【摘要】： 目的: 1、建立新生大鼠高氧性肺損傷的模型;2、觀察高氧性肺損傷急性、亞急性期肺組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-2,9(matrix metalloproteinases,MMP-2,9)的表達(dá)量和活性的變化,探討其在基質(zhì)損傷和重建中的作用;3、探討給予1型血管緊張素受體拮抗劑纈沙坦,對(duì)高氧性肺損傷的保護(hù)作用和MMP-2,9表達(dá)的影響,為臨床防治高氧性肺損傷提供依據(jù)。 方法: 72只3～5天的新生Sprague Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分成3組:Ⅰ空氣組;Ⅱ高氧+生理鹽水(高氧組) ;Ⅲ高氧+纈沙坦(治療組),各24只。再按實(shí)驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)3,7天分二個(gè)亞組12只;每個(gè)亞組分灌洗組和非灌洗組,各6只。將Ⅱ、Ⅲ組放于氧箱中,保持箱內(nèi)氧氣濃度為90%～95%,Ⅰ組置于空氣中;Ⅲ組自實(shí)驗(yàn)次日起每日同一時(shí)間灌入纈沙坦30mg/kg;Ⅱ組灌入等量的生理鹽水。每組分為①肺泡灌洗組和②非肺泡灌洗組兩個(gè)亞組。灌洗組在各時(shí)間點(diǎn)麻醉動(dòng)物行支氣管肺泡灌洗,測(cè)定灌洗液中MMP-2,9表達(dá)活性;非灌洗組各時(shí)間點(diǎn)處死動(dòng)物,取左肺行免疫組織化學(xué)結(jié)合顯微圖像分析檢測(cè)MMP-2,9表達(dá)半定量分析;右肺100mg制肺組織勻漿,檢測(cè)總蛋白和丙二醛(MDA),余下右肺組織稱量后置于烤箱中測(cè)肺濕/干重比。 結(jié)果: 1.高氧下3天新生大鼠精神反應(yīng)差,7天后體重增長(zhǎng)不明顯,呼吸急促,活動(dòng)遲緩。 2.肺組織病理切片:高氧組3天時(shí)肺泡腔內(nèi)有明顯出血和炎性細(xì)胞滲出,7天時(shí)損傷加重,肺間隔增寬,肺組織結(jié)構(gòu)紊亂。纈沙坦治療組炎癥改變有減輕,肺間隔增寬不明顯。 3.肺濕/干重比:實(shí)驗(yàn)3天,高氧組較空氣組增高;7天時(shí),高氧組明顯高于空氣組(p0.01),而纈沙坦治療組與高氧組相比,該比值有明顯下降。 4.肺組織勻漿總蛋白(Total Protein ,TP)含量檢測(cè):實(shí)驗(yàn)3天,高氧組TP含量已高于空氣組;7天時(shí),高氧組TP含量持續(xù)增高;纈沙坦治療組與高氧組相比,實(shí)驗(yàn)3天、7天均明顯下降。 5.肺組織勻漿丙二醛(MDA)含量測(cè)定:實(shí)驗(yàn)3天時(shí),高氧組MDA高于空氣中(p0.01),隨高氧暴露的持續(xù),繼續(xù)增高;纈沙坦治療組與高氧組相比,3天和7天MDA含量明顯下降(p0.01)。 6.肺組織MMP-2,9表達(dá)(免疫組化):正�？諝饨M肺組織中MMP-2和MMP-9均僅有較弱的表達(dá)。高氧暴露后,MMP-2表達(dá)明顯增多、增強(qiáng),3、7天與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)空氣組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01);但MMP-9表達(dá)在高氧后7天始有明顯增強(qiáng),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。纈沙坦治療3天MMP-2和MMP-9表達(dá)均無(wú)明顯變化,治療7天才明顯抑制兩酶的表達(dá)強(qiáng)度,與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)高氧組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。 7.肺泡灌洗液中MMP-2,-9活性(酶譜學(xué)分析):空氣組MMP-2和MMP-9活性極低。高氧3天,MMP-2活性明顯增強(qiáng),與空氣組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,MMP-9活性增高不明顯;高氧7天時(shí)MMP-2和MMP-9活性均有明顯增強(qiáng)。纈沙坦治療3天對(duì)MMP-2和MMP-9的抑制不明顯,治療7天可抑制兩者的異常表達(dá),且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。 結(jié)論: 1、長(zhǎng)期的高濃度吸氧可導(dǎo)致新生大鼠的急性肺損傷,病理表現(xiàn)為肺組織局部充血和出血、炎癥滲出、肺泡數(shù)目減少和結(jié)構(gòu)組織紊亂; 2、MMP-2和MMP-9在新生大鼠急性高氧性肺損傷時(shí)有高表達(dá),提示其在該疾病的發(fā)展過(guò)程中有重要作用; 3、MMP-2在新生大鼠急性肺損傷時(shí)的變化較MMP-9迅速而敏感,提示前者的致?lián)p傷作用較強(qiáng); 4、血管緊張素受體拮抗劑(纈沙坦)通過(guò)抑制MMP-2和MMP-9的表達(dá),可減輕炎癥反應(yīng)和肺水腫,從而對(duì)新生大鼠的高氧性肺損傷有一定保護(hù)作用,但臨床應(yīng)用還需進(jìn)一步積累資料和研究。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R722.1

【參考文獻(xiàn)】

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1 馮琪;;支氣管肺發(fā)育不良[J];中國(guó)新生兒科雜志;2006年01期

本文編號(hào)：2745296