動少,并出現(xiàn)不同程度呼吸困難和發(fā)紺。 2.HE染色下,隨著吸氧時間的延長,于吸氧第21d時氧氣組肺組織中出現(xiàn):正常的肺泡結構消失,肺泡腔顯著增大,肺泡融合,放射狀肺泡計數(shù)減少(P0.01),呼吸膜增厚(P0.01),肺間質細胞增加,膠原纖維明顯增生呈玻璃樣變(P0.01),此變化符合BPD病理學的特征。 3.空氣組血清中CD105濃度在各時間點無顯著性改變,平均值波動在264.69～268.55ng/L(P0.05)之間。氧氣組小鼠血清中CD105濃度于吸氧第7d((346.42±14.68,P0.01)后顯著高于空氣組,隨著吸氧時間的延長,CD105的表達水平呈逐漸增高的趨勢(14d:400.25±20.10,21d:505.15±6.15,P 0.01),吸氧21d后(28d:451.88±9.96,P 0.01)表達水平有所降低,但仍高于同齡空氣組。 4.肺組織免疫組化分析顯示:在實驗過程中CD105抗原在部分空氣組小鼠肺部組織中也有弱陽性表達,表達部位主要為血管內皮細胞、支氣管上皮細胞和肺間質。于吸氧7d后,氧氣組CD105的表達水平與空氣組相比有顯著差異(2.24±0.15,P0.01),在肺泡上皮細胞和肺間質中也可見明顯的陽性表達,且隨氧療通氣時間的延長,表達水平逐步上調,于吸氧第21d時達到最高峰,以后稍有減弱,但依然維持較高水平。兩組于實驗0d時,CD105的表達水平差異無統(tǒng)計學意義(1.19±0.09,P0.05)。氧氣組吸氧后肺組織中的CD105均較空氣組明顯升高(P 0.01)。 5.CD105在BPD新生小鼠血清中和肺組織中的表達水平呈正相關( r = 0.973)。 結論 1.持續(xù)60%濃度的氧暴露可導致新生小鼠肺組織出現(xiàn)肺泡發(fā)育障礙、肺微血管發(fā)育異常和肺組織纖維化等病理形態(tài)學改變,此變化符合早產(chǎn)兒BPD的發(fā)生發(fā)展特點和病理學改變。 2.CD105在血清中及肺組織中的表達水平隨著吸氧時間的增加而呈增高的趨勢,并在血清中和肺組織中的表達水平呈正相關。 3.CD105可能代替?zhèn)鹘y(tǒng)的血管生長因子,成為支氣管肺發(fā)育不良微血管發(fā)育障礙的新的調節(jié)因子。
【學位授予單位】：泰山醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R722.1
【圖文】：

圖 1 實驗第 21d（上為氧氣組，下為空氣組） 圖 2 實驗第 28d（右為氧氣組，左為空氣組）圖 3 空氣組肺切片（HE 染色,x200） 圖 4 氧氣組吸氧前肺切片（HE 染色,x200）

圖 1 實驗第 21d（上為氧氣組，下為空氣組） 圖 2 實驗第 28d（右為氧氣組，左為空氣組）圖 3 空氣組肺切片（HE 染色,x200） 圖 4 氧氣組吸氧前肺切片（HE 染色,x200）

圖 3 空氣組肺切片（HE 染色,x200） 圖 4 氧氣組吸氧前肺切片（HE 染色,x200）圖 5 空氣組實驗第 7d 肺切片（HE 染色,x200） 圖6 氧氣組吸氧第 7d 肺切片（HE 染色,x200）

【參考文獻】

相關期刊論文 前6條

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相關博士學位論文 前1條

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本文編號：2782465