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新生鼠窒息后氧化應(yīng)激與心肌細(xì)胞凋亡的相關(guān)性實驗研究

發(fā)布時間:2020-04-18 14:52
【摘要】:目的通過建立新生鼠窒息模型,觀察窒息后不同時間點心肌組織中氧化應(yīng)激相關(guān)酶類(SOD、GSH-PX、XOD)活力、脂質(zhì)過氧化物產(chǎn)物(MDA)含量和心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)的變化。研究在窒息致心肌損傷中氧化應(yīng)激對心肌凋亡的影響,為新生兒窒息致心肌損傷的預(yù)防和治療提供可靠實驗依據(jù)。 方法取7日齡新生大鼠48只,隨機(jī)分為6組(第1組為正常對照組,第2-6組為窒息組:分別為窒息后6h、24h、48h、72h、7d組),每組8只。將實驗動物分別放入55ml的磨口瓶中,瓶內(nèi)放入0.005kg的鈉石灰,待動物安靜后,窒息組塞緊瓶塞半小時,取出復(fù)氧120min后,放回母鼠身邊繼續(xù)喂養(yǎng),分別于窒息后6h、24h、48h、72h、7d后處死;正常對照組放入55ml的磨口瓶中半小時不塞瓶塞,取出120min后放回母鼠身邊繼續(xù)喂養(yǎng),6h后全部處死。在不同的時間段采取心肌組織樣本,采用TUNEL法檢測心肌細(xì)胞凋亡,并進(jìn)行陽性細(xì)胞的計數(shù);采用黃嘌呤氧化酶法測心肌組織勻漿SOD活性;采用二硫代二硝基苯甲酸法檢測心肌組織勻漿GSH-PX活力;采用硫代巴比妥酸法檢測心肌組織勻漿MDA含量;采用化學(xué)比色法測定心肌組織勻漿XOD活性。最后應(yīng)用單因素方差分析、相關(guān)性分析等統(tǒng)計學(xué)方法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。 結(jié)果(1)窒息后6h、24h、48h、72h組與對照組相比心肌SOD活力、心肌GSH-PX活力明顯下降(P值0.01),窒息后7d組與對照組相比兩組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P值0.05)。(2)窒息后6h、24h、48h、72h組與對照組相比心肌MDA含量、心肌XOD活性明顯增高(P值0.05),窒息后7d組與對照組相比兩組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P值0.05)。(3)窒息后各組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯高于對組,有顯著差異(P值0.05),72h組心肌凋亡指數(shù)最高,7d組陽性細(xì)胞數(shù)減少,但仍高于正常對照組。(4)心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)與心肌SOD活力、心肌GSH-PX活力呈直線負(fù)相關(guān),心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)與心肌MDA含量、心肌XOD活力呈直線正相關(guān)。 結(jié)論窒息后心肌組織氧化應(yīng)激促進(jìn)心肌細(xì)胞凋亡;心肌細(xì)胞凋亡為窒息后心肌損傷的一種主要形式;抗氧化劑可能是治療窒息致心肌損傷中的一種重要的方法;在窒息后7天時心肌組織氧化應(yīng)激逐漸恢復(fù)正常,心肌細(xì)胞凋亡開始減少但仍高與正常,提示對心肌損傷的防治應(yīng)持續(xù)至窒息后7天,以免加重心肌損傷和產(chǎn)生后遺癥。
【圖文】:

口周,眼眶,心肌細(xì)胞,凋亡細(xì)胞


躁動不安、呼吸頻率加快;約15min時躁動不安較劇烈;約23而n時開始倦怠、不愛活動口周、眼眶明顯發(fā)組;約28min時嗜睡,對外界刺激發(fā)應(yīng)差,全身皮膚發(fā)組。(見圖2一5)1.2心肌組織石蠟切片HE染色的病理變化:正常組:心肌細(xì)胞呈條索狀排列,胞漿清晰可見,無凋亡細(xì)胞及炎性細(xì)胞滲出(見圖6);窒息組:心肌細(xì)胞排列紊亂,,失去條索狀結(jié)構(gòu),心內(nèi)膜表面有少許炎性滲出,伴炎性細(xì)胞浸潤,可見凋亡細(xì)胞。(見圖7一11)圖l剛?cè)肴毖跗?安靜圖2入缺氧瓶8~:開始躁動不安圖3入缺氧瓶15min:躁動不安較劇烈圖4入缺氧瓶23~:開始倦怠口周、眼眶明顯發(fā)給

口周,眼眶


L己明醫(yī)學(xué)院碩十研究生學(xué)位論文結(jié)果1動物模型的鑒定1.1缺氧表現(xiàn):實驗前各組新生大鼠表現(xiàn)正常(見圖1),窒息模型制作中隨著時間的持續(xù)全部發(fā)生缺氧表現(xiàn),為主要表現(xiàn)為入缺氧瓶后約7一8min開始出現(xiàn)躁動不安、呼吸頻率加快;約15min時躁動不安較劇烈;約23而n時開始倦怠、不愛活動口周、眼眶明顯發(fā)組;約28min時嗜睡,對外界刺激發(fā)應(yīng)差,全身皮膚發(fā)組。(見圖2一5)1.2心肌組織石蠟切片HE染色的病理變化:正常組:心肌細(xì)胞呈條索狀排列,胞漿清晰可見,無凋亡細(xì)胞及炎性細(xì)胞滲出(見圖6);窒息組:心肌細(xì)胞排列紊亂,失去條索狀結(jié)構(gòu),心內(nèi)膜表面有少許炎性滲出,伴炎性細(xì)胞浸潤,可見凋亡細(xì)胞。(見圖7一11)
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號】:R722.1

【相似文獻(xiàn)】

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7 戚曉敏;單根法;鐘z

本文編號:2632207


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