發(fā)布時間：2020-07-05 11:16

【摘要】：目的:明確Sec10在單側(cè)先天性腎盂輸尿管連接部梗阻患者輸尿管組織中的表達(dá)情況,探討其與兒童中重度腎盂輸尿管連接處梗阻的相關(guān)性。實驗材料與方法:1、實驗標(biāo)本來源:實驗組標(biāo)本來均源于在2015年1月-2018年12月期間在我院泌尿外科病房住院并進(jìn)行手術(shù)治療的因先天性腎盂輸尿管連接處梗阻導(dǎo)致的單側(cè)腎積水患兒。所有患兒術(shù)前均完善彩色B超、IVP以及CT平掃+增強+三維重建等檢查,并經(jīng)手術(shù)再次證實為腎盂輸尿管連接處梗阻所導(dǎo)致的單側(cè)先天性腎積水。經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn),告知患兒家屬并簽署知情同意書后,留取患兒術(shù)中所切除的輸尿管標(biāo)本。保留標(biāo)本34例(n=34),根據(jù)SFU分級法將其進(jìn)一步分為中度組(n=6)、重度組(n=28)。對照組為同期在本院泌尿外科行手術(shù)治療的單側(cè)腎母細(xì)胞瘤患兒,共10例(n=10),所有患者術(shù)前未進(jìn)行化療,所取的輸尿管標(biāo)本無腫瘤侵潤。2、實驗方法:(1)HE染色:對組織標(biāo)本進(jìn)行固定、脫水、透明、浸蠟、包埋、制作石蠟切片、HE染色、脫水透明、封片,并在顯微鏡下觀察。(2)免疫組織化學(xué)法:免疫組織化學(xué)法染色,實驗步驟按試劑盒說明書進(jìn)行。在免疫組化染色中,使用Pannoramic viewer軟件系統(tǒng)分析鏡下所采集圖片,接著使用Quant center中的densito quant軟件進(jìn)行定量分析,然后進(jìn)一步對每個組織進(jìn)行分析,識別出強陽性,中度陽性,弱陽性及陰性的面積(單位:像素)以及陽性的百分比,最后再進(jìn)行H-score的評分。(3)統(tǒng)計學(xué)分析:使用SPSS21.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理,連續(xù)變量采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用方差分析;分類變量使用構(gòu)成比來表示,組間比較采用Fisher’s精確檢驗,P0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1.臨床基本資料:各組患兒性別、側(cè)別、BMI之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2.HE染色結(jié)果:腎盂輸尿管連接處梗阻組患兒的輸尿管組織可見肌層纖維組織明顯增生,肌層肥厚,排列紊亂、稀疏,其間可見大量增粗的膠原纖維,管腔明顯狹窄。腎母細(xì)胞瘤對照組輸尿管組織未見異常改變,無腫瘤細(xì)胞浸潤。3.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果:在中度組、重度組以及對照組的輸尿管組織中均有Sec10的陽性表達(dá)。其中,腎母細(xì)胞瘤組Sec10的總陽性比率為98.30%,H-Score為146.90±9.94;中度組總陽性比率為99.62%,H-Score為153.92±11.85;重度組Sec10的總陽性比率為98.92%,H-Score為146.15±9.65,對三組間數(shù)據(jù)進(jìn)行比較,差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4.相關(guān)性分析:Sec10的表達(dá)水平與腎盂輸尿管連接處梗阻的疾病嚴(yán)重程度沒有明顯的相關(guān)性(r=-0.114,P=0.457)。結(jié)論:腎盂輸尿管連接處梗阻患兒的輸尿管組織與腎母細(xì)胞瘤患兒的輸尿管組織的Sec10表達(dá)水平?jīng)]有顯著差異,并且其表達(dá)水平與腎盂輸尿管連接處梗阻疾病的嚴(yán)重程度無明顯相關(guān)性。提示Sec10的表達(dá)水平與腎盂輸尿管連接處梗阻的發(fā)生可能相關(guān)性不大,故暫時不能將此指標(biāo)作為診斷腎盂輸尿管連接處梗阻的潛在生物標(biāo)志物。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R726.9
【圖文】：

圖 2.1 數(shù)據(jù)分組流程圖2.5 實驗方法及過程2.5.1 標(biāo)本來源及保存經(jīng)倫理委員會批準(zhǔn)，告知患兒家屬本課題的目的，患兒監(jiān)護(hù)人書后，留取患兒術(shù)中所切除的輸尿管標(biāo)本，新鮮的離體組織標(biāo)本在于-80℃冰箱儲存?zhèn)溆谩?.5.2 實驗材料（1）主要實驗試劑：試劑 廠家 貨號無水乙醇 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司二甲苯 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司EDTA(PH9.0)抗原修復(fù)液 Servicebio G12PBS 緩沖液 Servicebio G003%雙氧水 Servicebio G01

手術(shù)治療的10例（n=10）單側(cè)腎母細(xì)胞瘤患兒，年齡在10月-6歲3月[（2.84±1.87）歲]。對各組患兒的性別、患病側(cè)別、BMI進(jìn)行比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。具體結(jié)果詳見表 3.1。表 3.1 各組患兒一般資料組間比較分組（人數(shù)）性別（男/女）側(cè)別（左/右）BMI(Kg/m2）M（P25,P75) 秩均值腎母細(xì)胞瘤組（n=10） 4/6 6/4 14.95(14.29,17.60) 26.75中度腎積水組（n=6） 3/3 4/2 14.67(14.23,15.44) 22.67重度腎積水組（n=28） 21/7 20/8 14.50(13.63,16.28) 20.95H - - 1.51P 0.102 0.892 0.47二、HE 染色結(jié)果先天性腎盂輸尿管連接處梗阻所致單側(cè)腎積水患兒的輸尿管組織可見：肌層纖維組織明顯增生，肌層肥厚，排列紊亂、稀疏，其間可見大量增粗的膠原纖維，管腔明顯狹窄。腎母細(xì)胞瘤對照組輸尿管（無腫瘤細(xì)胞浸潤）未見異常改變，。（見圖 2-1、圖 2-2）

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 毛雅琪;Sec10的表達(dá)水平與兒童中重度腎盂輸尿管連接處梗阻的相關(guān)性研究[D];南華大學(xué);2019年

2 萬滔;不同分子大小的液相物質(zhì)的內(nèi)吞途徑及SEC10在哺乳動物細(xì)胞胞吞中的功能探討[D];華中科技大學(xué);2011年

本文編號：2742532