【摘要】： 病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)是小兒心血管科常見的疾病。近年來,我國(guó)VMC的發(fā)病呈上升趨勢(shì),并且已成為青少年不明原因猝死的主要原因之一。不僅如此,慢性VMC還可導(dǎo)致擴(kuò)張性心肌病的發(fā)生,嚴(yán)重危害小兒生命健康,故加強(qiáng)研究力度很有必要。迄今,VMC的治療尚無有效的辦法,因此,闡明VMC的發(fā)病機(jī)制并根據(jù)其機(jī)制提出有效的治療方法具有重要的理論和實(shí)踐意義。本研究應(yīng)用CVB3感染BALB/c小鼠建立VMC小鼠模型,干預(yù)組在感染后第四天始應(yīng)用SB203580干預(yù)3天,各組在CVB3感染后第0、4、7、10天取心肌組織應(yīng)用RT-PCR法及應(yīng)用Western blot法對(duì)各組小鼠心肌細(xì)胞核NFκB的mRNA表達(dá)和心肌細(xì)胞核NFκB的含量進(jìn)行了檢測(cè),同時(shí)測(cè)定心肌病毒載量、心肌病理積分,血TNF-α水平,觀察SB203580對(duì)CVB3體內(nèi)感染后不同時(shí)間、不同CVB3載量對(duì)心肌病理積分,心肌組織NFκBmRNA表達(dá)和心肌細(xì)胞核NFκB的含量的影響及心肌病理積分和NFκB的相關(guān)性。以期望了解NFκB在病毒性心肌炎體內(nèi)模型的作用及SB203580對(duì)病毒性心肌炎體內(nèi)模型的干預(yù)作用。研究結(jié)果表明:干預(yù)組第7、10天血中TNF-α水平、心肌細(xì)胞中病毒滴度、心肌病理積分、心肌細(xì)胞核NFκB的mRNA表達(dá)及心肌細(xì)胞核中NFκB的含量均較病毒組降低,二者4、7、10天相應(yīng)指標(biāo)均高于對(duì)照組。由此可見,應(yīng)用SB203580干預(yù)可減輕病毒性心肌炎小鼠的心肌損害,主要通過對(duì)轉(zhuǎn)錄因子NFκB抑制作用,進(jìn)而抑制TNF-α等細(xì)胞因子合成來完成。從新的角度解釋了病毒性心肌炎的發(fā)病機(jī)制。本研究還通過直線相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)病毒在心肌細(xì)胞內(nèi)的繁殖在早期VMC心肌組織的病理變化有重要作用。NFκB在調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)心肌組織中發(fā)揮了重要作用,病毒性心肌炎心肌組織的病理變化與NFκB有關(guān),揭示NFκB在心肌炎的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。干預(yù)NFκB的激活,可能減少免疫效應(yīng)細(xì)胞對(duì)心肌的攻擊,從而減輕心肌的炎癥浸潤(rùn)及壞死,維持其結(jié)構(gòu)及功能完整。本研究病毒性心肌炎的防治提供了有益的探索,也為其它炎癥相關(guān)疾病的治療研究提供一個(gè)新思路。
【圖文】：

將柯薩奇B3病毒液在滅菌小試管內(nèi)作連續(xù)的10倍稀釋，即用1ml吸管吸，加入已裝有 l.8ml 的 MEM 培養(yǎng)液（含 2%新生牛血清）的第一支小試充分振蕩；）另換 1 支新的 lml 吸管，吹打混合后，吸取 0.2ml 移入第二管 MEM 換吸管，如上充分振蕩和吹打混勻后，再吸取 0.2ml 移于第三管；）連續(xù)如此操作，將 CVB3病毒液稀釋成 10-1-10-6十個(gè)滴度。吸取每一 0.2ml，，加到已鋪 HeLa 細(xì)胞的 96 孔極中。每個(gè)稀釋度四個(gè)復(fù)孔；）每天觀察細(xì)胞的病變情況，病變細(xì)胞浮起、折光性增強(qiáng)。病變細(xì)胞>變孔。連續(xù)觀察 5 天，并作記錄。按 Reed- Muench 方法計(jì)算 CVB3的 T統(tǒng)計(jì)學(xué)處理量資料用 x ±S 表示，分別采用 F 檢驗(yàn)、t 檢驗(yàn)、直線相關(guān)分析進(jìn)行數(shù)據(jù)理由 SPSS10.0 完成。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：CVB3的 TCID50 為：107/0.1ml。

病毒性心肌炎小鼠模型料與方法分組及動(dòng)物模型制備：160只4周齡BALB/c雄性小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照毒組（n=60）、治療組（n=60）將病毒組及干預(yù)組每只小鼠均腹腔接/0.1ml[40,41,42]的CVB3病毒液0.lml，正常對(duì)照組小鼠均腹腔接種不含病毒lm1。治療組從病毒接種第4天開始，給予SB203580（配制成10μmol/L），1次/天，共3天。實(shí)驗(yàn)觀察：接種后每天觀察動(dòng)物的活性狀態(tài)、飲食情況及毛色變化，記，并于 0 天（接種當(dāng)日）、4 天、7 天、10 天斷髓處死小鼠前分別給存活圖 1.1.4.2 hela 細(xì)胞 50%病變Fig1.1.4.2 50% hela cell inflammatory lesion
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R725.4

【參考文獻(xiàn)】

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